Messung der Enzymaktivität der Protocatechuate-3,4-Dioxygenase mittels spektrophotometrischer Assays

Bei Creative Enzymes ist die Bereitstellung präziser Methoden zur Messung der Oxidoreduktase-Aktivität dank unserer spezialisierten Expertinnen und Experten mit umfassender Erfahrung sowie modernster, hochpräziser Instrumentierung jederzeit gewährleistet. Der Assay-Service für Protocatechuate-3,4-Dioxygenase wird mittels spektrophotometrischer Analyse durchgeführt und liefert belastbare, reproduzierbare Ergebnisse.

Protocatechuate-3,4-Dioxygenase (EC 1.13.11.3) gehört zur Klasse der Intradiol-Dioxygenasen (IDOs), die den Kofaktor Fe³⁺ zur ortho-Spaltung zwischen den Hydroxylfunktionen nutzen. Dieses Enzym wirkt auf 3,4-Dihydroxybenzoat (PCA) oder verwandte catecholische Verbindungen und katalysiert die Spaltung von O₂ sowie die gleichzeitige Ringöffnung zur Bildung von cis,cis-Muconat-Produkten. Es wurde aus zahlreichen, phylogenetisch unterschiedlichen Bodenbakterien isoliert und als Reagenz zur Verbesserung der Stabilität organischer Fluorophore eingesetzt.

Dieses Enzym ist an der Benzoat-Degradation über Hydroxylierung sowie an der Degradation von 2,4-Dichlorbenzoat beteiligt – zentrale Schritte in aeroben biodegradativen Stoffwechselwegen, die es Organismen ermöglichen, ihren gesamten Kohlenstoff- und Energiebedarf aus aromatischen Kohlenwasserstoffen zu decken. Nach der Spaltung durch Protocatechuate-3,4-Dioxygenase werden aromatische Ringsysteme geöffnet und linear strukturierte Kohlenwasserstoffprodukte gebildet. Das Produkt tritt nach einer Reihe weiterer katalytischer Schritte in den Citratzyklus ein. Durch diese Enzymgruppe werden komplexe chemische Verbindungen zu einfachen Molekülen abgebaut, die im zentralen Stoffwechsel effizient zur Energiegewinnung genutzt werden können – ein wesentlicher Prozess für die vollständige Verwertung von Substanzen zur Aufrechterhaltung lebenswichtiger Funktionen. Protocatechuate-3,4-Dioxygenase trägt zudem zum Umweltschutz bei. Aufgrund des breiten Spektrums an Enzymtypen können diese Enzyme in der Bioremediation von belastetem Grundwasser oder von mit unterschiedlichen aromatischen Verbindungen kontaminierten Böden eingesetzt werden. Wegen des vielversprechenden Potenzials zur Schadstoffelimination stehen sowohl die Aufreinigung als auch die Substratspezifität des Enzyms im Fokus zahlreicher Studien. Einerseits beschleunigen hochreine Enzyme mit hoher katalytischer Aktivität den Dekontaminationszyklus; andererseits ermöglicht eine breite Substratspezifität Anwendungen in variableren Umgebungen. Creative Enzymes bietet geeignete, auf dieses Enzym ausgerichtete Assays auf Basis einer besonders zuverlässigen spektrophotometrischen Analyse an.

Abbildung: Die Struktur der Protocatechuate-3,4-Dioxygenase im Komplex mit 3-Hydroxybenzoat.
Referenz: Orville, A.M. et al. Biochemistry 1997 36: 10039-10051.

Creative Enzymes hat sich der Bereitstellung erstklassiger Enzymaktivitäts-Assays verpflichtet. Wir verfügen über modernste Geräte und professionelle Teams, die präzise Prüfergebnisse liefern. Die Mehrheit unserer Kundinnen und Kunden ist mit der hohen Qualität und der schnellen Serviceabwicklung äußerst zufrieden. Creative Enzymes wird Ihre Forschung auch künftig mit exzellentem Support unterstützen.