Messung der Enzymaktivität der 3',5'-zyklischen Nukleotid-Phosphodiesterase

Creative Enzymes ist der erfahrenste Dienstleister mit Spezialisierung auf die Quantifizierung der Enzymaktivität. Um dem Wettbewerb voraus zu sein, bietet Creative Enzymes innovative Enzymassay-Services mit führendem technischem Support, der in dieser Form in der Branche einzigartig ist. Hiermit sind wir uneingeschränkt in der Lage, einen präzisen Enzymaktivitätsassay für 3',5'-cyclische-Nukleotid-Phosphodiesterase anzubieten.

Die Second Messenger cyclisches AMP (cAMP) und cyclisches GMP (cGMP) spielen eine zentrale Rolle in intrazellulären Signaltransduktionskaskaden, indem sie cAMP- und cGMP-abhängige Proteinkinasen (PKA und PKG), den EPAC‑Faktor (Exchange Protein Activated by cAMP), GAF‑Domänen sowie cyclische Nukleotid‑gesteuerte Kanäle (CNGC) regulieren. Die 3',5'-cyclische-Nukleotid-Phosphodiesterase (EC 3.1.4.17; PDE) stellt eine multigenische Familie dar, die ubiquitär in Geweben verteilt ist und die transienten intrazellulären Spiegel cyclischer Nukleotide kontrolliert, indem sie cAMP bzw. cGMP zu 5’-AMP bzw. 5’-GMP hydrolysiert. PDEs modulieren die zellulären cAMP- und cGMP-Spiegel in Prozessen wie kardialer Kontraktilität, Thrombozytenaggregation, Lipolyse, Glykogenolyse, Kontraktion glatter Muskulatur, Ionenkanal-Leitfähigkeit und Apoptose.

Bislang wurden 11 unterschiedliche PDE‑Familien (PDE1 bis PDE11) identifiziert, die 21 Gene umfassen. Obwohl die Mitglieder jeder PDE‑Familie eine erhebliche Divergenz der Aminosäuresequenzen aufweisen, sind sie funktionell verwandt hinsichtlich Substrat- und Inhibitorspezifität sowie des Mechanismus der Regulation der enzymatischen Aktivität. Die Enzyme PDE5, PDE6 und PDE9 nutzen cGMP als Substrat, PDE4, PDE7 und PDE8 sind spezifisch für cAMP, und PDE1, PDE2, PDE3, PDE10 und PDE11 bauen beide Substrate ab. Die Aminosäuresequenzen aller bislang identifizierten Säuger‑PDEs enthalten eine hochkonservierte C‑terminale Region von etwa 270 Aminosäureresten, die das aktive Zentrum mit zwei gebundenen Metallionen umfasst. Mitglieder der PDE‑Superfamilie unterscheiden sich zudem deutlich in ihrer Gewebeverteilung und ihren Expressionsniveaus, was sie zu interessanten therapeutischen Zielstrukturen für eine Vielzahl von Erkrankungen macht. Von großem pharmazeutischem Interesse ist es, die biologische Bedeutung dieser scheinbaren Komplexität zu untersuchen, indem spezifische Inhibitoren verschiedener PDEs entwickelt werden, die zur Bewertung ihrer physiologischen Funktionen in Tiermodellen eingesetzt werden können. Somit wird deutlich, dass PDEs eine Schlüsselrolle in der medizinischen und diagnostischen Forschung spielen.

Creative Enzymes freut sich, präzise Enzymaktivitätsassays für PDEs anzubieten, basierend auf langjähriger Erfahrung in der Enzymprüfung und Methodenoptimierung. Der chromatographische Assay hat sich als zuverlässige Methode zur Aktivitätsquantifizierung des Enzyms erwiesen. Die einzigartigen und hochwertigen Services unterscheiden Creative Enzymes von Wettbewerbern und machen uns zur besten Wahl bei der Entwicklung von Produkten, die PDEs enthalten.

Abbildung: Die Struktur der humanen PDE2A als Bänderdarstellung.
Referenz: Iffland A, Kohls D, Low S, et al. Biochemistry, 2005, 44(23): 8312-8325.