Enzymaktivitätsmessung für Transferasen

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Transferasen sind eine wichtige Klasse von Enzymen, die den Transfer von funktionellen Gruppen zwischen Molekülen katalysieren und so eine Vielzahl biologischer Prozesse von Stoffwechsel bis Biosynthese antreiben. Die genaue Messung der Aktivität von Transferasen ist entscheidend, um ihre Rolle zu verstehen, ihre industrielle Anwendung zu optimieren und die Enzymtechnik voranzutreiben. Creative Enzymes bietet zuverlässige, präzise und maßgeschneiderte Enzymaktivitätsmessungen für Transferasen an und liefert Kunden hochwertige Daten und fachkundige Einblicke zur Unterstützung von Forschungs- und Anwendungsprojekten.

Warum ist die Enzymaktivitätsmessung für Transferasen wichtig

Transferasen sind verantwortlich für den Transfer funktioneller Gruppen wie Amino-, Phosphat-, Methyl-, Glycosyl- und Acylgruppen von einem Substrat auf ein anderes. Diese Enzyme sind essenziell in biochemischen Signalwegen wie Energiestoffwechsel, Signaltransduktion, Proteinmodifikation und Arzneimittelmetabolismus. Da ihre Funktion oft hochspezifisch ist, erfordert die Messung der Transferaseaktivität eine sorgfältige Auswahl der Substrate, optimierte Testbedingungen und eine rigorose Datenanalyse.

Anwendungen der Transferase-Aktivitätsmessung umfassen:

Arzneimittelentwicklung und pharmakologische Studien
Enzym-Engineering und gerichtete Evolution
Biokatalyse für die chemische und pharmazeutische Industrie
Stoffwechselweg-Engineering und Synthetische Biologie

Umfassende Serviceangebote

So funktioniert es

Schritt	Verfahren	Details
1	Enzymvorbereitung	Enzymproben werden sorgfältig gereinigt, um eine gleichbleibende Aktivität zu gewährleisten. Wir bearbeiten sowohl natürliche als auch rekombinante Transferasen.
2	Substratauswahl	Identifizierung und Validierung geeigneter Donor- und Akzeptorsubstrate. Berücksichtigung natürlicher Relevanz, Stabilität und Spezifität.
3	Testentwicklung	Maßgeschneiderte Tests, abgestimmt auf das Enzym von Interesse des Kunden. Verschiedene Testformate verfügbar: Spektrophotometrische Tests zur Überwachung der Absorption. Fluoreszenzbasierte Tests für hohe Empfindlichkeit und Durchsatz. Radioisotopenbasierte Tests (falls zutreffend) für präzises Tracking des Gruppentransfers.
4	Bestimmung der Enzymaktivität	Echtzeitüberwachung der Gruppentransferreaktionen. Strenge Kontrollen zur Gewährleistung der Reproduzierbarkeit.
5	Datenanalyse & Berichterstattung	Umfassende kinetische und Aktivitätsdaten. Fachkundige Interpretation der Ergebnisse, mit Fokus auf Enzymeffizienz, Substratspezifität und mechanistische Einblicke.

Entdecken Sie unsere spezialisierten Transferase-Aktivitätsmessungen

Um gezieltere Unterstützung für Ihre Forschungs- und Industrieanwendungen zu bieten, stellt Creative Enzymes spezialisierte Dienstleistungen innerhalb der Transferase-Familie bereit. Jeder Service ist mit optimierten Testsystemen und maßgeschneiderten Workflows konzipiert, um die einzigartige Aktivität verschiedener Transferase-Unterklassen zu erfassen.

Structure of Saccharomyces cerevisiae RNA polymerase II

Enzymaktivitätsmessung für Phosphor-Transferasen

Phosphor-Transferasen, einschließlich Kinasen und Phosphotransferasen, sind zentral für den Energiestoffwechsel und die Signaltransduktion. Unser Service verwendet empfindliche Tests – wie spektrophotometrische und fluoreszenzbasierte Methoden – zur genauen Quantifizierung des Phosphatgruppentransfers. Diese Messungen liefern Einblicke in Enzymkinetik, Substratspezifität und regulatorische Rollen und unterstützen Anwendungen in der Arzneimittelentwicklung, im Metabolic Engineering und in der Synthetischen Biologie.

