Messung der Enzymaktivität der NADPH-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes ist bestrebt, ein erstklassiger globaler Anbieter von Enzymdienstleistungen zu werden. Wie zahlreiche Kunden in der Vergangenheit bestätigen, sind unsere hochwertigen Services und unsere fachliche Expertise am globalen Markt anerkannt. Unsere Aktivitätsassays für Oxidoreduktasen sind hinsichtlich Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit gewährleistet. Zu den gefragtesten Leistungen zählt der Aktivitätsassay der NADPH-Dehydrogenase.

NADPH-Dehydrogenase (EC 1.6.99.1) bezeichnet eine Familie von Flavoproteinen, die die NADPH-abhängige Reduktion eines Akzeptors zu dessen reduzierter Form katalysieren. Der erste Schritt dieser Reaktion ist die Bildung eines Ladungstransfer-Komplexes zwischen dem Flavin-Cofaktor und dem Nicotinamid, gefolgt von einem Hydridtransfer von NADPH auf FMN. Das Enzym wird durch NADPH effizient reduziert, während die Reaktion mit NADH bei einigen Spezies etwa 20‑fach langsamer verläuft. Mitglieder dieser Familie wurden in Bakterien, Hefen, Pflanzen und Nematoden nachgewiesen, ihre physiologischen Funktionen sind jedoch überwiegend unbekannt.

NADPH-Dehydrogenase kann auf eine Vielzahl von Substraten wirken, darunter verschiedene α,β‑ungesättigte Carbonylverbindungen, einschließlich Ketonen und Estern. Diese Chemikalien sind vielseitige Zwischenprodukte in der organischen Synthese. Im Allgemeinen ist die traditionelle chemische Synthese durch Chemo- und Regioselektivität sowie durch hohe Umweltbelastungen limitiert. Enzymatische Ansätze stellen eine wertvolle „grüne“ Alternative dar. In jüngerer Zeit gewinnt die Forschung zu Struktur‑Funktions‑Beziehungen rasch an Dynamik. Studien haben gezeigt, dass trotz nur moderater Gen-Sequenzidentität zwischen vielen Spezies die Strukturen sehr ähnlich sind. Die Enzyme bestehen sämtlich aus den typischen (β/α)₈-Fässern, und FMN ist am C‑terminalen Ende gebunden. Untersuchungen zur Erschließung neuer Enzyme tragen dazu bei, eine hohe Spezifität zu erzielen und die katalytische Effizienz für einzigartige Substrate zu verbessern. Mutanten bereits vorhandener NADPH-Dehydrogenasen stellen ebenfalls einen Zugang dar, um Enzyme mit besonderen Aktivitäten zu erhalten.

Abbildung: Die Struktur der Xenobiotika-Reduktase A aus Pseudomonas putida, die zur NADPH-Dehydrogenase-Familie gehört.
Referenz: Spiegelhauer, O. et al. J.Mol.Biol. 2010 398: 66–82

Creative Enzymes bietet präzise Assay-Services zur Bestimmung der NADPH-Dehydrogenase-Aktivität an, geeignet sowohl für Wildtyp- als auch für mutierte Enzyme. Unsere herausragende Expertise und moderne Ausstattung unterstützen Ihre Forschung schnell und effizient. Creative Enzymes ist stets die erste Wahl für Enzymaktivitätstests.