Messung der Enzymaktivität der D-Arginin-Dehydrogenase

Durch das konsequente Streben nach Produkten höchster Qualität hat sich Creative Enzymes als weltweit führender Anbieter im Bereich der Enzymaktivitätsassays etabliert. Wir sind stolz darauf, die zuverlässigsten und präzisesten Methoden zur Aktivitätsbestimmung der D-Arginin-Dehydrogenase bereitzustellen.

Die D-Arginin-Dehydrogenase (EC 1.4.99.6) wurde erstmals 1972 als D-Aminosäure-Dehydrogenase (EC 1.4.99.1) beschrieben und 2015 in EC 1.4.99.6 umklassifiziert. Die D-Arginin-Dehydrogenase ist ein neuartiges, flavinabhängiges Enzym mit FAD als Kofaktor. Dieses Enzym wurde aus dem Bakterium Pseudomonas aeruginosa PAO1 isoliert, einem gramnegativen Bodenbakterium, das als bedeutender opportunistischer humanpathogener Erreger bekannt ist. Die D-Arginin-Dehydrogenase ist ein katabolisches Enzym, das die oxidative Desaminierung von D-Arginin zu Iminoarginin katalysiert, welches nichtenzymatisch zu α-Ketoarginin und Ammoniak hydrolysiert. Die beiden Produkte werden anschließend durch eine anabole L-Arginin-Dehydrogenase zu L-Arginin umgesetzt. Die vorgeschlagene physiologische Funktion der D-Arginin-Dehydrogenase in Pseudomonas besteht somit darin, zur ersten Stufe einer durch zwei Enzyme gekoppelten Racemisierung von D-Arginin zu L-Arginin beizutragen. Die D-Arginin-Dehydrogenase gehört zur allgemeinen Familie der Oxidoreduktasen, die die CH-OH-Gruppe des Substrats umsetzen und NAD⁺ oder NADP⁺ als Kofaktor verwenden. Der systematische Name dieses Enzyms lautet D-Arginin:Akzeptor-Oxidoreduktase (desaminierend); es ist auch bekannt als D-Aminosäure:(Akzeptor)-Oxidoreduktase (desaminierend), D-Aminosäure-Dehydrogenase oder D-Aminosäure:Akzeptor-Oxidoreduktase (desaminierend).

Die D-Arginin-Dehydrogenase ist mit einem breiten Substratspektrum aktiv und kann D-Aminosäuren unterschiedlicher Größe und Polarität oxidieren. Alle natürlich vorkommenden D-Aminosäuren sowie Glycin können durch dieses Enzym oxidiert werden, mit Ausnahme von D-Glutamat und D-Aspartat. Das physiologische Substrat D-Arginin zeigt die höchste Aktivität. Leider sind Aktivitätsassays der D-Arginin-Dehydrogenase mittels Spektrophotometrie im industriellen Maßstab bislang nicht umfassend etabliert, wenngleich Aktivitätsmessungen mit anderen Methoden bereits berichtet wurden. Der spektrophotometrische Assay gilt als zuverlässige und kosteneffiziente Methode zur quantitativen Bestimmung der Enzymaktivität. Creative Enzymes ist heute das führende Unternehmen im Bereich der Enzymaktivitätsassays und dafür bekannt, höchste Kundenzufriedenheit bei kürzesten Lieferzeiten zu gewährleisten. Kurz gesagt: Creative Enzymes verpflichtet sich, professionelle Standards und effiziente Dienstleistungen aufrechtzuerhalten, um weiterhin Ihr vertrauenswürdiger Partner zu sein.

Abbildung: Die Kristallstruktur der D-Arginin-Dehydrogenase aus P. aeruginosa.
PDB: 3NYC