Structure of human adenine phosphoribosyltransferase (APRTase) dimer in complex with phosphoribosyl pyrophosphate, adenine and ribose 5-phosphate

Enzymaktivitätsmessung für Glycosyl-, Hexosyl- und Pentosyl-Transferasen

Dieser Service konzentriert sich auf Enzyme, die Zuckergruppen übertragen, was für Glykosylierung, Polysaccharid-Biosynthese und Kohlenhydratstoffwechsel essenziell ist. Wir entwickeln maßgeschneiderte Tests zur präzisen Messung der Transferaseaktivität und liefern wichtige Informationen zu Enzymeffizienz, Spezifität des Zuckerdonors und Reaktionsgeschwindigkeit. Die Ergebnisse sind wertvoll für die pharmazeutische Forschung, industrielle Biokatalyse und Glycobiologie.

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Warum Creative Enzymes wählen

Umfassende Expertise

Tiefgehendes Wissen über Transferase-Biologie und Enzymkinetik.

Modernste Technologie

Zugang zu fortschrittlichen Detektionsplattformen für zuverlässige und empfindliche Ergebnisse.

Individuelle Lösungen

Maßgeschneiderte Tests und Workflows für vielfältige Forschungs- oder Industrieanforderungen.

Hochwertige Daten

Rigide Protokolle, Qualitätskontrolle und garantierte Reproduzierbarkeit.

Vertraulichkeit & Zuverlässigkeit

Starker Schutz des geistigen Eigentums und der Projektdaten der Kunden.

Effiziente Lieferung

Optimiertes Projektmanagement für termingerechte Ergebnisse.

Fallstudien und Anwendungen aus der Praxis

Fall 1: Katalytisches Aktivitätsprofil der polyP:AMP-Phosphotransferase aus Myxococcus xanthus

Myxococcus xanthus produziert während des Hungerns Polyphosphate (polyPs), wobei die Polyphosphatkinase (Ppk) die Fruchtkörperbildung antreibt. In dieser Studie wurde die polyP:AMP-Phosphotransferase (Pap), ein Klasse-II-Ppk2-Enzym, charakterisiert. Die Pap-Aktivität wurde durch Mn²⁺/Mg²⁺ verstärkt, zeigte eine höhere Affinität zu langkettigen polyPs, aber maximale katalytische Effizienz mit polyP60–70. Interessanterweise erzeugte Pap sequentiell ADP und ATP aus AMP und zeigte zusätzliche polyP:ADP-Phosphotransferase-Aktivität. Hungern erhöhte die Pap-Aktivität um das 2,3–2,4-fache, und rekombinantes Pap kooperierte mit Ppk1 oder Adenylatkinase (AdkA), um ATP aus AMP, ADP und polyP zu produzieren. Diese Ergebnisse unterstreichen die entscheidende Rolle von Pap bei der Energierückgewinnung während Nährstoffmangels.

Enzyme activity of polyphosphate kinase under different reaction conditions Abbildung 1. Auswirkungen der Reaktionsbedingungen auf die Pap-Aktivität. (A–C) Auswirkungen von pH (A), Temperatur (B) und Metallionen (C) auf die ADP-Synthese durch Pap. Diese Reaktionen wurden wie in Materialien und Methoden beschrieben durchgeführt. Die Daten werden als Prozentsatz der Pap-Aktivität relativ zu pH 8,0 (A), 50 °C (B) oder in Anwesenheit von 5 mM Mn²⁺ (C) angegeben, jeweils als 100 % gesetzt. (D) Substratspezifität von Pap. (Kimura und Kamatani, 2021)

