Enzymaktivitätsmessung für Fructose-Bisphosphatase

Creative Enzymes ist ein biotechnologisches Unternehmen, das sich auf enzymatische Aktivitätsassays spezialisiert hat. Treu der Tradition unseres Unternehmens glauben wir fest daran, dass der höchste Qualitätsstandard für unsere Arbeit und Dienstleistungen der Schlüssel zu unserem globalen Erfolg und der hohen Kundenzufriedenheit ist. In diesem Sinne sind wir stolz darauf, den hochentwickelten enzymatischen Assay für Fructose-Bisphosphatase anzubieten.

Fructose-Bisphosphatase (EC 3.1.3.11; D-Fructose-1,6-bisphosphat 1-Phosphohydrolase) ist ein Enzym, das den geschwindigkeitsbestimmenden Schritt im gluconeogenetischen Weg katalysiert, nämlich die Hydrolyse von Fructose-1,6-bisphosphat zu Fructose-6-phosphat und anorganischem Phosphat. Fructose-Bisphosphatase wird als eines der Schlüsselenzyme in der Gluconeogenese angesehen. Fructose-2,6-bisphosphat und AMP hemmen synergistisch die Fructose-Bisphosphatase und können potenziell den gesamten gluconeogenetischen Weg durch ihre Wirkung auf die Fructose-Bisphosphatase einschränken. Fructose-Bisphosphatase benötigt zweiwertige Kationen (Mg²⁺, Mn²⁺ oder Zn²⁺) für die Katalyse, und einige einwertige Kationen wie K⁺ oder NH₄₊ können die Aktivität weiter steigern. Dieses Enzym wurde aus Bakterien, Hefen sowie höheren Eukaryoten charakterisiert. Die Aminosäuresequenzen der Säugetierenzyme sind zu 85 % identisch und ähneln der Klasse I Fructose-Bisphosphatase in Bakterien. In Escherichia coli wurden zwei Fructose-Bisphosphatasen identifiziert, die durch das fbp-Gen und das glpX-Gen kodiert werden und zur Klasse I bzw. Klasse II gehören. Eine sehr divergente Klasse III Fructose-Bisphosphatase wurde ebenfalls in Bacillus subtilis identifiziert. Interessanterweise wurde die Aktivität der Fructose-Bisphosphatase auch in Zellextrakten mehrerer Archaeen nachgewiesen, obwohl orthologe Gene mit struktureller Ähnlichkeit zu zuvor berichteten Fructose-Bisphosphatasen in ihren Genomen nicht vorhanden sind. Eine neue Gruppe von Fructose-Bisphosphatasen (Klasse V) wurde in thermophilen Archaeen und dem hyperthermophilen Bakterium Aquifex aeolicus gefunden.

Beachten Sie, dass die Schweine-Fructose-Bisphosphatase, die am intensivsten untersuchte aller Fructose-Bisphosphatasen, ein Homotetramer mit einer Subunit-Molekularmasse von 37 kDa ist. Funktionell kann die Fructose-Bisphosphatase als Ziel für die Arzneimittelentwicklung zur Behandlung von Typ-2-Diabetes mellitus dienen. Darüber hinaus spielt die Fructose-Bisphosphatase auch eine entscheidende Rolle in der Biotechnologie, Molekularbiologie und Biosynthese. Diese bedeutenden Funktionen fördern somit eine starke Nachfrage nach der Überwachung der Aktivität der Fructose-Bisphosphatase.

Creative Enzymes ist in der Lage, den zuverlässigsten enzymatischen Assay für Fructose-Bisphosphatase anzubieten. Die Enzymaktivität wird spektrophotometrisch gemessen, indem die Reduktion von NADP⁺ in Gegenwart von Glucose-6-Phosphat-Isomerase (EC 5.3.1.9) und Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (EC 1.1.1.49) verfolgt wird. Die Bildung von Fructose-6-phosphat führt zur Reduktion einer äquivalenten Menge von NADP⁺, die durch die Messung der Zunahme der optischen Dichte bei 340 nm überwacht wird. Unsere hochwertigen Enzymassay-Dienstleistungen sind am vertrauenswürdigsten und wurden von unzähligen Kunden gelobt. Als Ihr vertrauenswürdiger Partner wird Creative Enzymes weiterhin den professionellen Standard aufrechterhalten und in Zukunft effiziente Dienstleistungen anbieten.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Schweine-Fructose-Bisphosphatase.
PDB: 1NUY