Enzymaktivitätsmessung für Formiatdehydrogenase (NAD+)

Creative Enzymes bedient die Enzymindustrie mit zuverlässigen spektrophotometrischen Aktivitätsassays für Formiatdehydrogenase. Wir sind ein führendes Unternehmen im Bereich der Enzymdienstleistungen und spezialisiert auf maßgeschneiderte Enzymaktivitätsmessungen. Um die hohe Qualität unseres Services sicherzustellen, widmet sich unser Personal stets der Entdeckung und Entwicklung innovativer Enzymaktivitätstests.

Formiatdehydrogenase (EC 1.2.1.2; FDH) ist ein NAD⁺-abhängiges Enzym, das das Formiat-Ion zu Kohlendioxid mit der gekoppelten Reduktion von NAD⁺ zu NADH katalysiert. Dies ist die letzte Reaktion im linearen Oxidationsweg für die Methanol-Dissimilation in methanotrophen Hefen. Formiatdehydrogenase besteht aus zwei identischen Untereinheiten, die keine Metallionen oder prosthetischen Gruppen enthalten und keine Ein-Elektron-Träger als Oxidationsmittel verwenden kann. Das Enzym ist hochspezifisch sowohl für NAD⁺ als auch für Formiat. NAD⁺-abhängige Formiatdehydrogenase wurde in allen methanolverwertenden Hefen der Gattungen Candida, Pichia und Hansenula gefunden und aus verschiedenen Stämmen isoliert und charakterisiert. Dieses Enzym ist jedoch nicht so weit verbreitet in Bakterien. Dieses Enzym gehört zur Superfamilie der D-spezifischen 2-Hydroxy-Säure-Dehydrogenasen. Der katalytische Mechanismus dieses Enzyms wird durch einen Transfer des Hydridions vom Substrat auf die C-4-Position der Nikotinamidgruppe von NAD⁺ ohne Stufen der Säure-Base-Katalyse spezifiziert, die in Reaktionen vorhanden sind, die von anderen verwandten Dehydrogenasen katalysiert werden. Daher wird Formiatdehydrogenase allgemein als Modellenzym für Studien zum Mechanismus des Hydridiontransfers im aktiven Zentrum von Dehydrogenasen akzeptiert. Darüber hinaus hat dieses Enzym viele alternative Namen, darunter die folgenden:

• formiat-NAD⁺-Oxidoreduktase;
• FDH I;
• FDH II;
• N-FDH;
• formic hydrogen-lyase;
• formate hydrogenlyase;
• hydrogenlyase;
• NAD⁺-verknüpfte Formiatdehydrogenase;
• NAD⁺-abhängige Formiatdehydrogenase;
• formiatdehydrogenase (NAD⁺);
• NAD⁺-Formiatdehydrogenase;
• formiat-benzyl-viologen-Oxidoreduktase;
• formic acid dehydrogenase.

Außerdem wird Formiatdehydrogenase auch zur Regeneration von NADH in enzymatischen Synthesen von optisch aktiven Verbindungen mit Dehydrogenasen verwendet. Aufgrund der Irreversibilität und des breiten pH-Optimums der Reaktion, die von Formiatdehydrogenase katalysiert wird, wird dieses Enzym zu einem vielseitigen Biokatalysator, der für viele Prozesse effizient ist. Aufgrund des großen Potenzials von Formiatdehydrogenase in der Biotechnologie und pharmazeutischen Chemie wird der Enzymaktivitätsassay dieses Enzyms seit langem gewünscht. Dennoch ist ein standardisierter und effizienter Aktivitätsassay nicht verfügbar geworden. Daher hat Creative Enzymes die zuverlässigen Aktivitätsassays der Formiatdehydrogenase entwickelt. Selbst für komplizierte Forschungszwecke können wir helfen, die enzymatische Aktivität der Formiatdehydrogenase schnell und genau zu bestimmen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der NAD⁺-abhängigen Formiatdehydrogenase von Pseudomonas sp.101 im Komplex mit Formiat.
PDB: 2GUG