Enzymaktivitätsmessung der Uronatdehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen, das Aktivitätsassay-Dienste für Oxidoreduktasen anbietet. Unsere jahrzehntelange Erfahrung basiert auf der gründlichen Untersuchung von Assay-Methoden und dem tiefen Lernen aus einer großen Anzahl abgeschlossener Tests. Wir haben eine hochstandardisierte Messkontrolle, die die zuverlässigsten Ergebnisse für Uronat-Dehydrogenase garantiert.

Bis jetzt wurde Uronat-Dehydrogenase (EC 1.1.1.203) nur in Agrobacterium und Pseudomonas gefunden. Dieses Enzym gehört zur Familie der Oxidoreduktasen und katalysiert die Oxidation von D-Galakturonsäure zu D-Galaktaro-1,5-Lacton oder von D-Glucuronsäure zu D-Glucaro-1,5-Lacton, begleitet von der Umwandlung von NAD⁺ zu NADH. Weitere gebräuchliche Namen sind Uronat: NAD-Oxidoreduktase und Uronensäure-Dehydrogenase.

D-Galakturonsäure ist der Hauptbestandteil von Pektin, das ein wichtiges Rohmaterial für biotechnologische Anwendungen ist, insbesondere mit Potenzial in der Biokonversion zu Kraftstoffen und feinen Chemikalien. Es gibt zwei verschiedene katabolische Wege, die am Katabolismus von D-Galakturonsäure beteiligt sind; einer davon ist ein oxidativer Weg. In diesem Weg wird D-Galakturonsäure zunächst zu Meso-Galactarsäure oxidiert und dann im folgenden Schritt zu α-Ketoglutarat umgewandelt. Uronat-Dehydrogenase (EC 1.1.1.203) ist das Schlüsselenzym im oxidativen Weg des Katabolismus von D-Galakturonsäure in Bakterien. Bis jetzt wurde nur die Uronat-Dehydrogenase von Agrobacterium tumefaciens (AtUdh) im Detail untersucht. AtUdh gehört zur Superfamilie der kurzkettigen Dehydrogenasen/Reduktasen (SDR) und akzeptiert sowohl D-Galakturonsäure als auch D-Glucuronsäure als Substrate mit ähnlichen Affinitäten. Weitere Studien zeigten, dass die katalytische Aktivität Mg²⁺-Ionen erfordert. Weitere Forschungen über die grundlegende Charakterisierung dieses Enzyms sind sehr begrenzt. Viele mechanistische und strukturelle Grundlagen müssen verstanden werden, bevor das Enzym in der Biokonversion eingesetzt werden kann. Geeignete Aktivitätsassays sind der erste Schritt, um mit Uronat-Dehydrogenasen aus anderen Arten zu experimentieren. Creative Enzymes bietet spektrophotometrische Assay-Dienste an, um die Anforderungen der Kunden an die Verwendung von Uronat-Dehydrogenase in der nächsten Generation von biotechnologischen Produkten zu erfüllen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Uronat-Dehydrogenasen von Agrobacterium tumefaciens.
Referenz: Tarja Parkkinen et al. J. Biol. Chem. 2011 286: 27294-27300

Creative Enzymes ist eines der wenigen Unternehmen, die Assay-Dienste für Uronat-Dehydrogenasen anbieten. Wir haben geeignete Assay-Methoden für gereinigte Enzyme und auch für Enzymextraktionen etabliert. Unsere Ergebnisse sind durch zuverlässige Quantifizierungsansätze und konsistente Reproduzierbarkeit gesichert. In Zukunft wird Creative Enzymes Ihre Forschung weiterhin schnell und effizient unterstützen.