TWS119

CEI-0909

TWS119 ist ein GSK-3β-Inhibitor mit einer IC50 von 30 nM; in der Lage, neuronale Differenzierung zu induzieren und könnte in der Stammzellbiologie nützlich sein.

601514-19-6

318,33

2 Jahre -20 Grad Celsius Pulver; 2 Wochen 4 Grad Celsius in DMSO; 6 Monate -80 Grad Celsius in DMSO.

GSK-3β

30 nM

C18H14N4O2

3-(6-(3-Aminophenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yloxy)phenol

DMSO 64 mg/mL; Wasser <1 mg/mL; Ethanol <1 mg/mL

Die Behandlung einer Monolayer von P19-Zellen mit 1 μM TWS119 führt dazu, dass 30–40% der Zellen spezifisch in neuronale Linien differenzieren, basierend auf der Zählung von TuJ1-positiven Zellen mit korrekter neuronaler Morphologie (bis zu 60% neuronale Differenzierung trat durch das Standard-EB-Bildungsprotokoll mit gleichzeitiger TWS119-Behandlung auf). TWS119 bindet eng an GSK-3β (K D = 126 nM), was durch Oberflächenplasmonresonanz (SPR) quantifiziert wird, und zeigt zudem eine IC50 von 30 nM. TWS119 induziert nachweislich stark die neuronale Differenzierung sowohl in Maus-embryonalen Karzinom- als auch in ES-Zellen. Die Behandlung mit TWS119 bei hepatischen Sternzellen (HSC) führt zu einer reduzierten Phosphorylierung von β-Catenin, induziert die nukleare Translokation von β-Catenin, erhöht die Produktion von Glutaminsynthetase, behindert die Synthese von glattem Muskelaktin und Wnt5a, fördert jedoch die Expression von glialem fibrillärem saurem Protein, Wnt10b und dem paired-like homeodomain Transkriptionsfaktor 2c. TWS119 löst eine schnelle Ansammlung von β-Catenin aus (durchschnittlich 6,8-fache Erhöhung durch Densitometrie), verstärkt die nukleare Proteininteraktion mit Oligonukleotiden, die die DNA-Sequenzen enthalten, an die Tcf und Lef binden, und reguliert die Expression von Tcf7, Lef1 und anderen Wnt-Zielgenen, einschließlich Jun, Ezd7 (kodiert Frizzled-7), Nlk (kodiert Nemo-like Kinase) stark nach oben. TWS119 induziert eine dosisabhängige Abnahme der T-Zell-spezifischen Tötung und der IFN-g-Freisetzung, die mit der Erhaltung der Fähigkeit zur Produktion von IL-2 verbunden ist. Eine aktuelle Studie zeigt, dass die Wnt-Signalgebung in polyklonal aktivierten menschlichen T-Zellen durch die Behandlung mit TWS119 induziert wird. Diese T-Zellen bewahren einen nativen CD45RA(+)CD62L(+) Phänotyp im Vergleich zu kontrollaktivierten T-Zellen, die zu einem CD45RO(+)CD62L(-) Effektor-Phänotyp fortschreiten, und dies geschieht in einer dosisabhängigen Weise von TWS119. Die durch TWS119 induzierte Wnt-Signalgebung reduziert die T-Zell-Expansion als Ergebnis eines Blocks in der Zellteilung und beeinträchtigt den Erwerb der T-Zell-Effektor-Funktion, gemessen an der Degranulation und der IFN-γ-Produktion als Reaktion auf die T-Zell-Aktivierung. Der Block in der T-Zell-Teilung kann auf die reduzierte IL-2Rα-Expression in TWS119-behandelten T-Zellen zurückgeführt werden, die ihre Fähigkeit verringert, autokrines IL-2 zur Expansion zu nutzen.

Eine Zellpopulation, die niedrige Mengen von CD44 und hohe Mengen von CD62L auf der Zelloberfläche exprimierte, als 30 mg/kg von TWS119 verabreicht wurden.