Messung der Enzymaktivität von Tyrosinase

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen, das hochwertige bioanalytische Dienstleistungen sowie auftragsbasierte Forschungsleistungen im Bereich der Enzymaktivitätsanalyse anbietet und damit die Anforderungen unserer Kunden aus der Biotechnologie- und Diagnostikbranche bedient. Ausgestattet mit modernsten spektrophotometrischen Instrumenten stellen wir sicher, dass die Prüfergebnisse unseren Kunden professionell und fristgerecht zur Verfügung gestellt werden. Wir sind stolz darauf, die zuverlässigste Aktivitätsmessung für Tyrosinase anbieten zu können.

Tyrosinase (EC 1.14.18.1; L-Tyrosin, L-Dopa: Sauerstoff-Oxidoreduktase) gehört zur Familie der Typ-III-Kupferproteine und besitzt ein katalytisches Zentrum mit dinuklearem Kupfer. In Gegenwart von molekularem Sauerstoff kann sie zwei aufeinanderfolgende Reaktionen katalysieren: die Hydroxylierung von Phenolen zu ortho-Diphenolen (Monophenolase-Aktivität) sowie die Oxidation von o-Diphenolen zu o-Chinonen (Diphenolase-Aktivität). Tyrosinase wird hauptsächlich für die Melaninbildung genutzt, die für die Hautpigmentierung sowie die Bräunung von Obst und Gemüse verantwortlich ist. Das Enzym kann zudem als Bestandteil der Wundheilung und der primären Immunantwort fungieren. Tyrosinase ist in nahezu allen Domänen des Lebens ubiquitär und an vielfältigen biologischen Funktionen beteiligt; die aktive Stelle dieses Enzyms ist zwischen den verschiedenen Spezies gut konserviert. Das aktive Zentrum wird typischerweise durch sechs konservierte Histidinreste gebildet, die zwei Kupferionen koordinieren, bezeichnet als CuA und CuB.

Tyrosinase besitzt ein großes Potenzial für die Herstellung verschiedener o-Diphenole (auch als substituierte Catechole bezeichnet), die wichtige Zwischenprodukte für die Synthese von Agrochemikalien, Aromastoffen, Polymerisationsinhibitoren und Antioxidanzien sind. Bei Säugetieren steht dieses Enzym im Zusammenhang mit Störungen der Hautpigmentierung, wie z. B. Fleckenbildung und Albinismus. Daher sind die Entwicklung und das Screening potenter Tyrosinase-Inhibitoren für die Kosmetikindustrie von besonderem Interesse. In der Lebensmittelindustrie wird die Hemmung der Tyrosinase routinemäßig eingesetzt, um die Oxidation phenolischer Verbindungen zu vermeiden und dadurch unerwünschte Geschmacks- und Farbveränderungen bei Früchten zu verhindern. Darüber hinaus findet Tyrosinase Anwendung in der Wundheilung, der Parasitenverkapselung und bei Insektiziden. Insgesamt ist Tyrosinase in vielerlei Hinsicht ein äußerst attraktives Enzym. Allerdings macht die duale Aktivität der Tyrosinase die Aktivitätsbestimmung anspruchsvoll, insbesondere im industriellen Maßstab. Creative Enzymes verfügt über die erforderliche Expertise zur Etablierung eines Aktivitätsassays für Tyrosinase, der bei 25 °C durchgeführt wird, indem die Absorptionsänderung bei 280 nm mittels spektrophotometrischer Messung verfolgt wird. Creative Enzymes ist Ihr verlässlicher Partner bei der Entwicklung sämtlicher Produkte, die Tyrosinase enthalten. Unsere Leidenschaft für hochwertige Dienstleistungen und Produkte wird nur von unserem exzellenten Ruf auf dem globalen Markt übertroffen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Tyrosinase aus Bacillus megaterium.
PDB: 3NM8