Messung der Enzymaktivität der Ribonuklease T1

Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen, das hochwertige bioanalytische Dienstleistungen im Bereich der Enzymaktivitätsanalyse anbietet und die Anforderungen von Kunden aus der pharmazeutischen, biotechnologischen und diagnostischen Industrie bedient. Im Folgenden bieten wir mit Stolz präzise Enzymassays für Ribonuklease T1 an.

Ribonuklease T1 (EC 3.1.27.3; früher EC 2.7.7.26 und EC 3.1.4.8; RNase T1) ist ein Enzym, das die Depolymerisation von RNA an Guanylylresten über einen Transesterifizierungsmechanismus katalysiert, wobei ein 3’-terminaler, zyklischer 2’,3’-Guanosinphosphatrest entsteht. Dies erfolgt in einem zweistufigen Prozess: In einem ersten Schritt wird die RNA-Kette durch Transesterifizierung einer 5’-Phosphoesterbindung gespalten, wodurch ein Guanosin-2’,3’-zyklisches Phosphat am Terminus gebildet wird; anschließend wird dieses zu einem 3’-Phosphat-Produkt hydrolysiert. RNase T1 ist ein globuläres, eindomäniges Protein mit 104 Aminosäuren. RNase T1 ist der führende Vertreter einer etwa 25 Mitglieder umfassenden Superfamilie verwandter pilzlicher/bakterieller Enzyme/Toxine, die Sequenz- und tertiärstrukturelle Ähnlichkeiten aufweisen. Aufgrund ihrer geringen Größe, hohen thermischen Stabilität und der Verfügbarkeit eines effizienten Expressionssystems kann RNase T1 als Modell für Studien zur Proteinfaltung dienen. Die Struktur von RNase T1 besteht aus einer α-Helix, einem ausgedehnten antiparallelen β-Faltblatt, das aus drei langen und zwei kurzen β-Strängen aufgebaut ist, einem kurzen zweisträngigen antiparallelen β-Faltblatt, vier breiten Schleifen sowie verschiedenen Turn-Typen.

Inhibitoren der RNase T1 erscheinen als vielversprechende Kandidaten für die Krebstherapie. Darüber hinaus kann RNase T1 als vielversprechendes Werkzeug für die Entwicklung von Antikrebswirkstoffen dienen. Daher ist die Aufklärung des katalytischen Mechanismus der RNase T1 entscheidend für das grundlegende Verständnis dieses Enzyms und liefert zugleich wichtige Erkenntnisse für das Design neuer RNase‑T1‑Inhibitoren. Creative Enzymes ist in der Lage, hochentwickelte enzymatische Messungen für RNase T1 durchzuführen. Die Aktivität der RNase T1 wird spektrophotometrisch bei 260 nm bestimmt. Unsere Testergebnisse sind besonders verlässlich und validiert. Insgesamt setzt sich Creative Enzymes dafür ein, ein Höchstmaß an Kundenzufriedenheit zu erreichen und seine Dienstleistungen sowie sein Qualitätsmanagementsystem kontinuierlich zu verbessern.

Abbildung: Die Kristallstruktur der RNase T1 aus Aspergillus oryzae.
PDB: 3RNT