Fall 2: YM155 hemmt die NleB- und SseK-Arginin-Glycosyltransferase-Aktivität

Typ-III-Sekretionssystem-Effektoren NleB und SseK sind Glycosyltransferasen, die Protein-Substrate an Argininresten modifizieren. Ein Hochdurchsatz-Screening von 42.498 Verbindungen identifizierte YM155 (Sepantroniumbromid) als Inhibitor von E. coli NleB1, Citrobacter rodentium NleB und Salmonella enterica SseK1/2. YM155 zeigte keine Toxizität gegenüber Säugerzellen und keine Kreuzreaktivität mit der Wirts-O-gebundenen N-Acetylglucosaminyltransferase. In Zelltests reduzierte YM155 das Überleben von Salmonella in mausähnlichen Makrophagenzellen, ohne das Bakterienwachstum zu beeinflussen, und unterstreicht so sein Potenzial als selektives Anti-Virulenzmittel und als mechanistische Sonde zur Untersuchung der NleB/SseK-vermittelten Glycosylierung in enterischen Pathogenen.

NleB1 inhibitor screening Abbildung 2. Ergebnisse des Primärscreenings. (A) Verteilung der Z'-Scores über alle Platten in NleB1-Inhibitionsassays. Ein durchschnittlicher Z'-Score von 0,77 +/− 0,08 wurde erzielt. (B) Hochdurchsatz-Screening (HTS)-Ergebnisse. (Zhu et al., 2021)

FAQs

F: Welche Arten von Transferasen können Sie messen?

A: Wir arbeiten mit allen Unterklassen von Transferasen, einschließlich Glycosyltransferasen, Kinasen, Methyltransferasen, Acyltransferasen, Aminotransferasen und mehr.
F: Welche Testformate bieten Sie zur Aktivitätsmessung an?

A: Je nach Enzymtyp und Projektanforderungen verwenden wir spektrophotometrische, fluoreszenzbasierte, elektrochemische oder radioisotopenbasierte Tests.
F: Können Sie die Aktivität in Roh-Extrakten messen oder ist eine Reinigung erforderlich?

A: Beide Optionen sind möglich. Während eine Reinigung für präzise Messungen empfohlen wird, können wir Tests auch für rohe oder teilweise gereinigte Enzympräparationen entwickeln, falls erforderlich.
F: Wie lange dauert ein typisches Projekt?

A: Die meisten Projekte zur Transferase-Aktivitätsmessung werden innerhalb von 2–4 Wochen abgeschlossen, abhängig von der Komplexität des Tests und dem Enzymtyp.
F: Bieten Sie neben der Aktivitätsmessung auch kinetische Analysen (K_m, V_max usw.) an?

A: Ja, wir bieten vollständige kinetische Profile, einschließlich K_m, V_max, Umsatzraten und Hemmungsstudien auf Anfrage.
F: Bieten Sie Enzymaktivitätsmessungen auch für andere Enzymtypen an?

A: Ja. Neben Transferasen bieten wir umfassende Aktivitätsmessungen für alle wichtigen Enzymklassen an, einschließlich Oxidoreduktasen, Hydrolasen, Lyasen, Isomerasen und Ligasen.

Referenzen:

Kimura Y, Kamatani S. Catalytic activity profile of polyP:AMP phosphotransferase from Myxococcus xanthus. Journal of Bioscience and Bioengineering. 2021;131(2):147-152. doi:10.1016/j.jbiosc.2020.09.016
Zhu C, El Qaidi S, McDonald P, Roy A, Hardwidge PR. Ym155 inhibits NleB and SseK arginine glycosyltransferase activity. Pathogens. 2021;10(2):253. doi:10.3390/pathogens10020253

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Projektbeschreibung:

Nur für Forschungs- und Industriezwecke. Nicht für den persönlichen Gebrauch bestimmt. Bestimmte Produkte in Lebensmittelqualität eignen sich für die Formulierungsentwicklung in Lebensmitteln und verwandten Anwendungen.

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