Messung der Enzymaktivität der NAD(P)H-Dehydrogenase (Chinon) mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes hebt sich in der Enzymdienstleistungsbranche durch Innovationskraft und Professionalität hervor. Unsere hochwertigen Services und professionellen Prozesse wurden von Zehntausenden Kunden anerkannt. Hochpräzise und reproduzierbare Ergebnisse werden durch unsere moderne Ausstattung und spezialisierte Fachexperten gewährleistet. Enzymaktivitätsassays für Oxidoreduktasen, wie z. B. NAD(P)H-Dehydrogenase (Chinon), zählen zu unseren besonders nachgefragten Leistungen.

NAD(P)H-Dehydrogenase (Chinon) (EC 1.6.5.2, NQO1, früher EC 1.6.99.2) ist ein ubiquitär vorkommendes Flavoenzym, das die Zwei-Elektronen-Reduktion verschiedener Chinone katalysiert und dabei die Kofaktoren NADH und NADPH mit gleicher Effizienz nutzen kann. Der katalytische Zyklus dieses Enzyms folgt einem „Ping-Pong“-Mechanismus: Zunächst erfolgt die Hydridübertragung von NAD(P)H auf den FAD-Kofaktor, anschließend die Freisetzung von NAD(P)⁺ sowie die Hydridübertragung vom reduzierten Kofaktor auf das Substrat.

NAD(P)H-Dehydrogenase (Chinon) weist ein breites Spektrum an Substratstrukturen auf, mit einer Präferenz für kurzkettige Akzeptor-Chinone wie Ubiquinon, Benzochinon, Juglon und Durochinon. NQO1 wird allgemein als Detoxifikationsenzym angesehen und übernimmt eine antioxidative Funktion, indem es die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies verhindert. Neben der Detoxifikation von Chinonen umfasst das Funktionsspektrum dieses Enzyms auch die Bioaktivierung bestimmter antitumoraler Chinone. Abnormes Wachstum und Proliferation in unterschiedlichen Tumorzelltypen führen zu einer Überexpression dieses Enzyms, was die Forschung zur gezielten kompetitiven Inhibition weiter vorantreibt. Neuere Studien zeigen zudem, dass NQO1 eine wichtige Rolle bei der Regulation der Stabilität des Tumorsuppressorproteins p53 sowie mehrerer weiterer kurzlebiger Proteine, darunter p73α und Ornithindecarboxylase (ODC), spielt. Durch Konkurrenz mit NAD(P)H um die Bindung an NQO1 können Inhibitoren den Elektronentransfer auf FAD verhindern, die Assoziation dieses Enzyms mit p53 stören und einen ubiquitinunabhängigen p53-Abbau induzieren. Kompetitive Inhibitoren mit überlegenen pharmakologischen Eigenschaften werden künftig eine eindeutigere Charakterisierung von NQO1 ermöglichen. Creative Enzymes unterstützt Ihre Arbeit durch präzise Assay-Services sowohl für Enzymextrakte als auch für intrazelluläre Enzyme.

Abbildung: Die Kristallstruktur von NQO1 mit dem Inhibitor Dicoumarol.
Referenz: Asher G et al. Biochemistry. 2006 23;45(20):6372-6378

Creative Enzymes ist ein weithin anerkannter Experte für die Messung der Enzymaktivität. Unsere professionellen Dienstleistungen basieren auf jahrelanger Erfahrung und fundiertem Kompetenzaufbau. Auch künftig wird Creative Enzymes alle Anstrengungen unternehmen, Enzymaktivitätsassays weiter zu optimieren, um Ihre Forschung bestmöglich zu unterstützen.