Enzymaktivitätsmessung von Cellulose 1,4-Beta-Cellobiosidase (reduzierendes Ende)

Die Enzymtestdienste von Creative Enzymes zeichnen sich durch hohe Qualität und schnelle Durchlaufzeiten aus. Durch die Kombination modernster Geräte und fortschrittlicher Techniken hat Creative Enzymes die Kunst der Enzymaktivitätsassays präsentiert, die sowohl industrielle als auch Forschungsbedürfnisse zufriedenstellt. Wir sind auf die Prüfung von Hydrolasen wie Cellulose 1,4-beta-Cellobiosidase (reduzierende Enden) spezialisiert.

Cellulose 1,4-beta-Cellobiosidase (reduzierende Enden) (Cellobiohydrolase, EC 3.2.1.176) hydrolysiert eine β-1,4-glycosidische Bindung vom reduzierenden Ende der Cellulose und setzt Cellobiose als Hauptprodukt frei. Der Abbau von Polysacchariden durch Hydrolyse ist ein biologischer Prozess mit vielversprechenden industriellen Anwendungen, obwohl dieser Prozess drei andere Cellulasen neben Cellobiohydrolasen benötigt. Diese spezialisierten Enzyme können unabhängig sezerniert werden oder sind in einigen Organismen an der Bildung des Cellulosoms beteiligt, einem Proteinkomplex, der aus einer Vielzahl von hydrolytischen Enzymen besteht, die zusammenarbeiten, um Cellulose effizient abzubauen.

Cellobiohydrolasen wurden in den Glycosid-Hydrolase-Familien 7 (GH7) und 48 (GH48) gefunden. GH7-Cellobiohydrolase-Enzyme weisen eine Jelly-Roll-β-Sandwich-Faltstruktur auf und nutzen zwei katalytische Glutamate in einem behaltenden hydrolytischen Mechanismus. Die GH48-Familie wird überwiegend als (α/α)₆-Faltenzyme klassifiziert, die Aspartat und Glutamat als Base und Säuredonoren für die Substratspaltung und die Freisetzung von Cellobiose als Hauptprodukt durch einen umkehrenden Mechanismus nutzen können. Angesichts der Anwendungen in der Biokatalyse, chemischen Synthese und Umweltchemie werden immer mehr Varianten dieses Enzyms entwickelt, einschließlich der Erstellung einer vielfältigen Mutantenbibliothek und der Optimierung der Zusammensetzung von Enzymgemischen zur Hydrolyse der Biomasse. Die Aktivitätsmessung von Cellobiohydrolasen ist daher stark nachgefragt. Der Test wird normalerweise durchgeführt, indem die Hydrolyseprodukte (Cellobiose oder Glukose) im Überstand durch HPLC nachgewiesen werden. Die am besten durchgeführte Chromatographie von Creative Enzymes kann sowohl schnelle als auch genaue Ergebnisse für verschiedene Tests erzielen.

Abbildung: Die Kristallstruktur und der katalytische Mechanismus der Cellobiohydrolase CelS.
Referenz: Guimaraes, B.G. et al. J.Mol.Biol. 2002 320: 587-596.

Creative Enzymes ist eines der führenden Unternehmen, das sich auf Enzymdienste konzentriert. Darüber hinaus sind wir das einzige Unternehmen, das Testdienste für Cellulose 1,4-beta-Cellobiosidase (reduzierende Enden) anbietet. Die erfahrenen Enzymologen wählen immer die am besten geeignete Testmethode für jede individuelle Anfrage aus. Unser ultimatives Ziel ist es, den Aktivitätstestdienst zu perfektionieren, wofür Creative Enzymes niemals aufhören wird, Wissen zu erweitern und Fähigkeiten zu aktualisieren.