Messung der Enzymaktivität der Fructose-1,6-Bisphosphatase

Creative Enzymes ist ein industrielles Biotechnologieunternehmen, das auf Enzymaktivitätsassays spezialisiert ist. In Übereinstimmung mit der Tradition unseres Unternehmens sind wir fest davon überzeugt, dass höchste Qualitätsstandards für unsere Arbeit und Dienstleistungen der Schlüssel zu unserem globalen Erfolg und zu einer hohen Kundenzufriedenheit sind. In diesem Zusammenhang bieten wir Ihnen mit Stolz einen hochentwickelten enzymatischen Assay für Fructose‑Bisphosphatase an.

Fructose‑Bisphosphatase (EC 3.1.3.11; D‑Fructose‑1,6‑bisphosphat‑1‑Phosphohydrolase) ist ein Enzym, das den geschwindigkeitsbestimmenden Schritt im gluconeogenetischen Stoffwechselweg katalysiert, nämlich die Hydrolyse von Fructose‑1,6‑bisphosphat zu Fructose‑6‑phosphat und anorganischem Phosphat. Fructose‑Bisphosphatase gilt als eines der Schlüsselenzyme der Gluconeogenese. Fructose‑2,6‑bisphosphat und AMP hemmen die Fructose‑Bisphosphatase synergistisch und können durch ihren Effekt auf die Fructose‑Bisphosphatase potenziell den gesamten gluconeogenetischen Stoffwechselweg limitieren. Für die Katalyse benötigt Fructose‑Bisphosphatase zweiwertige Kationen (Mg²⁺, Mn²⁺ oder Zn²⁺), und einige einwertige Kationen wie K⁺ oder NH₄⁺ können die Aktivität zusätzlich steigern. Dieses Enzym wurde aus Bakterien, Hefen sowie höheren Eukaryoten charakterisiert. Die Aminosäuresequenzen der Säugetierenzyme sind untereinander zu 85 % identisch und ähneln der Fructose‑Bisphosphatase der Klasse I in Bakterien. In Escherichia coli wurden zwei Fructose‑Bisphosphatasen identifiziert, die durch das fbp-Gen bzw. das glpX-Gen kodiert werden und jeweils zur Klasse I bzw. Klasse II gehören. Eine stark divergente Fructose‑Bisphosphatase der Klasse III wurde ebenfalls in Bacillus subtilis identifiziert. Interessanterweise wurde Fructose‑Bisphosphatase‑Aktivität auch in Zellextrakten mehrerer Archaeen nachgewiesen, obwohl in deren Genomen keine orthologen Gene mit struktureller Ähnlichkeit zu zuvor beschriebenen Fructose‑Bisphosphatasen vorhanden sind. Eine neue Gruppe von Fructose‑Bisphosphatasen (Klasse V) findet sich in thermophilen Archaeen sowie im hyperthermophilen Bakterium Aquifex aeolicus.

Beachten Sie, dass die porzine Fructose‑Bisphosphatase, die am umfassendsten untersuchte aller Fructose‑Bisphosphatasen, ein Homotetramer mit einer Untereinheits‑Molekülmasse von 37 kDa ist. Funktionell kann Fructose‑Bisphosphatase als Zielstruktur für die Arzneimittelentwicklung zur Behandlung des Diabetes mellitus Typ 2 dienen. Darüber hinaus spielt Fructose‑Bisphosphatase auch eine zentrale Rolle in der Biotechnologie, Molekularbiologie und Biosynthese. Diese bedeutenden Funktionen führen zu einer hohen Nachfrage nach der Überwachung der Fructose‑Bisphosphatase‑Aktivität.

Creative Enzymes ist in der Lage, den zuverlässigsten verfügbaren enzymatischen Assay für Fructose‑Bisphosphatase bereitzustellen. Die Enzymaktivität wird spektrophotometrisch bestimmt, indem die Reduktion von NADP⁺ in Anwesenheit von Glucose‑6‑phosphat‑Isomerase (EC 5.3.1.9) und Glucose‑6‑phosphat‑Dehydrogenase (EC 1.1.1.49) verfolgt wird. Die Bildung von Fructose‑6‑phosphat führt zur Reduktion einer äquivalenten Menge NADP⁺, was durch Messung des Anstiegs der optischen Dichte bei 340 nm überwacht wird. Unsere hochwertigen Enzym‑Assay‑Dienstleistungen genießen höchstes Vertrauen und wurden von unzähligen Kunden ausdrücklich empfohlen. Als Ihr verlässlicher Partner wird Creative Enzymes auch künftig den professionellen Standard aufrechterhalten und effiziente Dienstleistungen erbringen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der porzinen Fructose‑Bisphosphatase.
PDB: 1NUY