Ausdrucksbewertung und -optimierung

Der Weg zu einer effizienten und kostengünstigen Genexpression und Enzymproduktion ist oft fallabhängig. Ein kluger Schritt vor der Produktion im Versuchmaßstab ist es, mögliche Expressionssysteme schnell zu testen und das am besten geeignete System zu identifizieren. In einigen Fällen kann die Bewertung anderer Expressions- und Produktionssysteme, selbst nachdem die Produktion im Vollmaßstab eingerichtet ist, helfen, Kosten zu sparen und die Produktqualität zu verbessern. Um diese Zwecke zu erfüllen, bietet Creative Enzymes den maßgeschneiderten Service zur Evaluierung und Optimierung der Expression an.

Der Service testet schnell die am häufigsten verwendeten Expressionssysteme, einschließlich Wirtszellen, Vektoren und Promotoren, und identifiziert das effizienteste System. Auch eine Produktionsoptimierung ist verfügbar, die sich stärker auf die Fermentationsbedingungen und -prozesse konzentriert, um den Ertrag und die Reinheit des gewünschten Enzyms weiter zu verbessern. Der Evaluierungs- und Optimierungsservice bringt unseren Kunden in mehreren Aspekten Vorteile: 1) Er spart Ihre wertvolle Zeit mit unserer einzigartigen Hochdurchsatz-Screening-Plattform, die in der Lage ist, das am besten geeignete Expressionssystem innerhalb einer Woche zu identifizieren; 2) Der Produktionsausstoß wird bewertet und quantitativ zwischen den Systemen verglichen, wodurch Unsicherheiten wie Kodonbias, Vektorkonstruktion und Toxizität der Wirtszellen beseitigt werden; 3) Das detaillierte Protokoll wird bereitgestellt und deckt die Schlüsselfaktoren für eine erfolgreiche Expression ab; und 4) Die Servicekosten sind niedriger, und die Gesamtzeit wird weiter reduziert, wenn sie mit anderen Dienstleistungen wie Genklonierung und Enzymproduktion integriert werden.

Unsere Technologie bewertet die Auswirkungen der meisten Parameter in der Genexpression und Enzymproduktion auf mehreren Ebenen, um die Genauigkeit und Konsistenz der Schlussfolgerung sicherzustellen. Der Genexpressionsgrad in Wirtszellen kann durch die Anzahl der mRNA-Replikate mithilfe von Sequenzierungs- und Mikroarray-Techniken gemessen werden. Gleichzeitig wird das Zielenzym ebenfalls identifiziert und quantifiziert. Diese Ergebnisse werden verwendet, um zu prüfen, ob das Enzym exprimiert wird und in welchem Maße. Darüber hinaus könnte jede Diskrepanz zwischen den Datensätzen mögliche Probleme in jedem Schritt der Translation, Sekretion und Faltung usw. weiter lokalisieren. Anschließend wird der Ertrag der Enzymproduktion unter verschiedenen Fermentationsbedingungen sowie die Enzymeigenschaften bewertet. Typische Faktoren, die zur Produktionseffizienz beitragen, sind Molekulargewicht, Disulfidbrücken, posttranslationalen Modifikationen, Homogenität, Enzymaktivitäten wie Proteolyse, Promotordesign, Stammselektion, pH-Wert, Temperatur, Induktionsmechanismen, Inokulation sowie Rückgewinnung und Reinigung. All diese wichtigen Parameter können in eine Charge von Bedingungsscreenings integriert werden, und die optimale Bedingung wird basierend auf den getesteten Bedingungen und Vorhersagen aus der Testmatrix empfohlen. Darüber hinaus werden auch etwaige Grenzen der Produktionskosten berücksichtigt, wenn dies vom Kunden gewünscht wird. Infolgedessen haben die meisten Kunden nach der Nutzung des Optimierungsservices eine Steigerung des Produktionsausstoßes von mindestens dem Zehnfachen festgestellt.

Aufbauend auf der fortschrittlichen Forschung und umfangreichen Erfahrungen in der Genexpression und Enzymproduktion möchte Creative Enzymes Forschern helfen, die Herausforderungen bei der Gewinnung der gewünschten Enzyme zu überwinden und das Risiko unbekannter Ergebnisse aus teuren und langfristigen Untersuchungen zu reduzieren. Als einer der ersten und am besten bewerteten Dienstleister in diesem Bereich liefert Creative Enzymes zuverlässige und wertvolle Ergebnisse des Evaluierungs- und Optimierungsservices:

• Detaillierte Expressionsergebnisse
• Löslichkeit
• SDS & Western Blot
• Optimierte Vektorkonstruktion
• Die besten Expressions- und Fermentationsbedingungen mit detaillierten Protokollen
• Die optimalen Expressions- und Fermentationsbedingungen basierend auf Vorhersagen
• Vorschlag der besten Zelllinie/Stamm
• Vorhersage von Ertrag und Kosten