Express-Enzyme in Pilzen

Creative Enzymes war schon immer ein Innovator in der Enzymexpression und -produktion. Zum Beispiel ist die Wahl der Produktionswirte für ein Enzym bei Creative Enzymes nicht mehr durch die Verfügbarkeit von Systemen eingeschränkt. Da die Hefesysteme nicht immer das bevorzugte System sind, hat Creative Enzymes Pilzwirte entwickelt, die sich als wertvolle alternative eukaryotische Wirte für die Expression fremder Gene erwiesen haben.

Obwohl Pilze erst kürzlich regelmäßig verwendet werden und nicht so gründlich wie Bakterien als Expressionswirte untersucht wurden, wurden für mehrere Arten effiziente Genübertragungssysteme entwickelt. Mehrere Vorteile heben das Pilz-Expressionssystem hervor, wenn man wirtschaftliche Überlegungen und die Enzymmerkmale mit anderen Systemen vergleicht. Viele attraktive Merkmale wurden bereits für Pilze als Produktionswirte gefunden:

• Transkriptionale Kontrolle

Sowohl konstitutive als auch induzierbare Promotoren können bei der Entwicklung von Expressionssystemen für rekombinante enzymatische Expression verwendet werden, was die Flexibilität der Expressionsprozesse verbessert. In Pilzen sind die Promotor- und Terminatorregionen von DNA-Sequenzen flankiert und steuern die Transkription. Die Promotorregionen vieler Pilzgene wurden sequenziert und die Funktionen einiger wurden analysiert.

• Post-translationale Prozesse

Bioaktive Proteine benötigen die richtige post-translationale Modifikation für ihre Funktionen und Aktivitäten, insbesondere für Enzyme aus Säugetier- und hoch-eukaryotischen Quellen. Im Vergleich zur Hyperglykosylierung mit mannose-reichen Gruppen in S. cerevisiae hat das Pilz-Expressionssystem den Mechanismus, um eine ordnungsgemäße Glykosylierung und korrektes Protein-Falten zu erreichen.

• Sezernierung

Es gibt mehrere Techniken zur Reinigung von intrazellulären Proteinen, die in E. coli und S. cerevisiae exprimiert werden, aber sie sind zeitaufwendig und führen oft zu schlechten Ausbeuten. Wenn das Produktenzym außerhalb des Wirts sezerniert wird, kann der Reinigungsprozess erheblich vereinfacht werden, was eine sehr charakteristische Eigenschaft von Pilzen ist. Signalssequenzen von filamentösen Pilzen sind denjenigen höherer Eukaryoten ähnlich, was eine effiziente Sekretion ermöglicht.

• Hohe Ausbeute

Obwohl die Ausbeute einiger heterologer Proteine relativ niedrig ist, wenn sie in Pilzen exprimiert werden, gibt es viele erfolgreiche Fälle, in denen eine hohe Produktionsrate im Pilzsystem erreicht wird. Mehrere Faktoren könnten zu hohen Ausbeuten beitragen. Erstens können im Pilz-Expressionssystem mehrere Kopien des fremden Gens in das Chromosom eingefügt werden: Bis zu 100 Kopien wurden nachgewiesen. Zweitens können die Fermentationskulturen auf eine hohe Zellkonzentration gezüchtet werden. Die Ausbeute des Zielproteins übersteigt oft das Niveau von 1 g/L nach der anfänglichen Optimierung der Fermentationsbedingungen.

Um die speziellen Forschungsbedürfnisse zu unterstützen, bietet Creative Enzymes umfassende Enzymexpressionsdienste im Pilzsystem an. Die starke technische Unterstützung unterscheidet Creative Enzymes von den Wettbewerbern, zusätzlich zu anderen Vorteilen wie einem unabhängigen Forschungszentrum und reichhaltigen Ressourcen. Verschiedene Arten von Pilzwirten sind bei Creative Enzymes verfügbar, um unterschiedlichen Anforderungen gerecht zu werden, einschließlich Aspergillus nidulans, Trichoderma reesei und Neurospora crassa. Darüber hinaus wurde für jeden Wirts-Pilz ein Satz entsprechender Vektoren und Promotoren entwickelt, und die professionelle molekulare Konstruktion wird schnell durchgeführt. Drittens wird jede individuelle Expressionsanfrage einer strengen Qualitätskontrolle unterzogen, und die Enzymqualität wird durch präzise Analysen garantiert. Schließlich kann der Skalierungsprozess von Creative Enzymes basierend auf umfangreicher Erfahrung leicht durchgeführt werden. Insgesamt ist Creative Enzymes die beste Wahl für Enzymexpression und -produktion. Bevor Sie die Serviceanfrage einreichen, empfehlen wir Ihnen dringend, sich zuerst mit dem Kundenservice in Verbindung zu setzen, um einen schnellen und professionellen Vorschlag zu erhalten.