Enzymaktivitätsmessung von NAD(P)H-Dehydrogenase (Quinon) unter Verwendung spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes hebt sich in der Enzymdienstleistungsbranche durch Innovation und Professionalität hervor. Unsere hochwertigen Dienstleistungen und professionellen Prozesse wurden von Zehntausenden von Kunden gelobt. Die hochgenauen und reproduzierbaren Ergebnisse werden durch unsere fortschrittliche Ausstattung und spezialisierten Experten gewährleistet. Enzymaktivitätsassays von Oxidoreduktasen, wie NAD(P)H-Dehydrogenase (Chinon), gehören zu unseren am meisten nachgefragten Dienstleistungen.

NAD(P)H-Dehydrogenase (Chinon) (EC 1.6.5.2, NQO1, früher EC 1.6.99.2) ist ein ubiquitär vorkommendes Flavoenzym, das die Zwei-Elektronen-Reduktion verschiedener Chinone katalysiert und die Fähigkeit hat, die Cofaktoren NADH und NADPH mit gleicher Effizienz zu nutzen. Der katalytische Zyklus dieses Enzyms funktioniert über einen „Ping-Pong“-Mechanismus, wobei der erste Schritt den Hydridtransfer von NAD(P)H zum FAD-Cofaktor umfasst, gefolgt von der Freisetzung von NAD(P)⁺ und dem Hydridtransfer vom reduzierten Cofaktor zum Substrat.

NAD(P)H-Dehydrogenase (Chinon) hat ein breites Spektrum an Substratstrukturen mit einer Vorliebe für kurzkettige Akzeptorchinone, wie Ubiquinon, Benzochinon, Juglon und Durochinon. NQO1 wird allgemein als Entgiftungsenzym betrachtet, das eine antioxidative Rolle spielt, indem es die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies verhindert. Neben seiner Rolle bei der Entgiftung von Chinonen umfasst die Funktion dieses Enzyms auch die Bioaktivierung bestimmter antitumoraler Chinone. Das abnormale Wachstum und die Proliferation in verschiedenen Tumorzelltypen führen zu einem überexprimierten Niveau dieses Enzyms, was mehr Forschung zur gezielten kompetitiven Hemmung anregt. Neuere Studien haben gezeigt, dass NQO1 eine wichtige Rolle bei der Regulierung der Stabilität des Tumorsuppressorproteins p53 und mehrerer anderer kurzlebiger Proteine, einschließlich p73α und Ornithindecarboxylase (ODC), spielt. Durch den Wettbewerb mit NAD(P)H um die Bindung an NQO1 können Inhibitoren den Elektronentransfer zu FAD verhindern, was die Assoziation dieses Enzyms mit p53 stört und die ubiquitin-unabhängige p53-Abbau induziert. Heutzutage werden die kompetitiven Inhibitoren mit überlegenen pharmakologischen Eigenschaften eine genauere Untersuchung von NQO1 erleichtern. Creative Enzymes wird Ihre Arbeit unterstützen, indem wir präzise Assay-Dienstleistungen sowohl für Enzymextraktionen als auch für intrazelluläre Enzyme bereitstellen.

Abbildung: Die Kristallstruktur von NQO1 mit dem Inhibitor Dicoumarol.
Referenz: Asher G et al. Biochemistry. 2006 23;45(20):6372-6378

Creative Enzymes ist ein anerkanntes Expertenteam in der Messung der Enzymaktivität. Unsere professionellen Dienstleistungen basieren auf jahrelangem Lernen und der gründlichen Entwicklung von Fachwissen. In Zukunft wird Creative Enzymes alle Anstrengungen unternehmen, um die Enzymaktivitätsassays zu perfektionieren und Ihre Forschung zu unterstützen.