Native Photobacterium phosphoreum (Lux) Bakterielle Luciferase

Anfrage

Katalog-Nr.

NATE-1743

Beschreibung

P. phosphoreum

Abkürz.

Bakterielle Luciferase, natürlich (P. phosphoreum)

Alias

Bakterielle Luciferase

Spezies

Luciferase

Anwendungen

Bakterielle Luciferase wird von einem Photobacterium phosphoreum Stamm, der von unserem Team aus Tintenfischen isoliert wurde, gereinigt und aufgrund seiner hellsten Lumineszenz ausgewählt. Das luxab-Gen wurde durch PCR amplifiziert und kloniert. Die Sequenzen der klonierten α- und β-Untereinheiten haben eine Identität von 94% bzw. 92% zu den Proteinen P24113 und P12744 von Photobacterium phosphoreum (SwissProt-Eintrag).

Aussehen

In lumineszenten marinen Photobakterien resultiert die Lichtproduktion aus zwei aufeinanderfolgenden Reaktionen:
Die erste wird von der NAD(P)H-FMN-Oxidoreduktase (EC 1.6.8.1) katalysiert, die FMNH2 produziert, das als Substrat für die zweite Reaktion dient, die von einer Luciferase (EC 1.14.14.3) katalysiert wird, um Licht in Anwesenheit eines aliphatischen Aldehyds und molekularem Sauerstoff zu erzeugen.
In Anwesenheit von begrenzten Konzentrationen des NADH-Substrats ist die Lichtintensität proportional zur NAD(P)H-Konzentration. Die Kopplung von bakterieller Luciferase an FMN-NAD(P)H-Oxidoreduktase wurde verwendet, um ultrasensitive analytische Werkzeuge zur Quantifizierung von NAD(P)H und den Substraten von NADH-, NADPH-abhängigen Enzymen (z. B. Glukose, Laktat, Malat, Ethanol, Sorbit, Oxalacetat) bereitzustellen.
Bakterielle Luciferase kann zur Quantifizierung von NAD(P)H oder in dehydrogenasegekoppelten Assays verwendet werden.
Das Enzym wird lyophilisiert bereitgestellt, allein oder mit lyophilisierter FMN-Reduktase.

Verpackung

stabile lyophilisierte Form

EC-Nummer

EC 1.14.14.3

Aktivität

>500.000 RLU pro Sekunde pro µg Protein in Anwesenheit von 10µM NADH und 3,5mU/ml FMN-Reduktase, gemessen mit einem Optocomp 1 (Celsis) Luminometer.

CAS-Nr.

9014-00-0

Synonyme

Aldehydmonoxygenase; Luciferase; Vibrio fischeri Luciferase; Alkanal, reduziertes-FMN: Sauerstoff-Oxidoreduktase (1-Hydroxylierung, lumineszierend); Alkanal, FMNH2: Sauerstoff-Oxidoreduktase (1-Hydroxylierung, lumineszierend); Alkanal-Monooxygenase (FMN); Aldehyd, FMNH2: Sauerstoff-Oxidoreduktase (1-Hydroxylierung, lumineszierend)

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