Mit dem vorausschauenden Einblick in die Entwicklung der Enzymindustrie war Creative Enzymes stets eines der ersten Unternehmen, das die neuesten Technologien beherrscht. Die starke technische Präsenz in der Enzymaktivitätstestung unterscheidet uns von anderen Dienstleistern. Unser Team ist um eine zentrale moderne Forschungseinrichtung mit einem Wissenschaftlerteam mit umfassender Expertise aufgebaut. Wir haben zahlreiche zuverlässige Ansätze entwickelt, um all Ihren Testanforderungen gerecht zu werden. Die Mikroskalenthermophorese (MST) ist eine neu entwickelte Technik zur Quantifizierung biomolekularer Wechselwirkungen. Durch die Verwendung verschiedener Modellsysteme umfasst die Anwendung von MST die Bestimmung von Bindungsstöchiometrien und Bindungsmodi, die Analyse von Proteinentfaltung und Thermodynamik. Creative Enzymes nutzt hauptsächlich die Anwendung für Enzymkinetik und bietet hervorragende Aktivitätsmessdienste mit MST an.

Das Phänomen der Thermophorese, bei dem Moleküle durch ein Temperaturgradienten geleitet bewegt werden, wurde erstmals 1856 von Carl Ludwig beschrieben. Nach der Entwicklung wird die Mikroskalenthermophorese (MST) schnell zu einer revolutionären Methode zur Überwachung von Protein- und kleinen Molekülwechselwirkungen. Sie ermöglicht die Quantifizierung von Biomolekülwechselwirkungen durch die thermophoretische Detektion selbst kleinster Veränderungen in der Konformation, Ladung und Größe eines Moleküls, die durch ein Bindungsereignis induziert werden. Daher kann MST Ereignisse wie die Bindung kleiner Moleküle an Proteine, Substrate an Enzyme oder Liganden an Liposomen erkennen. Darüber hinaus bietet MST auch Vorteile gegenüber den gängigsten nicht-fluoreszierenden Methoden wie der isothermen Titrationskalorimetrie (ITC) oder der Oberflächenplasmonenresonanz (SPR), indem sie die Oberflächenimmobilisierung und den hohen Probenverbrauch vermeidet. Darüber hinaus kann MST in praktisch jedem Puffer durchgeführt werden, sogar in Plasma und Zelllysaten. Jüngste technische Fortschritte ermöglichen es nun auch, die intrinsische Fluoreszenz von tryptophanhaltigen Proteinen zu nutzen, um ihre Thermophorese zu verfolgen, wodurch ein neuartiger, völlig label-freier und immobilisierungsfreier Ansatz zur Untersuchung molekularer Wechselwirkungen bereitgestellt wird.

In der biomedizinischen Forschung ist MST zu einer wichtigen Methode zur Bestimmung der Enzymaktivität geworden. Neben der hohen Genauigkeit der MST-Tests umfassen weitere Merkmale und Vorteile:

• Kleine Mengen an Proben

Im Gegensatz zu anderen Enzymtestmethoden können in MST pM/nM-Konzentrationen verwendet werden, und es wird nur ein kleines Volumen (<4ul) der Reaktionslösung benötigt.

• Zeit- und kosteneffektiv

Die MST-Messung kann in kurzen Zeitspannen durchgeführt werden. Da die getesteten Enzyme in verschiedenen Lösungen existieren können, ist es nicht notwendig, die Zielenzyme vor dem Test zu reinigen, und die Testtemperatur kann künstlich festgelegt werden.

Es gibt bereits einige Beispiele, die zeigen, dass MST zur Analyse der Enzymkinetik verwendet werden kann.

Abbildung: Kinetik des enzymatischen Abbaus von DNA durch DNase I unter Verwendung verschiedener MST-basierter Ansätze. (A) Schematische Darstellung des Mg²⁺-abhängigen Abbaus von DNA durch DNase I. (B) Echtzeitmessung des DNA-Abbaus.

Es ist klar, dass die Genauigkeit der MST-Ausrüstung der entscheidende Punkt im Experiment ist, dessen Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit die Zuverlässigkeit der Ergebnisse bestimmen. Creative Enzymes führt Enzymtests mit den fortschrittlichsten MST-Geräten durch, um hohe Genauigkeit zu gewährleisten. Kombiniert mit der umfassenden Expertise in MST und den professionellen Abläufen bringt der Service große Zufriedenheit für die Kunden.

Creative Enzymes engagiert sich für die Verbesserung und Optimierung der Quantifizierung der Enzymaktivität unter Verwendung fortschrittlicher Techniken und Instrumente. Wir sind sicherlich die erste Wahl für die kosteneffektivsten MST-Tests. Wir freuen uns, Ihnen bei Fragen zu dieser Art von Test zur Verfügung zu stehen.

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