Messung der Enzymaktivität der NADH-Peroxidase

Die stringenten Ansätze zur präzisen Messung der Enzymaktivität unterscheiden Creative Enzymes von unseren Wettbewerbern. Wir haben Tausenden von Kunden erstklassige Aktivitätsmessungen bereitgestellt und führen weiterhin hochwertige Dienstleistungen mit modernster Instrumentierung durch. Wir verfügen über umfassende Erfahrung in der Prüfung von Oxidoreduktasen, wie z. B. der NADH-Peroxidase, deren Aktivität mittels präziser spektrophotometrischer Assays bestimmt wird.

NADH-Peroxidase (EC 1.11.1.1) ist ein Flavoenzym, das NADH nutzt, um die Reduktion von Wasserstoffperoxid zu Wasser zu katalysieren, wobei FAD als Kofaktor dient. Dieses Enzym gehört zur Familie der Oxidoreduktasen, insbesondere zu jenen, die Peroxide als Akzeptoren verwenden. NADH-Peroxidase wurde ursprünglich von Dolin identifiziert und anschließend in prokaryotischen Mikroorganismen wie Lactobacillus casei sowie in einigen Pflanzen, z. B. Hordeum vulgare, nachgewiesen.

Der oxidative Burst ist einer der wesentlichen Mechanismen, mit denen Phagozyten des Wirts pathogene Bakterien abtöten. Daher kann eine effiziente oxidative Stressantwort, die auf eine Stärkung der zellulären antioxidativen Abwehr abzielt, für das Überleben von Bakterien entscheidend sein. NADH-Peroxidase kann unter aeroben Wachstumsbedingungen potenziell gegen exogen zugeführtes Wasserstoffperoxid schützen, indem sie dieses zu Wasser umsetzt und dadurch oxidativen Stress reduziert. Diese enzymatische Schutzfunktion steht erstens zur Abwehr einer H₂O₂-vermittelten Desinfektion zur Verfügung. Zweitens stellt die Präsenz dieses Enzyms einen zusätzlichen Mechanismus zur Regeneration von NAD⁺ bereit, das für den Stoffwechsel essenziell und für Fermentationsprozesse von zentraler Bedeutung ist. In einigen Spezies trägt dieses Enzym zudem zur bakteriellen Virulenz bei. So ist Enterococcus faecalis mit ausgeprägter NADH-Peroxidase-Aktivität ausgestattet und kann bei hospitalisierten Patienten mit langandauernder Antibiotikatherapie, schweren Grunderkrankungen und beeinträchtigtem Immunsystem als Pathogen auftreten. Obwohl Kristallstrukturen aus einigen gramnegativen Bakterien berichtet wurden, sind die Funktionen des Enzyms bislang nicht vollständig verstanden. Daher werden vertiefende Studien fortgeführt, um Mechanismus und Struktur des Enzyms weiter aufzuklären. Derzeit bieten nur wenige Unternehmen Aktivitätsmessungen für NADH-Peroxidase an. Das Fehlen zuverlässiger, skalierbarer Quantifizierungsmethoden würde den Fortschritt weiterer Studien verlangsamen. Creative Enzymes wird die treibende Kraft bei der Industrialisierung präziser Enzymassays für dieses Enzym sein und Ihre Forschung dadurch wirksam unterstützen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der NADH-Peroxidase mit Cystein-Sulfensäure.
Referenz: Yeh, J.I. et al. Biochemistry 1996 35: 9951-9957.

Creative Enzymes hat sich der Bereitstellung wegweisender Dienstleistungen zur Messung der Enzymaktivität verschrieben, die aufgrund ihrer hohen Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit sehr geschätzt werden. Creative Enzymes verfügt über einen führenden Marktanteil im Bereich enzymatischer Assay-Services. Wir freuen uns darauf, künftig noch mehr Forschende mit einer vertrauenswürdigen Servicequalität zu unterstützen.