Plattenbasiertes Screening von Enzymen

Über plattengestütztes Enzym-Screening

Das plattengestützte Enzym-Screening ist eine häufig eingesetzte Methode zur Identifizierung und Optimierung von Enzymmolekülen mit definierten enzymatischen Aktivitäten. Der Bedarf an dieser Screening-Methodik ergibt sich aus der Suche nach neuen enzymkatalysierten Reaktionen, der Leistungssteigerung bestehender Enzyme sowie der Entwicklung effizienter, spezifischer und für die industrielle Produktion geeigneter enzymkatalysierter Prozesse.

Dienstleistungen für plattengestütztes Enzym-Screening

Creative Enzymes ist ein führender Enzymlieferant und bietet ein breites Spektrum spezialisierter Enzym-Screening-Dienstleistungen, die darauf ausgelegt sind, Enzyme schnell und effizient auf spezifische Eigenschaften zu prüfen und maßgeschneiderte Lösungen für vielfältige Anwendungen bereitzustellen.

Screening-Serviceprogramme basierend auf unterschiedlichen Medientypen:

Screening-Service auf Basis von Selektionsmedien

Durch das gezielte Ergänzen oder Reduzieren bestimmter Komponenten wird dem Zielstamm ein Wachstumsvorteil verschafft, während das Wachstum anderer Stämme gehemmt wird; über mehrere Screening- und Isolationsschritte wird der finale Zielstamm selektiert.

Screening-Service auf Basis von Nachweismedien

Wir stützen uns hierbei primär auf kolorimetrische und fluoreszenzbasierte Nachweisverfahren für Screenings auf Agarplatten; diese können ebenfalls in Mikrotiterplatten durchgeführt werden.

In der Regel wird dem Kulturmedium ein bestimmtes Reagenz oder eine Chemikalie zugesetzt, sodass nach der Kultivierung eine eindeutig identifizierbare Veränderung auftritt, z. B. eine Änderung der Transparenz des Mediums oder eine Farbänderung im Bereich um die Kolonie. Dadurch lassen sich unterschiedliche Mikroorganismentypen oder verschiedene physiologische Merkmale unterscheiden.

Wir bieten verschiedene plattengestützte Screening-Serviceprogramme an, um unterschiedliche Forschungs- und Anwendungsziele abzudecken:

Substrat-Screening-Service

Durch die Bereitstellung diverser Substrate auf Platten werden Enzyme mit hoher katalytischer Aktivität gegenüber spezifischen Substraten identifiziert. Dies unterstützt die Bestimmung der Substratspezifität des Enzyms und die Optimierung seiner katalytischen Leistungsfähigkeit.

Aktivitäts-Screening-Service

Enzyme mit hoher katalytischer Aktivität werden durch Messung ihrer Aktivität auf einer Platte unter Zusatz geeigneter Nachweisreagenzien identifiziert.

Mutagenese-Screening-Service

Durch den Aufbau von Bibliotheken von Enzymvarianten screenen wir Platten auf Varianten mit verbesserten oder neuen Funktionen. Dies trägt zur Optimierung von Enzymeigenschaften wie katalytischer Aktivität, thermischer Stabilität und Substratspezifität bei.

Warum wir?

1. Unsere Dienstleistungen sind vielseitig und flexibel. Kundinnen und Kunden können je nach Bedarf die geeignete Enzym-Screening-Plattform wählen, einschließlich gängiger Agarplatten, Mikrotiterplatten und Zymographie-Platten.
2. Während des Enzym-Screening-Prozesses können Kundinnen und Kunden die Probenhandhabung und Reaktionsbedingungen entsprechend den spezifischen Anforderungen des Versuchsdesigns optimieren, um optimale Ergebnisse zu erzielen.
3. Creative Enzymes stellt Kundinnen und Kunden zudem eine Reihe von Assays und analytischen Methoden zur Verfügung, darunter Enzymaktivitätsassays, Inhibitor-Screening, Affinitätsassays usw., um die Enzymleistung und -eigenschaften umfassend zu bewerten.

Abb. 1 Übersicht über Screening-Technologien. (A) Experimentelle Schritte vom Erhalt der Genbibliothek als PCR-Produkt bis zum eigentlichen Screening. Beachten Sie, dass Klonierungs- und Transformationseffizienz häufig die Bibliotheksgröße limitieren, (B) Erläuterung der Symbole, (C) Selektion über Zellwachstum/-überleben und Agarplatten-Screening, (D) Mikrotiterplatten-Screening, (E) Zelle als Mikroreaktor, (F) Zelloberflächen-Display, (G) Zelle-in-Tröpfchen und (H) in vitro-Kompartimentierung. Die Methoden werden im Haupttext erläutert. Leemhuis H. et al., 2010)