Enzymatische Aktivitätsmessung der NADPH-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes hat sich zum Ziel gesetzt, ein weltweit führender Anbieter von Enzymdienstleistungen zu werden. Wie viele Kunden in der Vergangenheit bezeugen, sind unsere hochwertigen Dienstleistungen und unser Fachwissen auf dem globalen Markt anerkannt. Unsere Aktivitätsassays von Oxidoreduktasen sind hinsichtlich Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit garantiert. Einer der beliebtesten Dienste ist der Aktivitätsassay von NADPH-Dehydrogenase.

NADPH-Dehydrogenase (EC 1.6.99.1) ist eine Familie von Flavoproteinen, die die NADPH-abhängige Reduktion von einem Akzeptor in seine reduzierte Form katalysieren. Der erste Schritt in dieser Reaktion ist die Bildung eines Ladungsübertragungs-Komplexes zwischen dem Flavin-Kofaktor und dem Nikotinamid, gefolgt von einem Hydridtransfer von NADPH zu FMN. Das Enzym wird effizient durch NADPH reduziert, während die Reaktion mit NADH in einigen Arten etwa 20-mal langsamer ist. Mitglieder dieser Familie wurden in Bakterien, Hefen, Pflanzen und Nematoden gefunden, aber ihre physiologischen Funktionen sind größtenteils unbekannt.

NADPH-Dehydrogenase kann auf eine Vielzahl von Substraten wirken, wie verschiedene α, β-ungesättigte Carbonylverbindungen, einschließlich Ketonen und Estern. Diese Chemikalien sind vielseitige Zwischenprodukte in der organischen Synthese. Im Allgemeinen ist die traditionelle chemische Synthese durch Chemoselektivität und Regioselektivität sowie hohe Umweltauswirkungen eingeschränkt. Enzymatische Ansätze würden eine wertvolle „grüne“ Alternative darstellen. Kürzlich hat die Forschung über die Beziehung zwischen Strukturen und Funktionen schnell zugenommen. Studien haben gezeigt, dass, obwohl nur eine moderate Identität der Gensequenzen mit vielen Arten geteilt wird, die Strukturen ziemlich ähnlich sind. Die Enzyme bestehen alle aus den typischen (β/α)₈-Fässern, und FMN ist am C-terminalen Ende gebunden. Die Studien zur Nutzung neuer Enzyme tragen dazu bei, eine hohe Spezifität zu erreichen und die katalytische Effizienz für einzigartige Substrate zu verbessern. Die Mutanten der existierenden NADPH-Dehydrogenase sind ebenfalls ein Zugang, um Enzyme mit speziellen Aktivitäten zu erhalten.

Abbildung: Die Struktur der Xenobiotika-Reduktase A von Pseudomonas putida, die zur Familie der NADPH-Dehydrogenasen gehört.
Referenz: Spiegelhauer, O. et al. J.Mol.Biol. 2010 398: 66-82

Creative Enzymes bietet präzise Assay-Dienstleistungen für die Aktivität von NADPH-Dehydrogenase an, die sowohl für die Wildtyp- als auch für die Mutantenenzyme geeignet sind. Unsere herausragenden Fähigkeiten und fortschrittlichen Geräte unterstützen Ihre Forschung auf schnelle und effiziente Weise. Creative Enzymes ist immer die erste Wahl für die Testung der Enzymaktivität.