Enzymaktivitätsmessung von Protocatechuat 3,4-Dioxygenase mittels spektrophotometrischer Assays

Bei Creative Enzymes war es nie eine Herausforderung, genau Ansätze zur Messung der Aktivität von Oxidoreduktasen bereitzustellen, dank unserer spezialisierten Experten mit umfangreicher Erfahrung und fortschrittlicher Ausrüstung mit präzisen Ergebnissen. Der Assay-Service für Protocatechuat 3,4-Dioxygenase wird durch spektrophotometrische Analyse durchgeführt, die zuverlässige Ergebnisse liefert.

Protocatechuat 3,4-Dioxygenase (EC 1.13.11.3) gehört zur Klasse der Intradiol-Dioxygenasen (IDOs), die den Fe³⁺-Cofaktor verwendet, um eine ortho-Spaltung zwischen den Hydroxylfunktionen zu erreichen. Dieses Enzym wirkt auf 3,4-Dihydroxybenzoat (PCA) oder verwandte catecholische Verbindungen und katalysiert die Spaltung von O₂ sowie die gleichzeitige Ringöffnung, um cis, cis-Muconat-Produkte zu erzeugen. Es wurde aus vielen divergierenden Bodenbakterien isoliert und als Reagenz zur Verbesserung der Stabilität organischer Fluorophore eingesetzt.

Dieses Enzym beteiligt sich am Abbau von Benzoat durch Hydroxylierung und am Abbau von 2,4-Dichlorbenzoat, die einen sehr wichtigen Teil der aeroben biodegradativen Wege darstellen, die es den Organismen ermöglichen, ihren gesamten Kohlenstoff und ihre Energie aus aromatischen Kohlenwasserstoffen zu gewinnen. Nach der Spaltung durch Protocatechuat 3,4-Dioxygenase werden aromatische zyklische Strukturen geöffnet und linear strukturierte Kohlenwasserstoffe produziert. Das Produkt tritt nach einer Reihe von Katalyseschritten in den Zitronensäurezyklus ein. Durch diese Gruppe von Enzymen werden komplizierte chemische Verbindungen in einfache Moleküle abgebaut, die für die zentrale Metabolismusnutzung zur Energiegewinnung leicht verwendbar sind, was für die vollständige Nutzung jeder Substanz zur Aufrechterhaltung des Lebens der Organismen von entscheidender Bedeutung ist. Protocatechuat 3,4-Dioxygenase trägt auch zum Umweltschutz bei. Aufgrund des breiten Spektrums an Enzymtypen können diese Enzyme in der Bioremediation von kontaminiertem Grundwasser oder Boden, der mit verschiedenen aromatischen Verbindungen belastet ist, eingesetzt werden. Aufgrund der vielversprechenden Fähigkeit zur Schadstoffreinigung werden die Reinigung und die Substratspezifität des Enzyms von vielen Studien angestrebt. Einerseits beschleunigen gereinigte Enzyme mit hoher Katalyseaktivität den Reinigungszyklus; andererseits ermöglicht eine breite Substratspezifität Anwendungen in variableren Umgebungen. Creative Enzymes bietet geeignete Assays, die sich auf dieses Enzym konzentrieren und die zuverlässigsten spektrophotometrischen Analysen verwenden.

Abbildung: Die Struktur der Protocatechuat 3,4-Dioxygenase, die mit 3-Hydroxybenzoat komplexiert ist.
Referenz: Orville, A.M. et al. Biochemistry 1997 36: 10039-10051.

Creative Enzymes hat sich der Bereitstellung der besten Enzymaktivitätsassays verschrieben. Wir verfügen über die fortschrittlichste Ausrüstung und professionelle Teams, die genaue Testergebnisse liefern. Die Mehrheit der Kunden ist mit den hochwertigen und schnellen Dienstleistungen sehr zufrieden. Creative Enzymes wird auch in Zukunft die hervorragende Unterstützung für Ihre Forschung fortsetzen.