Enzymaktivitätsmessung von N-Acylhexosamin-Oxidase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes bleibt in der obersten Klasse der Enzymologie-Dienstleistungsbranche und bietet genaue und zuverlässige Aktivitätsassays für Tausende von Forschern weltweit. Wir haben durch jahrelange Tests der Enzymaktivität umfangreiche Erfahrungen gesammelt. Wir sind besonders professionell in der Methodenanpassung, um den geeignetsten Assay basierend auf den tatsächlichen Gegebenheiten zu erstellen. Jetzt bringen wir all diese Vorteile in die Aktivitätsmessung für N-Acylhexosaminoxidase ein.

N-Acylhexosaminoxidase wurde erstmals aus Pseudomonas sp. isoliert und wurde bisher in keiner anderen Quelle gefunden. Dieses Enzym gehört zur Familie der Oxidoreduktasen, in der Untergruppe, die auf die CH-OH-Gruppe des Donors mit Sauerstoff als Akzeptor wirkt. N-Acylhexosaminoxidase (EC 1.1.3.29) katalysiert die chemische Reaktion von N-Acetyl-D-Glucosamin, das häufig und hauptsächlich in Polysacchariden vorkommt, die in vielen Naturprodukten zu finden sind. Das Enzym wandelt den Zucker in N-Acetyl-D-Glucosaminat um, während das O₂-Gas zu Wasserstoffperoxid (H₂O₂) reduziert wird. Dieses Enzym wirkt auch auf andere Moleküle mit ähnlicher Struktur, einschließlich N-Glycolylglucosamin, N-Acetylgalactosamin und, langsamer, auf N-Acetylmannosamin. Der systematische Name dieser Enzymklasse ist N-Acyl-D-Hexosamin: Sauerstoff 1-Oxidoreduktase, und es wird auch N-Acyl-D-Hexosaminoxidase oder N-Acyl-beta-D-Hexosamin:Sauerstoff 1-Oxidoreduktase genannt. Besonders zeigt das Enzym seine Aktivität über einen weiten pH-Bereich mit einem optimalen pH von 8,0. Das Enzym kann spezifisch durch Zn²⁺ gehemmt werden. Eine vorläufige Studie deutete darauf hin, dass das Enzym zur Messung der Aktivität von N-Acetyl-β-D-Glucosaminidase (NAG) verwendet werden könnte, die für ihre Anwendung bei der Diagnose von Nierenschäden aufgrund von Diabetes oder Medikamenten mit Antibiotika bekannt ist. Es gibt keine Kristallstruktur von N-Acylhexosaminoxidase, aber Studien haben gezeigt, dass es aus vier nicht identischen Untereinheiten besteht. Der Mangel an strukturellen und biochemischen Informationen über N-Acylhexosaminoxidase schränkt die Detektion und Anwendung dieses Enzyms ein. Offensichtlich wäre die korrekte Messung seiner Aktivität der erste Schritt auf dem Weg zur Produktentwicklung. Die enzymatische Aktivität von N-Acylhexosaminoxidase kann durch die Detektion des O₂-Verbrauchs mit einer Sauerstoffelektrode assayed werden. Allerdings zeigte Creative Enzymes eine höhere Präzision im Aktivitätsassay unter Verwendung eines gekoppelten Enzymsystems, bei dem die Produkte leicht durch Spektrophotometrie quantifiziert werden können.

Abbildung: Die Reaktion, die von N-Acylhexosaminoxidase katalysiert wird.

Creative Enzymes bietet unvergleichliche Assay-Dienstleistungen für Oxidoreduktasen an. Unsere innovativen und intelligenten Forscher führen immer genaue Aktivitätstests durch. Durch die Kombination unseres spezialisierten Forschungsteams und der fortschrittlichen Ausrüstung ist Creative Enzymes in der Lage, die genaue Assay-Methode bereitzustellen, um die Anforderungen jedes Kunden zu erfüllen.