NRBP repräsentiert eine neue Familie evolutionär konservierter Proteine mit Homologie in C. elegans, schwarzen Nematoden, Mäusen und Menschen. Die Überexpression von NRBP in COS-1-Zellen aktiviert keine möglichen nachgeschalteten Ziele von Rac3, einschließlich des JNK-Signalwegs, des p38-Signalwegs oder der Umstrukturierung des Aktin-Zytoskeletts. Darüber hinaus konnte NRBP nicht mit aktinbasierten Stressfasern, Mikroprojektionen oder subkortikalem Aktin kolokalisiert werden. Die Überexpression von NRBP führte jedoch dazu, dass eine große Anzahl von Golgi-bezogenen Markern p58 an peripherere Orte in der Zelle umverteilt wurde, was mit einer Störung des endoplasmatischen Retikulum-Transports zum Golgi übereinstimmt. Immunzytochemische Untersuchungen zeigten, dass NRBP und aktiviertes Rac3 im Endometrium und in der Peripherie der Zellen in Lamellipodien kolokalisiert sind. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass NRBP eine Rolle im subzellulären Transport spielt und durch Interaktion mit kleinen GTPasen der Rho-Familie gezielt an spezifische subzelluläre Orte adressiert werden kann.

Einleitung

Signaltransduktionswege in Zellen werden durch eine Vielzahl von Proteinen reguliert. Eine Art von Adapterproteinen spielt dabei eine entscheidende Rolle. Sie können durch spezifische Domänen und Aminosäuresequenzen/-motive gezielt die Bindung zwischen Signalproteinmolekülen oder zwischen Signalproteinen und Lipidmolekülen regulieren und so eine Verbindung zwischen auf- und nachgeschalteten Signaltransduktionswegen herstellen. Sie spielen eine wichtige Rolle bei der Verbindung und Regulation. Als neu entdecktes Protein wurde NRBP (nuclear receptor binding protein) in den meisten normalen menschlichen Geweben gefunden, mit der niedrigsten Expression im Thymus und der höchsten Expression in Hoden und Plazenta. NRBP wurde auch in 15 menschlichen Tumorzelllinien, einschließlich 293-Zellen und HeLa-Zellen, nachgewiesen. Das NRBP-Protein besteht aus 535 Aminosäuren. Es ist evolutionär konserviert und enthält mehrere funktionelle Domänen. Die N-terminale Sequenz, die reich an Glutaminsäure und Serin ist, könnte die Bindung zwischen NRBP und anderen SH2-Domänen-haltigen Proteinen vermitteln. Gleichzeitig wird vermutet, dass NRBP auch ein nukleärer Rezeptor-Bindeprotein mit zwei nukleären Rezeptor-Bindedomänen, einem nukleären Lokalisierungssignal (NLS: nuclear localization signal) und einem nukleären Exportsignal (NES) ist. Derzeit gibt es nur wenige Studien zur Funktion von NRBP. Es wurde berichtet, dass es an Proteine wie Rac3, Mlf1, NS3, Jab1 binden und damit verbundene Funktionen regulieren kann. Da kein kommerzielles Anti-NRBP-Antikörper verfügbar ist, wurde das in prokaryotischer Expression exprimierte NRBP-Fusionsprotein mittels Gentechnik hergestellt und der spezifische polyklonale Antikörper gegen humanes NRBP präpariert und gereinigt. Um die Funktion des Adapterproteins NRBP weiter zu untersuchen, wurde damit die Grundlage gelegt.

NRBP und Krankheit

Viele menschliche Krankheiten, wie Krebs und Autoimmunerkrankungen, stehen in engem Zusammenhang mit Signaltransduktionswegen. Das intrazelluläre Signaltransduktionssystem kann alle Prozesse der Lebensaktivitäten regulieren, einschließlich Zellproliferation, neuronaler Aktivität, Entwicklung und Differenzierung sowie Stoffwechsel und Muskelkontraktion. Linker-Proteine sind an mehreren Signalwegen beteiligt und sind im Signaltransduktionsprozess unersetzliche wichtige Proteine. Ihre Erforschung wird es ermöglichen, immer komplexere zelluläre Signalwege zu verstehen und notwendige Informationen für die Entwicklung von Arzneimittelzielen im Zusammenhang mit Signalwegen bereitzustellen. Das menschliche NRBP-Gen befindet sich auf dem Chromosom im Bereich 2p23, und die Translokation dieses Bandes oder benachbarter Banden steht in engem Zusammenhang mit Tumoren und hämatopoetischen Störungen. Im Jahr 2002 entdeckten De Langhe und andere Wissenschaftler, dass NRBP an Rac3 der Rho-Familie bindet und überexprimiertes NRBP die Übertragung des Golgi-Markierungsproteins p58 vom endoplasmatischen Retikulum zum Golgi blockieren kann. Die Homologie der Aminosäuresequenz von murinem MADM und humanem NRBP beträgt bis zu 98 %. Es wurde festgestellt, dass es mit dem Myeloid-Leukämie-Faktor Mlf1 interagieren kann, Serin-Kinase rekrutiert, um Mlf1 zu phosphorylieren, und die Bindung von Mlf1 an das wichtige Protein 14-3-3ζ einleitet. In der M1-Phase überexprimiertes MADM in Monozyten kann die durch Zytokine induzierte Zelldifferenzierung durch Regulierung der zellulären Verteilung von Mlf1 steuern. Gleichzeitig haben unsere früheren Untersuchungen gezeigt, dass NRBP möglicherweise eine wichtige negative regulatorische Rolle stromabwärts des TCR-Signalwegs über den Transkriptionsaktivator Jab1 spielt. Die Überexpression von NRBP kann die Aktivität der durch TCR oder PMA induzierten Transkriptionsfaktoren NFAT und AP-1 in Jurkat-T-Zellen signifikant hemmen.

Referenz

1. Hooper JD; et al. Klonierung der cDNA und Lokalisierung des Gens, das für das menschliche NRBP kodiert, ein ubiquitär exprimiertes, multidomain-putatives Adapterprotein. Genomics. 2000, 66 (1): 113-8.