Enzymaktivitätsmessung für L-Lysin-Oxidase

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L-Lysin-Oxidase (EC 1.4.3.14) ist ein Flavoenzym, das die irreversible oxidative Deaminierung von L-Lysin zu α-Keto-ε-Aminocapronat katalysiert, wobei Ammoniak und Wasserstoffperoxid produziert werden. Dieses Enzym wurde ursprünglich aus Trichoderma viride Y 244-2 isoliert und später auch in Trichoderma harzianum Rifai und einigen anderen marinen Organismen, wie dem Steinbarsch Sebastes schlegelii. Die meisten L-Aminosäure-Oxidasen zeigen ein breites Spektrum an Substratspezifität, jedoch nicht für L-Lysin. Dies ist jedoch nicht der Fall für L-Lysin-Oxidase aus T. viride, die eine sehr hohe Substratspezifität für L-Lysin aufweist. Dieses Enzym ist über einen breiten pH- und Temperaturbereich stabil, obwohl die prosthetische Flavin-Gruppe unter sauren Bedingungen vom Enzym freigesetzt werden könnte. L-Lysin-Oxidase gehört zur allgemeinen Oxidoreduktase-Familie, die die CH-OH-Gruppe des Substrats katalysiert und NAD⁺ oder NADP⁺ als Cofaktor verwendet. Der systematische Name dieser Enzymklasse ist L-Lysin: Sauerstoff 2-Oxidoreduktase (deaminierend), die auch als L-Lysin α-Oxidase oder L-Lysyl-α-Oxidase bekannt ist. L-Lysin-Oxidase aus T. viride ist ein homodimeres Protein mit einer scheinbaren Molekülmasse von 112 kDa. Die molekularen Mechanismen der enzymatischen Reaktion und die ungewöhnlich hohe Substratspezifität sind jedoch nicht gut erforscht.

L-Lysin-Oxidase aus T. viride ist in der Lebensmittelindustrie oder im Fermentationsprozess als enzymbasierter Aminosäuresensor zur quantitativen Messung der L-Lysin-Konzentration nützlich. Darüber hinaus hat das Enzym eine starke antitumorale Aktivität und wird daher als potenzieller Wirkstoff gegen Krebs angesehen. Darüber hinaus spielt L-Lysin-Oxidase eine entscheidende Rolle bei der Biosynthese vieler wertvoller Produkte, einschließlich Tropan, Piperidin und Pyridin-Alkaloid.

Abbildung: Die Kristallstruktur der L-Lysin-Oxidase aus T. viride.
PDB: 3X0V

Aufgrund der vielfältigen und kritischen Funktionen, die von L-Lysin-Oxidase ausgeführt werden, sollte ein detaillierteres Wissen über dieses Enzym gewonnen werden, insbesondere durch die Quantifizierung der katalytischen Aktivität. Aufgrund der unerforschten Arbeitsmechanismen dieses Enzyms scheint der Aktivitätsassay der L-Lysin-Oxidase jedoch schwierig und multiplex zu sein. Glücklicherweise ist Creative Enzymes der erfahrenste Hersteller, der sich auf die Entwicklung von Enzymaktivitätsassays spezialisiert hat, unterstützt durch führende Techniken, den besten Kundenservice und einen engagierten Ansatz. Unabhängig von den Herausforderungen, die Ihrem Weg zu Enzymanwendungen im Wege stehen könnten, wird Creative Enzymes immer die Anforderungen für die nächste Entwicklungsstufe erfüllen und Ihre beste Wahl für zufriedenstellende Dienstleistungen sein.