Messung der Enzymaktivität der Formaldehyddehydrogenase

Creative Enzymes ist auf die Messung von Enzymaktivitäten spezialisiert. Wir sind stolz darauf, weltweit als eine der professionellsten Forschungseinrichtungen für Enzymaktivitäts-Assays am Markt zu gelten. Creative Enzymes verfolgt konsequent das Ziel einer erstklassigen Kundenbetreuung sowie höchster Servicequalität, wodurch wir gegenüber Wettbewerbern als bevorzugter Anbieter wahrgenommen werden.

Formaldehyd-Dehydrogenase (EC 1.2.1.46) ist ein NAD⁺-abhängiges Enzym, das die Oxidation von Formaldehyd zu Formiat katalysiert, ohne dass exogen Glutathion zugesetzt werden muss. Dieses Enzym gehört zur Familie der zinkhaltigen, mittelkettenlangen Alkoholdehydrogenasen (ADH), einer Untergruppe der MDR-Enzyme. Es kann aus humanen sowie bakteriellen Zellen, z. B. Ogataea angusta, Methylococcus capsulatus und Pseudomonas putida, isoliert und charakterisiert werden. Die Formaldehyd-Dehydrogenase aus P. putida ist unter den verfügbaren Quellen am umfassendsten untersucht. Sie weist eine homotetramere Architektur auf, bestehend aus 398 Aminosäuren pro Untereinheit, mit einer Gesamtmolekülmasse von 170 kDa. Jede Untereinheit enthält sieben Cysteinreste und zwei Zinkionen, darunter ein katalytisches und ein strukturelles Zink. Der systematische Name dieser Enzymklasse lautet Formaldehyd:NAD⁺-Oxidoreduktase; sie wird auch als NAD⁺-gekoppelte Formaldehyd-Dehydrogenase bzw. NAD⁺-abhängige Formaldehyd-Dehydrogenase bezeichnet.

Formaldehyd-Dehydrogenase spielt eine entscheidende Rolle in zahlreichen biologischen Stoffwechselwegen, darunter der Abbau von Chloroalkanen und Chloroalkenen, der Methanstoffwechsel sowie der mikrobielle Stoffwechsel in unterschiedlichen Umweltbedingungen. Die durch Formaldehyd-Dehydrogenase katalysierte Reaktion ist ein zentraler Bestandteil des Methanstoffwechsels. Formaldehyd, das Substrat dieser Reaktion, ist eine hochtoxische Verbindung; die molekulare Detoxifikation stellt daher für die meisten Lebensformen eine wesentliche biochemische Notwendigkeit dar. Viele Organismen haben mehrere Oxidationssysteme entwickelt, um dieser Verbindung entgegenzuwirken. Bei methylotrophen Bakterien ist Formaldehyd nicht nur toxisch, sondern zugleich ein zentrales Zwischenprodukt. Auch Formiat, das andere Substrat der Formaldehyd-Dehydrogenase, ist eine toxische Verbindung. Daraus lässt sich schließen, dass Formaldehyd-Dehydrogenase aufgrund ihrer Fähigkeit, diese beiden toxischen Verbindungen abzubauen, für viele Organismen ein essenzielles Enzym in zahlreichen Stoffwechselwegen darstellt. Allerdings sind spektrophotometriebasierte Aktivitäts-Assays für dieses Enzym bislang nicht umfassend etabliert. Creative Enzymes kann dank langjähriger Erfahrung in der Entwicklung von Enzymassays präzise Aktivitätsbestimmungen für dieses Enzym bereitstellen, indem die Bildung von NADH mittels spektrophotometrischer Quantifizierung bei 340 nm verfolgt wird. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihre beste Wahl – mit dem Anspruch, ein Höchstmaß an Kundenzufriedenheit zu erreichen und Produkte, Dienstleistungen sowie das Qualitätsmanagementsystem kontinuierlich zu verbessern.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Formaldehyd-Dehydrogenase aus Pseudomonas putida.
PDB: 1KOL