Enzymaktivitätsmessung für Mikrokokken-Nuklease

Als Experte für Enzymassays teilt Creative Enzymes unsere fortschrittlichen Techniken mit Ihnen. Wir bieten die umfassendste und die neueste optimierte Version der Aktivitätstests für Hydrolasen an. Die Ergebnisse für mikrokuppelige Nuklease sind mit hoher Genauigkeit und Reproduzierbarkeit garantiert.

Mikrokuppelige Nuklease (Nuklease T, EC 3.1.31.1) kann sowohl auf doppelsträngige als auch auf einzelsträngige Substrate wirken. Genauer gesagt ermöglicht ihre endonukleolytische Aktivität, dass sie die doppelsträngige DNA oder RNA und einzelsträngige Nukleinsäuren zu Nukleosid-3'-Phosphaten und 3'-Phosphooligonukleotiden spaltet. Die Spaltungsrate ist an der 5'-Seite von A oder T 30-mal höher als an G oder C. Durch die Hydrolyse des Enzyms werden letztendlich alle Sequenzen gespalten. Die Enzymaktivität hängt streng von Ca²⁺ ab, und ihre Aktivität wird leicht durch EGTA inaktiviert.

Unter verschiedenen Quellen wird Staphylokokken mikrokuppelige Nuklease als Modellprotein verwendet, um die Proteinfaltung und enzymatische Katalyse zu studieren. Die Struktur der Staphylokokken Nuklease T wurde vollständig identifiziert. Sie enthält nur 149 Reste, trägt keine Disulfidbrücken oder freien Sulfhydrylgruppen und kann reversibel entfaltet und wieder gefaltet werden. Viele Anwendungen wurden für dieses Enzym entwickelt. Zum Beispiel ist das Enzym ein nützliches Werkzeug zur Kartierung der Chromatinstruktur in Eukaryoten und zur Bestimmung der Positionen von Nukleosomen innerhalb eines DNA-Bereichs, um dynamische Veränderungen zu identifizieren, die während der Genregulation induziert werden. In der Molekularbiologie kann das gereinigte Enzym als exogenes Reagenz verwendet werden, um zelluläre Extrakte zu klären und die Proteinreinigung zu erleichtern. In der klinischen Behandlung ist dieses Enzym ein attraktives und potenzielles Ziel für die Entwicklung von Antimalariamitteln. Aufgrund der Bedeutung in Forschung und Therapie wurden eine große Anzahl von Varianten konstruiert, um die biochemischen und biophysikalischen Daten zu erweitern. Um solche Bemühungen zu erleichtern, bietet Creative Enzymes hochwertige Assay-Dienste für mikrokuppelige Nuklease an.

Abbildung: Die Kristallstruktur des ternären Komplexes aus Staphylokokken mikrokuppelige Nuklease, Ca²⁺ und dem Inhibitor Deoxythymidin-3',5'-bisphosphat (pdTp).
Referenz: Loll, P.J. et al. Proteins 1989 5: 183-201.

Creative Enzymes ist seit mehreren Jahren in der Enzymindustrie tätig. Die professionelle Einstellung, der sorgfältige Service und die engagierten Ressourcen unterscheiden Creative Enzymes von unseren Mitbewerbern. Um perfekte Dienstleistungen für die Messung der Enzymaktivität zu bieten, werden wir niemals aufhören, zu lernen und uns weiterzuentwickeln.