Messung der Enzymaktivität der Arachidonat-5-Lipoxygenase

Der Erfolg von Creative Enzymes basiert auf kontinuierlich aktualisiertem Fachwissen und exzellenten Kompetenzen – gestützt durch jahrzehntelange Erfahrung in der Prüfung der Enzymaktivität. Unsere herausragenden Dienstleistungen zur Enzymaktivitätsbestimmung lassen sich für jedes Enzym individuell auf zielgerichtete und geeignete Ansätze zuschneiden. Arachidonat-5-Lipoxygenase ist eine der Oxidoreduktasen, die von unseren präzisen spektrophotometrischen Assays profitieren kann.

Arachidonat-5-Lipoxygenase (EC 1.13.11.34) ist ein nicht-hämhaltiges, eisenhaltiges Enzym aus der Lipoxygenase-Familie. Dieses Enzym ist über eine zweistufige katalytische Reaktion an der Biosynthese von Leukotrienen (LTs) beteiligt. Arachidonat-5-Lipoxygenase (5-LO) katalysiert zunächst die Oxygenierung von Arachidonsäure (AA) zu 5(S)-Hydroperoxy-6-trans-8,11,14-cis-Eicosatetraensäure (5-HPETE), die anschließend eine Dehydratisierung durchläuft und dabei das allylische Epoxid Leukotrien A₄ bildet.

Beim Menschen besitzt dieses Enzym einen hohen Forschungswert aufgrund seiner Schlüsselrolle im Stoffwechsel essenzieller Fettsäuren (EFA) sowie seiner potenziellen klinischen Relevanz. Leukotriene, die Produkte der durch dieses Enzym katalysierten Reaktion, werden in der Lipid-Signalübertragung genutzt, um Informationen zur Regulation von Immunantworten zu vermitteln. In der Arzneimittel- und Wirkstoffentwicklung ist dieses Enzym zu einem Forschungsziel für zahlreiche Erkrankungen geworden. Im Kontext von Entzündung und Allergie deuten Studien darauf hin, dass Arachidonat-5-Lipoxygenase sowohl zur angeborenen Immunität als auch zur Entstehung und Progression überschießender und chronischer Entzündungsreaktionen beiträgt. Bei Überempfindlichkeitsreaktionen führt dieses Enzym zu nichtallergischen Reaktionen der Atemwege und der Haut oder trägt zu Überempfindlichkeitsreaktionen der Atemwege gegenüber kalter Luft und alkoholischen Getränken bei. Die Identifizierung von Inhibitoren der Arachidonat-5-Lipoxygenase ist ein effektiver Ansatz zur Suche nach klinisch relevanten Arzneimitteln; ein erfolgreiches Beispiel ist der Wirkstoff Zileuton, der zur Erhaltungstherapie von Asthma eingesetzt wird. Angesichts der klinischen Bedeutung wurden zahlreiche Forschungsarbeiten zu diesem Enzym initiiert. Die Aktivitätsmessung stellt jedoch eine erhebliche Herausforderung dar, da die Enzymaktivität nur kurzzeitig stabil ist, offenbar teilweise aufgrund einer intrinsischen Instabilität des Enzyms. Zur Lösung dieses Problems setzt Creative Enzymes auf moderne Ausstattung und erfahrene Fachexperten, um Daten während des Zeitfensters stabiler Aktivität rasch zu analysieren und gleichzeitig Interferenzen durch andere Bestandteile zu vermeiden.

Abbildung: Struktur der stabilen humanen 5-Lipoxygenase.
Referenz: Gilbert, N.C. et al. Science 2011 331: 217-219.

Creative Enzymes ist schrittweise zu einem führenden Unternehmen in der Enzym-Servicebranche herangewachsen. Wir nutzen fundierte Studien und aktuelles Wissen als wirkungsvolle Instrumente, um Hürden in der enzymologischen Analytik zu überwinden. Als Ihr zuverlässiger Partner wird Creative Enzymes dauerhaft in der Lage sein, hochwertige Dienstleistungen zur Messung der Enzymaktivität bereitzustellen.