Messung der Enzymaktivität von Alkoholoxidase

Creative Enzymes hat bereits zahlreichen Fachkräften dabei geholfen, Enzymaktivitätsmessungen durch effiziente und präzise Dienstleistungen zu realisieren. Unsere Leidenschaft für höchste Qualität und einen einzigartigen Service wird nur von unserem exzellenten Ruf im Markt übertroffen. Unser erstklassiges Team optimiert kontinuierlich die Durchführung der Messung der Alkoholoxidase-Aktivität.

Alkoholoxidase (EC 1.1.3.13; AO) ist ein 600-kDa-homo-oktamers Enzym mit acht identischen Untereinheiten. Jede Untereinheit enthält ein stark und nicht-kovalent gebundenes Flavin-Adenin-Dinukleotid-(FAD)-Molekül als prosthetische Gruppe. Dieses Enzym wurde aus einer Vielzahl von Hefen und Bakterien isoliert und charakterisiert, darunter Pichia pastoris, Paecilomyces variotii, Pichia methanolica und Thermoascus aurantiacus. Alkoholoxidase ist das Schlüsselenzym des Methanolstoffwechsels in methylotrophen Hefespezies. Sie katalysiert den ersten Schritt des Methanolstoffwechsels. Damit ist Alkoholoxidase ein schneller und effizienter Katalysator für die Oxidation niedermolekularer primärer Alkohole zu den entsprechenden Aldehyden über einen zweistufigen Mechanismus: zunächst eine reduktive Halbreaktion, bei der das Substrat oxidiert wird, während FAD zu FADH₂ reduziert wird, gefolgt von einer oxidativen Halbreaktion, bei der das Flavin durch O₂ reoxidiert wird und H₂O₂ entsteht. Dieses Enzym wird als Mitglied der Glucose-Methanol-Cholin-(GMC)-Oxidoreduktase-Familie klassifiziert; der systematische Name dieser Enzymklasse lautet Alkohol:Oxygen-Oxidoreduktase, auch als Ethanoloxidase bezeichnet.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Alkoholoxidase aus Pichia pastoris.
PDB: 5I68

Der Nachweis und die Quantifizierung von Alkoholen sind für die Routineanalytik in verschiedenen Bereichen wie der Lebensmittelindustrie, der medizinischen Wissenschaft, der Landwirtschaft sowie Umweltanwendungen von Bedeutung. Ethanol-Biosensoren auf Basis von Alkoholoxidase wurden als stabil und praxistauglich beschrieben. Zur Verbesserung des Anwendungspotenzials der Alkoholoxidase gewinnen Studien zu Immobilisierungsmethoden, zur Kinetik enzymatischer Reaktionen, zu Betriebsmodi von Biosensoren sowie zu katalytischen Mechanismen zunehmend an Bedeutung. Daher ist Creative Enzymes stolz darauf, einen präzisen Aktivitätstest für Alkoholoxidase bereitzustellen – basierend auf langjähriger, umfassender Erfahrung in der Enzymprüfung und Methodenoptimierung. Spektrophotometrische Assays zur Bestimmung der Alkoholoxidase-Aktivität werden durch Verfolgung der Absorption bei 420 nm durchgeführt, was die Bildung von H₂O₂ anzeigt. Insgesamt engagiert sich Creative Enzymes mit Nachdruck für die Bereitstellung präziser Enzymaktivitätsassays. Wir freuen uns aufrichtig darauf, mit unseren Kunden eine belastbare Partnerschaft aufzubauen. Unser schneller Service, eine hohe Kundenorientierung und unser engagierter Ansatz haben uns zum bevorzugten Anbieter von Enzymassays gemacht.