Messung der Enzymaktivität für Peroxidase

Creative Enzymes ist das führende Unternehmen im Bereich der Enzymaktivitätsassays und bekannt dafür, höchste Kundenzufriedenheit zu gewährleisten. Unser Team aus exzellenten Wissenschaftlerinnen und Wissenschaftlern arbeitet seit vielen Jahren an Enzymaktivitätsassays. Wir sind stolz darauf, hier den Assay zur Bestimmung der katalytischen Aktivität von Peroxidase anzubieten. Der besondere Vorteil unserer spektrophotometrischen Analyse ermöglicht es uns, den Wettbewerb zu übertreffen und die Zuverlässigkeit der Testergebnisse sicherzustellen.

Peroxidasen (EC 1.11.1.7) sind eine große Familie ubiquitärer, oxidativer, hämhaltiger Enzyme, die aus Pflanzen, Bakterien und Pilzen sowie aus Säugerquellen isoliert werden können. Peroxidasen gehören zu einer Familie von Glykoproteinen, die Eisenatome als prosthetische Gruppe sowie unterschiedliche Mengen an Kohlenhydratresten enthalten. Peroxidasen sind an zahlreichen biologischen Prozessen beteiligt, darunter Zellwandsynthese und -abbau, Stressantwort, Signalübertragung bei oxidativem Stress sowie die Eliminierung von Xenobiotika.

Abbildung 1: Von Peroxidase katalysierte Reaktionen.
Referenz: Berglund G I et al. Nature, 2002, 417(6887): 463-468.

Hämhaltige Redoxenzyme sind an einer bemerkenswert vielfältigen Bandbreite chemischer Reaktionen beteiligt; dennoch umfassen alle von diesen Enzymen katalysierten biologischen Oxidationsreaktionen sehr ähnliche Intermediate in hohen Oxidationsstufen, deren Reaktivität durch die Proteinumgebung moduliert wird. Die wichtigste Gesamtreaktion, die von Peroxidasen katalysiert wird, lässt sich wie folgt zusammenfassen: H₂O₂ + 2RH → 2H₂O + 2R (wobei RH für ein reduzierendes Substrat steht und R ein freies Radikal als Produkt ist). Diese Reaktion umfasst mehrere Schritte mit zwei stark oxidierten Häm-Intermediaten, Verbindung I (Compound I) und Verbindung II (Compound II) (Abbildung 1). Darüber hinaus können Peroxidasen Wasserstoffperoxid auch zu Wasser und Disauerstoff umsetzen (2H₂O₂ → 2H₂O + O₂). Dies entspricht der katalaseähnlichen Aktivität des Enzyms; im Gegensatz zu echten Katalasen ist die Reaktionsgeschwindigkeit dieser Umsetzung bei Peroxidasen jedoch gering. Die Peroxidaseaktivität kann durch niedermolekulare Liganden beeinflusst werden, darunter Kohlenmonoxid, Cyanid, Azid und Fluorid sowie Formiat und Acetat. Sowohl Acetat als auch Formiat binden an ferrische Meerrettichperoxidase, wobei Formiat stärker bindet als Acetat.

Zusätzlich spielen Peroxidasen auch eine wichtige Rolle in Umwelt, Landwirtschaft und der verarbeitenden Industrie. So können Peroxidasen beispielsweise zur Behandlung industrieller Abwässer eingesetzt werden; zudem finden sie Anwendung in zahlreichen Herstellungsprozessen (z. B. als Klebstoffe für Auskleidungen von Fässern, Dosen und Fahrzeugteilen). Darüber hinaus können Peroxidasen zur Polymerisation von Anilinen und Phenolen in organischen Lösungsmittelmatrizes verwendet werden. Aufgrund ihres hohen Nutzwerts sollten daher detailliertere Informationen über Peroxidasen gewonnen werden. Allerdings ist der Enzymaktivitätsassay für dieses Enzym bislang nicht umfassend etabliert, vermutlich aufgrund der komplexen Chemie der enzymatischen Reaktion und der Aktivitätsregulation durch niedermolekulare Liganden. Creative Enzymes ist mit führender Technologie, modernster Laborausstattung und erfahrenen technischen Expertinnen und Experten ausgestattet und sichert unseren Kundinnen und Kunden zu, die präzisesten Testergebnisse für die Aktivitätsquantifizierung von Peroxidasen bereitzustellen. Creative Enzymes freut sich jederzeit auf eine Zusammenarbeit mit Ihnen!

Abbildung 2: Die Kristallstruktur der ferrischen Meerrettichperoxidase C1A aus Armoracia rusticana.
PDB: 1W4W