Mit jahrelanger Erfahrung in der Entwicklung und Durchführung enzymologischer Assays hat sich Creative Enzymes als weltweit führender Anbieter von Enzymaktivitätsassays etabliert. Als zuverlässiger Dienstleister haben unsere technischen Enzymexpert:innen die am besten geeigneten Assay-Methoden für nahezu jede Enzymanwendung entwickelt. Ausgestattet mit modernster spektrophotometrischer Instrumentierung gewährleisten wir die professionelle und termingerechte Durchführung Ihrer Projekte. Wir freuen uns, Ihnen hier präzise Enzymassays für Acetylxylanesterasen anbieten zu können.

Acetylxylanesterasen (EC 3.1.1.72; AXEs) sind Enzyme, die die Esterbindungen der Acetylgruppen an Position 2 und/oder 3 der Xyloseeinheiten natürlicher acetylierter Xylanfragmente hydrolysieren. Solche Acetylestergruppen kommen häufig in Harthölzern, Getreide und anderen einjährigen Pflanzen vor. Auf Grundlage von Sequenzähnlichkeiten und Tertiärstrukturen wurden Acetylxylanesterasen in sieben Carbohydratesterase-(CE)-Familien, CE1–CE7, klassifiziert. Acetylxylanesterasen zeigen zudem Aktivität gegenüber einem breiten Spektrum acetylierter Verbindungen wie Xylose-Tetraacetat, Glucose-Pentaacetat sowie p-Nitrophenylacetat, α-Naphthylacetat, 7-Aminocephalosporansäure (7-ACA) und Cephalosporin C (Abbildung 1B). Diese multifunktionelle Deacetylase-Aktivität ist ein gemeinsames Merkmal der bislang identifizierten oligomeren α/β-Hydrolasen der CE7-Familie. Zu beachten ist, dass für die vollständige Biodegradation natürlichen acetylierter Xylane neben Acetylxylanesterasen das Zusammenwirken weiterer Enzyme erforderlich ist.

Abbildung 1: Von der CE7-Esterase-Familie katalysierte Reaktionen: (A) Deacetylierung kurzer Xylooligosaccharide; (B) Deacetylierung von Cephalosporin C.
Referenz: Krastanova I, Guarnaccia C, Zahariev S, et al. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – Proteins and Proteomics, 2005, 1748(2): 222–230.

Acetylxylanesterasen wurden in einer Vielzahl von Mikroorganismen in der Natur nachgewiesen und von diesen produziert. Unter ihnen sind pilzliche Acetylxylanesterasen kommerziell am bedeutendsten, da sie eine hohe Aktivität, gute Stabilität und – bedingt durch die Vielfalt ihrer natürlichen Lebensräume – eine größere Substratdiversität aufweisen. In Pflanzen wurden Acetylxylanesterasen bislang nicht beschrieben, obwohl sie dort eine wichtige Rolle bei Wachstum und Alterung der Zellwand spielen könnten. Darüber hinaus können Acetylxylanesterasen in der Biokraftstoffproduktion sowie in der pharmazeutischen Industrie genutzt werden. Die breite Anwendung führt daher zu einer hohen Nachfrage nach der Überwachung der Aktivität von Acetylxylanesterasen.

Auf Basis zahlreicher Aktivitätsprüfungen verschiedenster Enzyme in den vergangenen Jahren ist Creative Enzymes qualifiziert, die zuverlässigsten enzymatischen Assays für Acetylxylanesterasen bereitzustellen. Die Aktivität von Acetylxylanesterasen wird spektrophotometrisch bestimmt, wobei entweder α-Naphthylacetat oder p-Nitrophenylacetat als Substrat eingesetzt wird. Eine Aktivitätseinheit ist definiert als die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 1 μmol α-Naphthol bzw. p-Nitrophenol pro Minute zu bilden. Bei Verwendung von α-Naphthylacetat als Substrat wird das freigesetzte α-Naphthol bei einer Wellenlänge von 560 nm mit einem hochmodernen Spektrophotometer bestimmt. Bei Verwendung von p-Nitrophenylacetat als Substrat wird das freigesetzte p-Nitrophenol bei einer Wellenlänge von 410 nm bestimmt. Die Ergebnisse unserer Tests werden durch unsere State-of-the-Art-Technologie mit hoher Genauigkeit abgesichert. Wir garantieren die Lieferung der Ergebnisse innerhalb des kürzestmöglichen Zeitraums ab Eingang der Bestellung. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihre beste Wahl für Aktivitätsmessungen, und wir sind überzeugt, dass wir künftig Ihr idealer Forschungspartner sein werden.

Abbildung 2: Die Kristallstruktur der Acetylxylanesterase aus Geobacillus stearothermophilus.
PDB: 4JHL