Enzymaktivitätsmessung für Phospholipase D

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen, das hochwertige bioanalytische Dienstleistungen und maßgeschneiderte Auftragsforschung in der Analyse der Enzymaktivität anbietet, um die Bedürfnisse unserer akademischen und industriellen Kunden zu erfüllen. Unsere Leidenschaft für hohe Qualität und einzigartige Dienstleistungen wird nur von unserem ausgezeichneten Ruf auf dem Markt übertroffen. Hiermit ist Creative Enzymes stolz darauf, den zuverlässigen enzymatischen Test für Phospholipase D anzubieten.

Phospholipase D (EC 3.1.4.4; PLD) ist ein ubiquitär vorkommendes Enzym, das die Hydrolyse der Phosphodiesterbindung von Phospholipiden (PLs) katalysiert, um Phosphatidsäure (PA) und eine Alkoholgruppe zu erzeugen. Neben der hydrolytischen Aktivität katalysiert PLD auch die Umwandlung der polaren Kopfgruppen von PLs durch einen Prozess, der als Transphosphatidylierung bezeichnet wird. Transphosphatidylierung ist besonders nützlich bei der Synthese von natürlich weniger häufigen PLs, wie Phosphatidylethanolamin (PE), Phosphatidylserin (PS) und Phosphatidylglycerol (PG) aus hochgradig häufigen wie PC oder Lecithin. Synthesierte PLs können als Emulgatoren, Bestandteile von Kosmetika, in medizinischen Formulierungen und für Liposomenpräparationen verwendet werden.

Abbildung 1: Reaktionen, die von PLD katalysiert werden. Hydrolyse (A) und Transphosphatidylierung (B). R₁ und R₂ bezeichnen Alkylketten von Fettsäureresten, während X1 und X2 die polaren Kopfgruppen darstellen.
Referenz: Damnjanović J, Iwasaki Y. Journal of Bioscience & Bioengineering, 2013, 116(3):271-280.

PLD wurde erstmals in Karotten und Kohlblättern in den 1940er Jahren entdeckt. Bis heute wurden PLDs in Viren, prokaryotischen sowie eukaryotischen (Säugetiere, Hefen, Pflanzen) Organismen gefunden. Die Mehrheit der PLDs gehört zur sogenannten PLD-Superfamilie, die PLDs, Cardiolipin-Synthasen (CLS), Phosphatidylserin-Synthasen (PSS), Pockenvirus-Hüllproteine, ein Yersinia murine Toxin (Ymt), Tyrosil-DNA-Phosphodiesterase und mehrere Nukleasen umfasst. Alle Mitglieder der PLD-Superfamilie enthalten ein oder zwei Kopien des konservierten HxKxxxxD-Motivs (wobei x jede Aminosäure ist). Dieses HKD-Motiv, insbesondere der His-Rest, ist von entscheidender Bedeutung für die Katalyse.

Funktionell können PLDs als Werkzeug im Screening von Genmaterial auf Dürretoleranz nützlich sein. Darüber hinaus können PLDs zur Herstellung von Octadecylphospho-L-Serin, einem Alkylphosphatester mit antitumoraler Aktivität, verwendet werden. Zudem dienen PLDs auch als Regulator verschiedener kritischer zellulärer Prozesse, wie dem Vesikeltransport, der Endozytose, der Exozytose und der Mitose. Abnormalitäten in der PLD-Expression wurden mit dem Fortschreiten vieler verschiedener Krebsarten sowie mit der Parkinson-Krankheit und der Alzheimer-Krankheit in Verbindung gebracht. Daher fördert die signifikante Nutzung eine starke Nachfrage nach der Überwachung der Aktivitäten von PLDs.

Creative Enzymes ist in der Lage, die genauesten Enzymaktivitätsassays für PLDs bereitzustellen. Der spektrophotometrische Test gilt als zuverlässige und kosteneffektive Methode zur Messung der Aktivitäten dieses Enzyms. Die Qualität unserer Ergebnisse wird durch die fortschrittlichsten spektrophotometrischen Instrumente sichergestellt. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihr bester Partner, der dafür bekannt ist, die beste Kundenzufriedenheit zu bieten.

Abbildung 2: Die Kristallstruktur der Phospholipase D aus streptomyces antibioticus.
PDB: 2ZE4