T4-Endonuklease V (T4-PDG)

Anfrage

Katalog-Nr.

TEVG-0001

Beschreibung

Die T4-Endonuklease V ist ein bifunktionales DNA-Reparaturenzyme mit DNA-N-Glykosylase- und AP-Lyase-Aktivität. Sie erkennt UV-induzierte cis-syn-Cyclobutan-Pyrimidindimere in der DNA.

Abkürz.

T4 PDG

Alias

T4-Pyrimidin-DNA-Glykosylase; T4-Endonuklease V

Quelle

T4-Phage

Spezies

T4-Phage

Anwendungen

DNA-Schädigungsstudien; Einzelzell-Gelelektrophorese (Comet-Assay).

Verpackung

500 E
1.000 E

Produktübersicht

Das Enzym spaltet die glykosidische Bindung an der 5′-Seite eines Pyrimidindimers und erzeugt dadurch eine AP-Stelle; anschließend spaltet es das Phosphodiester-Rückgrat an dieser Stelle, wodurch eine Ein-Nukleotid-Lücke entsteht.

Aktivität

1 U/µL

Kontaminanten

Unspezifische DNase: Nicht nachgewiesen.
Genomische Wirts-DNA von E. coli: <0,05 Kopien/U.

Molekulargewicht

16,1 kDa

Reinheit

≥95 % gemäß SDS-PAGE

Konzentration

1 U/µL

Spezifität

Erkennt cis-syn-Cyclobutan-Pyrimidindimere, die durch UV-Bestrahlung erzeugt werden.

Einheitsdefinition

Eine Einheit ist die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 0,5 µg UV-bestrahlte, superhelikale pUC19-DNA in einem 20‑µL‑Ansatz innerhalb von 30 Minuten bei 37 °C zu >95 % in genicktes Plasmid umzuwandeln. Die Nicking-Aktivität wird mittels Agarosegel-Elektrophorese beurteilt; das bestrahlte Plasmid enthält im Mittel 3–5 Pyrimidindimere.

Lagerung

Bei -25 °C bis -15 °C lagern. Haltbarkeit: 1 Jahr.

Funktion

Entfernt UV-induzierte Pyrimidindimere durch DNA‑N‑Glykosylase‑Aktivität und spaltet die daraus resultierende AP‑Stelle mittels AP‑Lyase‑Aktivität.

Synonyme

T4-PDG; T4-Endonuklease V; Pyrimidin-Dimer-Glykosylase; T4-Pyrimidin-DNA-Glykosylase

Substrate

DNA, die UV-induzierte cis-syn-Cyclobutan-Pyrimidindimere enthält.

Reaktion

Pyrimidin-Dimer-DNA → AP-Stellen-DNA + freigesetztes Pyrimidin-Dimer; AP-Stellen-DNA → Ein-Nukleotid-DNA-Lücke mit gespaltenem Phosphodiester-Rückgrat.

Vorteile

Bifunctional DNA N-glycosylase/AP lyase activity; protein purity ≥95%; no detectable nonspecific DNase; low residual host genomic DNA.

Komponenten

500 U package:
T4 Endonuclease V (T4 PDG), 1 U/µL: 500 µL
10× T4 Endonuclease V Reaction Buffer: 1 mL

1,000 U package:
T4 Endonuclease V (T4 PDG), 1 U/µL: 1 mL
10× T4 Endonuclease V Reaction Buffer: 2 mL

Verwendung

Für die enzymatische Analyse UV-induzierter DNA-Schäden sowie für Workflows im Rahmen des Comet-Assays.

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Projektbeschreibung:

Nur für Forschungs- und Industriezwecke. Nicht für den persönlichen Gebrauch bestimmt. Bestimmte Produkte in Lebensmittelqualität eignen sich für die Formulierungsentwicklung in Lebensmitteln und verwandten Anwendungen.

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