Messung der Enzymaktivität für Phospholipase A1

Creative Enzymes hat sich zum Ziel gesetzt, der zuverlässigste Dienstleister im Bereich enzymatischer Assays zu sein. Wir sind für unsere hohe Kundenzufriedenheit weithin bekannt. Unser schneller Service, exzellente Kundenbetreuung und engagierte Ressourcen haben uns zu einem bevorzugten Anbieter auf dem globalen Markt gemacht. Creative Enzymes bietet Ihnen hiermit einen präzisen enzymatischen Assay für Phospholipase A1 an.

Phospholipase A1 (EC 3.1.1.32; Phosphatidylcholin-1-Acylhydrolase; PLA₁) ist ein Enzym, das Esterbindungen von Phospholipiden an der sn-1-Position hydrolysiert und dabei 2-Acyl-Lysophospholipide sowie freie Fettsäuren (FFAs) bildet. Sowohl Phospholipase A1 als auch Phospholipase A2 (EC 3.1.1.4; Phosphatidylcholin-2-Acylhydrolase; PLA₂) spalten Glycerophospholipide in Lysophospholipide und freie Fettsäuren. Die Einteilung in PLA₁ bzw. PLA₂ erfolgt danach, ob die Spaltung an der sn-1- bzw. sn-2-Position der Phospholipide stattfindet. PLA₁-Aktivitäten wurden in zahlreichen Zellen und Geweben verschiedener Organismen nachgewiesen, z. B. in Ratten-Thrombozyten, Rinderhirn, Hoden, Hornissengift, Bonito-Muskel und Pilzen. In jüngerer Zeit wurden mehrere PLA₁-Isoenzyme identifiziert, und es wurden umfangreiche Erkenntnisse zur Struktur und molekularen Funktion von PLA₁ gewonnen. Derzeit sind bei Säugetieren neun PLA1-Enzyme bekannt; sechs sind extrazelluläre Enzyme, die übrigen drei intrazelluläre Enzyme. Intrazelluläre und extrazelluläre PLA₁ weisen keine Sequenzhomologien auf und erfüllen offenbar unterschiedliche Funktionen. Einige PLA₁ besitzen eine breite Substratspezifität und hydrolysieren neben Phospholipiden auch Triacylglycerole (TG) sowie Galactolipide. Im Gegensatz dazu zeigen andere PLA₁, wie die phosphatidylserin(PS)-spezifische PLA₁ (PS-PLA₁), die membranassoziierte phosphatidinsäure(PA)-selektive PLA₁α (mPA-PLA₁α) sowie mPA-PLA1β, eine strikte Substratspezifität und wirken spezifisch auf PS bzw. PA. Diese PLA₁ könnten eine spezifische Rolle bei der Bildung bioaktiver Lysophospholipide wie Lysophosphatidylserin (LPS) und Lysophosphatidsäure (LPA) spielen. Alle extrazellulären PLA₁-Moleküle gehören zur Genfamilie der pankreatischen Lipasen.

Abbildung 1: Katalytische Reaktionen und Produkte von PLA₁ und PLA₂.
Referenz: Murayama K, Kano K, Matsumoto Y, et al. Journal of structural biology, 2013, 182(2): 192-196.

Funktionell spielen PLA₁ eine Schlüsselrolle in Medizin, Ernährung sowie in der pharmazeutischen und Lebensmittelindustrie. So stellt rekombinante PLA₁ beispielsweise einen geeigneten Kandidaten für die Immuntherapie gegen Wespengift dar. Darüber hinaus verbessert PLA₁ die Schaumstabilität und -eigenschaften von Magermilch und Molke, was darauf hindeutet, dass PLA₁ ein nützliches Werkzeug zur Modifizierung der Funktionalität von Milchprodukten und -zutaten sein kann. Kürzlich wurde PLA₁ als potenzielles Verarbeitungshilfsmittel in der Käseherstellung beschrieben, und es wurde sowohl im Pilotmaßstab als auch im industriellen Maßstab eine signifikante Steigerung der Käseausbeute berichtet. Insgesamt zeigt sich, dass PLA₁ ein kritischer Bestandteil vieler Prozesse ist; daher werden in naher Zukunft detailliertere Untersuchungen dieser Enzyme beginnen, die auf geeigneten enzymatischen Assays basieren.

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen für hochwertige bioanalytische Dienstleistungen und Auftragsforschung (Contract Research) mit Spezialisierung auf Enzymaktivitätsanalysen für Kunden aus der pharmazeutischen, biotechnologischen und Umweltindustrie. Wir sind vollständig darauf vorbereitet, präzise Aktivitätsassays für PLA₁ anzubieten. Die Aktivitäten von PLA₁ werden mittels fluorometrischer Assays bestimmt. Unsere Testergebnisse gelten als besonders zuverlässig und sind auf dem globalen Markt etabliert. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihre beste Wahl bei der Entwicklung von Produkten, die PLA₁ enthalten.

Abbildung 2: Bänderdarstellung der PLA₁-Struktur aus Streptomyces albidoflavus NA297. Sekundärstrukturelemente sind blau (Helices) und rosa (Stränge) eingefärbt; Aminosäurereste im aktiven Zentrum sind als Stabmodelle dargestellt.
Referenz: Murayama K, Kano K, Matsumoto Y, et al. Journal of structural biology, 2013, 182(2): 192-196.