Messung der Enzymaktivität der Triacylglycerol-Lipase

Creative Enzymes zeichnet sich durch exzellente Prüfleistungen bei der Bestimmung der Hydrolase-Aktivität aus. Auf Basis fundierter enzymologischer Expertise entwickeln unsere Fachspezialisten die jeweils am besten geeignete Methode zur Aktivitätsbestimmung der Triacylglycerol-Lipase, um unterschiedlichen Anforderungen gerecht zu werden. Die Ergebnisse werden mittels moderner Chromatographie ermittelt, wodurch Präzision und Richtigkeit sichergestellt werden.

Triacylglycerol-Lipase (EC 3.1.1.3) spielt eine Schlüsselrolle bei der intestinalen Resorption von Nahrungsfetten. Dieses Enzym wandelt unlösliche langkettige Triacylglycerole in Diacylglycerole und Carboxylate um. Die kleineren und polareren Produktmoleküle können in Mischung mit Gallensalzen die Membran der Enterozyten passieren. Kristallstrukturen humaner Lipasen zeigen, dass die Polypeptidkette in zwei Domänen mit spezifischen Funktionen gegliedert ist. Die N-terminale Domäne enthält die katalytische Triade und ist für die Hydrolyse von Triglyceriden verantwortlich, während die C-terminale Domäne an der Bindung von Colipase beteiligt ist.

Neben ihrer Funktion bei der Triglyceridverdauung durch Lipidemulgierung und intestinaler Fettresorption verfügt die Triacylglycerol-Lipase über vielfältige Anwendungen. In der Biotechnologie kann das Enzym zur Hydrolyse und Synthese verschiedener Ester, zur mutagenen Modifikation sowie zur Optimierung von Eigenschaften eingesetzt werden. In der Biokraftstoffproduktion wirkt dieses Enzym auf entschleimtes Sojaöl und synthetisiert lipasebasierten Biodiesel. In der Lebensmittelindustrie trägt es zur Verbesserung der Textur, zur Aromamodifikation und zur Herstellung von Fettsäuren bei. Triacylglycerol-Lipase kann zudem zur Entfernung von Fettflecken unter den Bedingungen moderner Maschinenwäsche und in alkalischer Umgebung eingesetzt werden. Die breite Anwendbarkeit dieses Enzyms führt zu einer zunehmenden Zahl einschlägiger Studien. Da es jedoch ausschließlich an einer Ester-Wasser-Grenzfläche wirkt, werden häufig Ionen, Salze und Tenside eingesetzt, um die enzymatische Reaktion zu erleichtern und das Enzym zu stabilisieren. Dadurch können bei der Prüfung der Enzymaktivität Interferenzen durch zahlreiche Bestandteile des Reaktionsgemisches auftreten. Unter umfassender Berücksichtigung der Einflüsse verschiedener Faktoren wählt Creative Enzymes die am besten geeignete Methode zur Aktivitätsquantifizierung mittels chromatographischer Assays.

Abbildung: Kristallstruktur des Pankreaslipase-Colipase-Komplexes.
Referenz: van Tilbeurgh, H. et al. Nature 1992 359: 159-162.

Der chromatographische Assay ist die zuverlässigste Methode zur präzisen Quantifizierung der Enzymaktivität. Dank der erfahrenen Enzymologen sowie der modernen Ausstattung von Creative Enzymes zeichnen sich die Ergebnisse durch hohe Reproduzierbarkeit und geringe Variabilität aus. Auch künftig wird Creative Enzymes Ihre Forschung als starker Partner unterstützen.