Messung der Enzymaktivität der Cyclohexanon-Monooxygenase

Unerreicht in der Branche bietet Creative Enzymes innovative, enzymbezogene Dienstleistungen mit einem professionellen Expertenteam und stellt führenden technischen Support sowie einen individuell zugeschnittenen Kundenservice bereit, der seinesgleichen sucht. Creative Enzymes ist die erfahrenste Einrichtung mit Spezialisierung auf Enzymaktivitätsassays, und wir sind stolz darauf, den Katalyseassay für Cyclohexanon-Monooxygenase anzubieten.

Cyclohexanon-Monooxygenase (EC 1.14.13.22; CHMO) ist ein bakterielles Flavoenzym, das die stereoselektive Baeyer–Villiger-Oxidation eines breiten Spektrums cyclischer Ketone zu Lactonen katalysiert. Es wurde erstmals aus Nocardia globerula CL1 und Acinetobacter sp. NCIMB 9871 gereinigt. Cyclohexanon-Monooxygenase ist eine monomere, FAD- und NADPH-abhängige Oxidoreduktase; die Molekülmasse dieses Enzyms beträgt etwa 59 kDa. Neben seinem physiologischen Substrat kann Cyclohexanon-Monooxygenase auch verschiedene cyclische Ketone (vier- bis achtgliedrige Ringe), aromatische Aldehyde sowie heteroatomhaltige Verbindungen oxygenieren. Aufgrund ihrer breiten Substrattoleranz und hohen Enantioselektivität ist dieses Enzym ein potenziell nützlicher industrieller Katalysator; die Möglichkeit, Cyclohexanon-Monooxygenase in der synthetischen Chemie zur Herstellung chiraler Synthone einzusetzen, hat großes Interesse geweckt.

Seit vielen Jahren wird die Baeyer–Villiger-Oxidation (BVO) zur Synthese von Estern und Lactonen aus Ketonen eingesetzt. Es wurde ein breites Spektrum synthetischer Anwendungen entwickelt, darunter die Herstellung von Polymeren, Duftstoffen, Arzneimitteln und anderen bioaktiven Molekülen. Cyclohexanon-Monooxygenase stellt eine Alternative zu konventionellen chemischen Katalysatoren dar, da sie den Einsatz gefährlicher Reagenzien wie organischer Peroxysäuren, chlorierter Lösungsmittel und Metalle vermeidet, die ansonsten bei chemischen Baeyer–Villiger-Reaktionen verwendet werden. Daher gewinnt Cyclohexanon-Monooxygenase für den Einsatz in biokatalytischen Prozessen zunehmend an Bedeutung. Um dieser steigenden Nachfrage gerecht zu werden, bietet Creative Enzymes Dienstleistungen zur Aktivitätsmessung sowohl für gereinigte native oder rekombinante Enzyme als auch für Zellextrakte, die dieses Enzym enthalten. Die Aktivität der Cyclohexanon-Monooxygenase wird routinemäßig bei 25 °C bestimmt, indem die NADPH-Oxidation bei 340 nm überwacht wird. Durch die enge Zusammenarbeit mit unseren Kunden war Creative Enzymes stets in der Lage, hochwertige Ergebnisse mit kürzester Durchlaufzeit bereitzustellen. Auch künftig wird Creative Enzymes Ihre Ziele mit unseren spezialisierten Dienstleistungen weiterhin wirkungsvoll unterstützen.

Abbildung: Die geschlossene Kristallstruktur der Cyclohexanon-Monooxygenase aus Rhodococcus sp. hi-31.
PDB: 3GWD