Messung der Enzymaktivität der L‑Glutamatoxidase

Creative Enzymes hat sich als weltweit führender Anbieter in der Entwicklung von Enzymaktivitätsassays etabliert. Wir bieten Dienstleistungen zur Messung der Enzymaktivität in höchster Qualität, die den branchenüblichen Standard übertreffen. Die professionellen Abläufe und fortschrittlichen Technologien von Creative Enzymes unterstützen Forschende bei vielfältigen Aktivitätsassays für Oxidoreduktasen, einschließlich der L‑Glutamatoxidase.

L‑Glutamatoxidase (EC 1.4.3.11) ist ein Enzym, das die oxidative Desaminierung der α‑Aminogruppe von L‑Glutamat zu 2‑Ketoglutarat katalysiert, verbunden mit der Reduktion von molekularem Sauerstoff und Wasser zu Ammoniak und Wasserstoffperoxid. Dieses Enzym wurde ursprünglich aus einem wässrigen Extrakt einer Weizenkleiekultur von Streptomyces sp. X‑119‑6 gewonnen; später wurden mehrere Varianten dieses Enzyms innerhalb der Gattung Streptomyces identifiziert. L‑Glutamatoxidase gehört zur allgemeinen Familie der Oxidoreduktasen, die die CH‑OH‑Gruppe des Substrats umsetzen und NAD⁺ oder NADP⁺ als Kofaktor verwenden. Der systematische Name dieser Enzymklasse lautet L‑Glutamat:Sauerstoff‑Oxidoreduktase (desaminierend); sie wird auch als Glutamat(‑Akzeptor)‑Dehydrogenase, Glutamatoxidase, Glutaminsäureoxidase, Glutaminsäure‑Dehydrogenase (Akzeptor) oder L‑Glutaminsäureoxidase bezeichnet.

L‑Glutamat, das Substrat der von der L‑Glutamatoxidase katalysierten Reaktion, besitzt eine geschmacksverstärkende Wirkung, die das „Umami“-Empfinden erzeugt; das Mononatriumsalz von L‑Glutamat wird широко als Würzmittel beim Kochen sowie als Lebensmittelzusatzstoff eingesetzt. Darüber hinaus ist L‑Glutamat der wichtigste exzitatorische Neurotransmitter im Gehirn. Zudem kann eine übermäßige Freisetzung dieser Aminosäure eine zentrale Rolle beim neuronalen Zelltod im Zusammenhang mit verschiedenen neurologischen Erkrankungen spielen. Daher kommt L‑Glutamat sowohl in der Lebensmittelproduktion als auch in der klinischen Biochemie eine wichtige Bedeutung zu – ebenso der L‑Glutamatoxidase.

Aufgrund der hohen Substratspezifität und hohen Stabilität der L‑Glutamatoxidase aus Streptomyces sp. X‑119‑6 ist sie als kommerziell verfügbares Enzym etabliert und wird als Biosensor eingesetzt. Ein weiteres charakteristisches Merkmal der L‑Glutamatoxidase aus Streptomyces sp. X‑119‑6 ist ihre hexamere Struktur, bestehend aus zwei α‑Ketten, zwei β‑Ketten und zwei γ‑Ketten mit Untereinheits‑Molekulargewichten von jeweils etwa 44 kDa, 19 kDa bzw. 9 kDa.

Abbildung: Die Kristallstruktur der L‑Glutamatoxidase aus Streptomyces sp. X‑119‑6.
PDB: 2E1M

Trotz der großen Bedeutung der L‑Glutamatoxidase ist die Aktivitätsmessung dieses Enzyms mittels spektrophotometrischer Assays bislang nicht umfassend etabliert, obwohl zuvor andere Methoden beschrieben wurden. Der spektrophotometrische Assay gilt als zuverlässige und kosteneffiziente Methode zur Quantifizierung der Aktivität. Creative Enzymes bietet daher mit Stolz einen präzisen Aktivitätsassay für L‑Glutamatoxidase an, basierend auf unserer umfangreichen Erfahrung in der Charakterisierung des Enzyms und der methodischen Optimierung. Unsere Produkte gelten als besonders zuverlässig und praxiserprobt, was sich in einer hohen Wiederkaufsrate widerspiegelt. Unser Anspruch an höchste Qualität und einen einzigartigen Service wird nur von unserem exzellenten Ruf auf dem globalen Markt übertroffen.