Enzymentdeckung durch direkte Aktivitätsmessung

Über die Enzymentdeckung durch direkte Aktivitätsmessung

Die Entdeckung neuer Enzyme durch direkte Messung der Enzymaktivität ist eine Methode zur Screening und Entdeckung neuer Enzyme basierend auf ihrer katalytischen Aktivität. Im Gegensatz zu traditionellen Methoden zur Enzymentdeckung, die auf Gen- oder Proteinsequenzen basieren, ermöglicht sie eine schnelle Entdeckung potenzieller Enzymaktivitäten, einschließlich unbekannter Enzyme oder Enzyme, die noch nicht charakterisiert wurden. Allerdings erfordert sie ultra-hochdurchsatzfähige Aktivitätsmessungen und starke Fähigkeiten in der Methodenentwicklung. Diese Strategie ist nützlich, wenn spezifische enzymatische Aktivitäten in einer bestimmten Art von natürlichen Proben entdeckt werden, jedoch ohne klare Parameter wie Substratspezifität oder Enantioselektivität. Zum Beispiel können neuartige Aminosäureoxidasen auf Substratspezifität mit angereicherten Kulturen von Mikrobenproben gescreent werden. Mikroorganismen wie Bakterien und Hefen sind einfacher zu handhaben als andere höhere Organismen. Für kultivierbare Mikroorganismen kann ein hochdurchsatzfähiges mikrobielles Screening für Enzyme mit Kolonienpickern und Robotern durchgeführt werden, gefolgt von biochemischer Detektion der Enzymaktivitäten. Auch verschiedene selektive Isolationsmethoden werden angewendet, wie die "Anreicherungskulturtechnik" und die "Akklimatisierungstechnik". In einer Studie wurde eine FAD-abhängige L-Arginin-Oxidase, die spezifisch für L-Arginin ist, in neu isolierten Pseudomonas sp. TPU 7192 mit einer einfachen enzymatischen Methode entdeckt. Nach dreifacher Anreicherungskultur wurde der ausgewählte Stamm mit genomischer DNA-Sequenzierung identifiziert, und die Aktivität wurde spektrophotometrisch durch Messung der Rate der Wasserstoffperoxidbildung bewertet. In einem anderen Beispiel wurden Enzyme aus Pflanzensamen extrahiert. HPLC bestimmte die Aktivität und die Stereochemie.

Dienstleistungsinhalt für die Enzymentdeckung durch direkte Aktivitätsmessung

Wir bieten professionelle Dienstleistungen für die Enzymentdeckung durch direkte Aktivitätsmessung an und verpflichten uns, effiziente, genaue und zuverlässige Lösungen zur Enzymentdeckung für unsere Kunden bereitzustellen. Mit modernsten hochdurchsatzfähigen Enzym-Screening-Plattformen und -Geräten sowie einem Team erfahrener Wissenschaftler können wir verschiedene Technologien zur Messung der Enzymaktivität für die schnelle Entdeckung neuer Enzyme nutzen. Unsere spezialisierten One-Stop-Dienstleistungen umfassen, sind aber nicht beschränkt auf:

• Anreicherung und Identifizierung natürlicher Proben.
• Enzymextraktion im nativen und aktiven Zustand.
• Hochdurchsatz-Aktivitätsscreening einschließlich Methodenentwicklung.
• Entwicklung von Strategien zur Enzymisolierung und -reinigung.
• Aktivitäts-, Spezifitäts- und Strukturcharakterisierung neuer Enzyme.
• Aminosäureanalyse und Vorhersage der Sekundärstruktur.

Probenbereich: Er umfasst, ist aber nicht beschränkt auf Proben aus verschiedenen natürlichen Quellen wie Bodenmikroben, Pflanzen und Tieren.

Bereich der Zielenzyme: Er umfasst, ist aber nicht beschränkt auf Hydrolasen, Oxidoreduktasen und lythische Enzyme.

Aktivitätsassay: Hochdurchsatz-Aktivitätsassay.

Dienstablauf für die Enzymentdeckung durch direkte Aktivitätsmessung

1. Projektberatung und -planung: Wir verstehen Ihre Bedürfnisse und Ziele zur Enzymentdeckung und entwickeln ein Protokoll zur direkten Aktivitätsmessung, das auf Schlüsselparametern wie Probenart, Reaktionsbedingungen, Substratauswahl und Assay-Methode basiert.
2. Probenvorbereitung: Sie können die Proben bereitstellen oder wir können die Proben gemäß Ihren Anforderungen handhaben und vorbereiten.
3. Direkte Aktivitätsmessungsexperimente: Wir verwenden fortschrittliche Techniken zur Messung der Enzymaktivität, um die katalytische Aktivität der Probe unter geeigneten Reaktionsbedingungen zu messen. Diese Techniken umfassen Absorptionsmessungen, Fluoreszenzmessungen, Massenspektrometrie usw. und werden je nach verschiedenen Enzymtypen und Substrateigenschaften ausgewählt.
4. Datenanalyse und -interpretation: Wir führen eine umfassende Datenanalyse der direkten Aktivitätsmessungen durch, begleitet von detaillierten Berichten und Grafiken, und bieten Erklärungen und Empfehlungen zur Aktivität der entdeckten Enzyme, damit Sie Einblicke in die Eigenschaften und das Potenzial der entdeckten Enzyme gewinnen können.

Mit unserem Service zur direkten Aktivitätsmessung für die Enzymentdeckung können Sie schnell genaue und zuverlässige Daten zur Enzymaktivität erhalten, um die Enzymfunktion und den katalytischen Mechanismus zu analysieren, was starke Unterstützung für Ihre Forschung und Anwendungen bietet. Egal, ob Sie in der akademischen Forschung oder in der biopharmazeutischen Entwicklung tätig sind, wir können Ihnen die besten experimentellen Dienstleistungen in bester Qualität bieten. Bitte kontaktieren Sie unser Team, um mehr über unsere Dienstleistungen und Lösungen zu erfahren.

Abbildung 1. Darstellung der Schritte, die zur Identifizierung neuartiger Enzyme führen.
(Biotechnologie, Agronomie, Gesellschaft und Umwelt 2016)