Enzymaktivitätsmessung für Cholesterinoxidase

Creative Enzymes bietet zuverlässige und präzise Aktivitätsmessungen für Cholesterinoxidase unter Verwendung von spektrophotometrischen Assays an. Wir liefern die genauen Testergebnisse in der kürzest möglichen Zeit ab dem Datum der Auftragserteilung, was Creative Enzymes von unseren Mitbewerbern unterscheidet.

Cholesterinoxidase (EC 1.1.3.6; COX) ist ein monomeres, bi-funktionales, FAD-haltiges mikrobielles Enzym, das zur Familie der Oxidoreduktasen gehört, insbesondere zu denen, die auf die CH-OH-Gruppe des Donors mit Sauerstoff als Akzeptor wirken. Das Enzym katalysiert drei chemische Umwandlungen. Im ersten Schritt, der als reduktive Halbreaktion bezeichnet wird, wird die 3β-Hydroxylgruppe des Steroidringsystems zu dem entsprechenden Keton oxidiert. Der FAD-Kofaktor ist der Schlüssel zu dieser Reaktion und wird in diesem Prozess reduziert. Im zweiten Schritt katalysiert das Enzym die Isomerisierung der Doppelbindung im oxidierten Steroidringsystem von der Δ5-6-Position zur Δ4-5-Position, um das endgültige Steroidprodukt, Cholest-4-en-3-on, zu erzeugen. Im letzten Schritt, der als oxidative Halbreaktion bezeichnet wird, reagiert der reduzierte Kofaktor mit Dioxygen und wird reoxidiert, während O₂ zu H₂O₂ reduziert wird. Der systematische Name dieser Enzymklasse ist Cholesterin:Sauerstoff-Oxidoreduktase, die auch als Cholesterin-O₂-Oxidoreduktase, 3beta-Hydroxy-Steroid-Oxidoreduktase und 3beta-Hydroxysteroid:Sauerstoff-Oxidoreduktase bekannt ist. Cholesterinoxidase wurde ursprünglich aus Rhodococcus erythropolis isoliert und charakterisiert. Danach wurde sie auch von vielen Bakterien produziert, einschließlich sowohl Gram-positiver als auch Gram-negativer, aber die Actinomyceten gehören zur produktivsten COX-Gruppe.

Cholesterinoxidase ist mittlerweile eines der am häufigsten verwendeten Enzyme in der klinischen Laborpraxis, Biosynthese und in der Agrarindustrie geworden. Erste Studien über das Enzym konzentrierten sich auf seine Verwendung zur Bestimmung von Cholesterin im Serum, HDL oder LDL, was direkte Auswirkungen auf Atherosklerose, koronare Herzkrankheit und andere Lipidstörungen hat, sowie zur Bestimmung des Risikos für Herzinfarkt und Thrombose. Darüber hinaus zeigt dieses Enzym eine starke insektizide Aktivität und wurde daher verwendet, um das Cholesterin in Zellen zu verfolgen und als Schädlingsbekämpfung in der Agrarindustrie, insbesondere in transgenen Pflanzen. Außerdem spielt Cholesterinoxidase aus Streptomyces natalensis eine entscheidende Rolle bei der Biosynthese des Polyen-Makrolids Pimaricin, das ein wichtiges antifungales Antibiotikum in der Lebensmittelindustrie ist. Darüber hinaus ist Cholesterinoxidase auch an der Manifestation einiger Krankheiten bakteriellen (Tuberkulose), viralen (HIV) und nicht-viralen Prionursprungs (Alzheimer) beteiligt. Daher erhält Cholesterinoxidase zunehmend Aufmerksamkeit von pharmazeutischen, medizinischen, chemischen und landwirtschaftlichen Industrien. Die Aktivitätsassays der Cholesterinoxidase bleiben jedoch herausfordernd, was ein Hindernis für die Entwicklung und Nutzung dieses Enzyms darstellt. Glücklicherweise hat Creative Enzymes den genauen und bequemen Aktivitätsassay für Cholesterinoxidase durch die Verwendung von spektrophotometrischen Assays verfügbar gemacht. Unterstützt von den fortschrittlichsten Instrumenten der Welt sind wir bestrebt, die höchste Kundenzufriedenheit zu erreichen und die Servicequalität sowie die Prozesskontrolle ständig zu verbessern.

Abbildung: Die Kristallstruktur der B. sterolicum Cholesterinoxidase, die mit einem Steroidsubstrat komplexiert ist.
PDB: 1COY