Messung der Enzymaktivität der Nitratreduktase

Creative Enzymes ist stolz darauf, spektrophotometrische Aktivitätsassays für Nitratreduktase anzubieten. Unsere Dienstleistungen zählen zu den zuverlässigsten und am besten validierten am Markt und werden durch dedizierten Marketing- sowie technischen Support begleitet. Mit uns ist Ihr Unternehmen optimal für nachhaltigen Erfolg positioniert.

Nitratreduktase (EC 1.7.1.1, EC 1.7.1.2, EC 1.7.1.3) katalysiert die NAD(P)H‑abhängige Reduktion von Nitrat zu Nitrit. Die eukaryotische assimilatorische Nitratreduktase katalysiert folgende Reaktion:

NO₃- + NAD(P)H → NO₂- + NAD(P)⁺ + OH^-

Als Kofaktor wird entweder NAD⁺ oder NADP⁺ benötigt; entsprechend lässt sich das Enzym anhand seiner Kofaktorpräferenz weiter klassifizieren: NADH‑spezifische Nitratreduktasen (EC 1.7.7.1) kommen in höheren Pflanzen und Algen vor; NADPH‑spezifische Nitratreduktasen (EC 1.7.7.3) finden sich ausschließlich in Pilzen; und NAD(P)H‑bispezifische Nitratreduktasen (EC 1.7.7.2) treten in höheren Pflanzen, Algen und Pilzen auf. In all diesen Organismen katalysiert die Nitratreduktase den ersten Schritt der Nitratassimilation, der in den meisten Fällen als geschwindigkeitsbestimmender Prozess bei der Stickstoffaufnahme gilt. Jedes Monomer der Nitratreduktase besteht aus FAD, Häm‑Eisen und Molybdän‑Molybdopterin (Mo‑MPT). Diese Komponenten fungieren offenbar als Elektronenträger beim Transfer von Elektronen zwischen der NAD(P)H‑Oxidationsstelle und der Nitrat‑Reduktionsstelle. Nitratreduktase ist ein multizentrisches Redoxprotein mit drei klar abgegrenzten Domänen: einer N‑terminalen katalytischen Domäne, die Molybdopterin bindet; einer zentralen Domäne, die einer Cytochrom‑b557‑Sequenz entspricht und Häm bindet; sowie einer C‑terminalen Domäne, die als Cytochrom‑b‑Reduktase FAD und ein reduziertes Pyridinnukleotid bindet.

Die physiologische Funktion der Nitratreduktase besteht darin, als Bestandteil des Stickstoffaufnahme‑Mechanismus in höheren Pflanzen, Pilzen und Algen die pyridinnukleotidabhängige Nitratreduktion zu katalysieren. Darüber hinaus kann Nitratreduktase potenziell zur Erhaltung und Reinigung der Umwelt beitragen, indem überschüssiges Nitrat und verwandte stickstoffhaltige Nährstoffe in Wasserquellen reduziert werden. Trotz ihrer wichtigen Funktionen sind spektrophotometrische Aktivitätsassays für Nitratreduktase im industriellen Maßstab bislang nicht umfassend etabliert, auch wenn Aktivitätsmessungen mittels anderer Methoden bereits berichtet wurden. Dank eines professionellen Teams herausragender Enzymologen bietet Creative Enzymes die modernsten spektrophotometrischen Assay‑Technologien, um die enzymatische Aktivität dieses Enzyms präzise zu bestimmen. Durch das konsequente Streben nach Leistungen höchster Qualität hat sich Creative Enzymes als weltweit führender Anbieter von Dienstleistungen zur Quantifizierung enzymatischer Aktivität etabliert. Insgesamt wird Creative Enzymes Ihre Zielsetzung, bemerkenswerte Ergebnisse zu erzielen, jederzeit mit unseren spezialisierten Services unterstützen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Nitratreduktase (NADPH) aus Ogataea angusta.
PDB: 2BIH