RITA (NSC 652287)

CEI-0884

RITA (NSC 652287) induziert sowohl DNA-Protein- als auch DNA-DNA-Quervernetzungen ohne nachweisbare DNA-Einzelstrangbrüche und hemmt außerdem die MDM2-p53-Interaktion, indem es p53 anvisiert.

SOS BISMETHANOL

213261-59-7

292,37

2 Jahre -20 Grad Celsius Pulver; 2 Wochen 4 Grad Celsius in DMSO; 6 Monate -80 Grad Celsius in DMSO.

SOS BISMETHANOL

DNA-Quervernetzungen (A498-Zellen), DNA-Quervernetzungen (TK-10-Zellen)

2 nM ; 20 nM

C14H12O3S2

2-Thiophenmethanol, 5,5'-(2,5-furandiyl)bis-

DMSO 58 mg/mL; Wasser <1 mg/mL; Ethanol 8 mg/mL

RITA zeigt ein hoch selektives Muster differenzieller zytotoxischer Aktivität in den Tumorzelllinien, aufgrund der zellulären Anreicherung in der zytosolischen (S100) Fraktion. RITA hemmt auch das Wachstum anderer Nierenzelllinien, einschließlich ACHN und UO-31, mit einer IC50 von 13 μM bzw. 37 μM. RITA (10 nM) verursacht einen Zellzyklus-Stillstand mit Anreicherung von Zellen in der G2-M-Phase und induziert DNA-Fragmente und Apoptose bei 100 nM, beides mit evaluierten p53-Proteinspiegeln. RITA (30 nM) induziert auch sowohl DNA-Protein- als auch DNA-DNA-Quervernetzungen in A498-Zellen. In der Zwischenzeit hat RITA keine Auswirkungen auf die top1-vermittelte Entspannung von supercoiled SV40-DNA. RITA unterdrückt das Wachstum von HCT116-Zellen signifikant (97%), hemmt jedoch nur leicht das Wachstum von HCT116 TP53-/- Zellen (13%). RITA ist bei der Wachstumsunterdrückung in wildtypischen p53-exprimierenden Tumorzelllinien viel effizienter als in Zelllinien, die p53 fehlen, und in solchen, die mutiertes p53 exprimieren. RITA bindet an das volle p53, jedoch nicht an das Glutathion-S-Transferase (GST)-Protein oder HDM-2 (ein wichtiger Regulator von p53 wird stark durch die Rettung der embryonalen Letalität von MDM2 unterstützt). RITA blockiert die p53−HDM-2-Interaktion und die Ubiquitinierung von p53. RITA verringert erheblich die Menge an HDM-2, die mit p53 ko-precipitiert wird, obwohl beide Proteine hochreguliert sind. RITA verhindert Interaktionen zwischen dem gereinigten GST-p53 und den 6XHis-getaggten His-HDM-2-Proteinen. RITA zeigt, dass es Apoptose induziert, indem es die Phosphorylierung von p53Ser46 fördert. RITA induziert die Aktivierung von p53 in Verbindung mit der Hochregulierung von phosphoryliertem ASK-1, MKK-4 und c-Jun. RITA induziert die Aktivierung der JNK-Signalgebung. Aber im Gegensatz dazu zeigen andere Ergebnisse durch Kernspinresonanz (NMR), dass RITA nicht die Bildung des Komplexes zwischen p53 (Reste 1-312) und der N-terminalen p53-bindenden Domäne von MDM2 (Reste 1-118) blockiert, was sehr wahrscheinlich darauf hindeutet, dass die Bindung von RITA die native Konformation von p53 erfordert.

RITA wird nach intraperitonealer Verabreichung gut von Mäusen vertragen, ohne dass bei Dosen von bis zu 10 mg/kg über einen Zeitraum von 1 Monat ein beobachtbarer Gewichtsverlust auftritt. Nach fünf Injektionen von 0,1 mg/kg RITA wird das Wachstum der HCT116-Tumoren um 40% unterdrückt, ohne offensichtliche Auswirkungen auf die HCT116 TP53-/- Tumoren. Bei einer Dosis von 1 oder 10 mg/kg zeigt RITA eine starke antitumorale Aktivität. Fünf Injektionen von 1 mg/kg RITA führen zu einer mehr als zweifachen Verringerung der Wachstumsrate von p53-positiven Xenografts, ohne dass es Auswirkungen auf p53-null Xenografts gibt. HCT116-Tumoren sind bei Mäusen, die mit 10 mg/kg RITA behandelt wurden, 90% kleiner als bei unbehandelten Kontrollmäusen. RITA hemmt das Tumorwachstum auf eine wildtyp-p53−abhängige Weise.