Messung der Enzymaktivität der Alanin-Dehydrogenase

Creative Enzymes erforscht und entwickelt seit vielen Jahren Methoden zur Quantifizierung der katalytischen Aktivität von Enzymen und verfügt über die erforderliche Expertise, um einen Enzymaktivitätsassay für Alanin-Dehydrogenase anzubieten. Unser Anspruch an höchste Qualität und exzellenten Service wird nur von unserem hervorragenden Ruf im Markt übertroffen.

Alanin-Dehydrogenase (EC 1.4.1.1) ist ein Enzym, das die reversible Umwandlung von Pyruvat und Ammoniak zu L‑Alanin katalysiert und dabei gleichzeitig NADH erzeugt, das als Wasserstoffdonor für zahlreiche biosynthetische Prozesse dient. Die reduktive Aminierung von Pyruvat ist insofern bedeutsam, als sie zur Alaninbiosynthese führt und einen Mechanismus zur Einbindung von freiem Ammoniak in zelluläre Proteine bereitstellt. Der systematische Name dieser Enzymklasse lautet L‑Alanin:NAD⁺-Oxidoreduktase (desaminierend) und ist auch bekannt als:

• AlaDH;
• L‑Alanin-Dehydrogenase;
• NAD⁺-gekoppelte Alanin-Dehydrogenase;
• α‑Alanin-Dehydrogenase;
• NAD⁺-abhängige Alanin-Dehydrogenase;
• Alanin-Oxidoreduktase;
• NADH-abhängige Alanin-Dehydrogenase

Die Aktivität der Alanin-Dehydrogenase wurde in einem breiten Spektrum bakterieller Spezies nachgewiesen, u. a. unter Verwendung ruhender Zellsuspensionen sowie zellfreier Extrakte. In Mykobakterien wurde sie zunächst als Enzym identifiziert, das in den Impfstoffstämmen von M. bovis BCG fehlt, jedoch in virulenten Mycobacterium tuberculosis vorhanden ist. Es wurde angenommen, dass die eingeschränkte Replikation von M. bovis BCG beim Menschen aufgrund des Fehlens einer funktionellen Alanin-Dehydrogenase die Entwicklung einer protektiven Immunität hemmt. Im Unterschied zu Alanin-Dehydrogenasen anderer Bakterien ist die Alanin-Dehydrogenase aus M. tuberculosis ein multispezifisches Enzym, das entweder Glyoxylat oder Pyruvat als Substrat nutzt. Sie katalysiert die Reduktion von Pyruvat zu Alanin bzw. von Glyoxylat zu Glycin, gekoppelt an die Oxidation von NADH zu NAD⁺. In der Gegenrichtung oxidiert sie Alanin zu Pyruvat (ALD), nutzt jedoch Glycin nicht als Substrat. Daher wurde vorgeschlagen, dass Alanin-Dehydrogenase eine wichtige Rolle bei der Aufrechterhaltung des Redoxgleichgewichts während des Übergangs von M. tuberculosis in den NRP‑Zustand spielt. Zu beachten ist, dass M. tuberculosis der Erreger der Tuberkulose ist, die jährlich für etwa 2 Millionen Todesfälle verantwortlich ist und weltweit nahezu ein Drittel der Bevölkerung betrifft.

Vor diesem Hintergrund wird deutlich, dass Alanin-Dehydrogenase ein äußerst nützliches Enzym für die medizinische und pharmazeutische Industrie ist. Darüber hinaus kann Alanin-Dehydrogenase je nach Bedingungen und möglicherweise auch je nach Spezies multiple Funktionen erfüllen. Entsprechend sollte der Quantifizierung der katalytischen Aktivität dieses Enzyms zunehmend Aufmerksamkeit gewidmet werden. Creative Enzymes bietet die Dienstleistung der Messung der katalytischen Aktivität von Alanin-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays an, die bei 25 °C durchgeführt werden können, indem die Absorption bei 340 nm verfolgt wird. Durch konsequentes Streben nach Dienstleistungen in höchster Qualität hat Creative Enzymes das Vertrauen unzähliger Kunden gewonnen und bietet mit Stolz ein breites Spektrum hochentwickelter Forschungsdienstleistungen an. Creative Enzymes ist Ihre beste Wahl für alle Forschungs- oder Entwicklungsaktivitäten im Zusammenhang mit Alanin-Dehydrogenase.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Apo‑L‑Alanin-Dehydrogenase aus M. tuberculosis.
PDB: 2VHY