Enzymaktivitätsmessung für 3',5'-zyklische Nucleotid-Phosphodiesterase

Creative Enzymes ist der erfahrenste Dienstleister, der sich auf die Quantifizierung der Enzymaktivität spezialisiert hat. Um seinen Wettbewerbern voraus zu sein, bietet Creative Enzymes innovative Enzymassay-Dienste mit führender technischer Unterstützung, die in der Branche nirgendwo sonst zu finden ist. Hier sind wir voll kompetent, um den genauen Enzymaktivitätsassay für 3',5'-zyklische Nucleotid-Phosphodiesterase anzubieten.

Die zweiten Botenstoffe, zyklisches AMP (cAMP) und zyklisches GMP (cGMP), spielen eine entscheidende Rolle in der intrazellulären Signaltransduktionskaskade, indem sie die cAMP- und cGMP-abhängige Proteinkinase (PKA und PKG), den EPAC (Exchange Protein Activated by cAMP) Faktor, die GAF-Domäne und die zyklisch nucleotide-gesteuerten Kanäle (CNGC) regulieren. Die 3',5'-zyklische Nucleotid-Phosphodiesterase (EC 3.1.4.17; PDE) stellt eine multigenische Familie dar, die in verschiedenen Geweben verbreitet ist und die transienten intrazellulären Spiegel von zyklischen Nucleotiden kontrolliert, indem sie cAMP und cGMP respektive zu 5’AMP und 5’GMP hydrolysiert. PDEs modulieren die zellulären Spiegel von cAMP und cGMP in Prozessen wie der kardialen Kontraktionsfähigkeit, der Thrombozytenaggregation, der Lipolyse, der Glykogenolyse, der Kontraktion der glatten Muskulatur, der Ionenkanalleitfähigkeit und der Apoptose.

Bislang wurden 11 verschiedene PDE-Familien (PDE1 bis PDE11) identifiziert, die 21 Gene umfassen. Obwohl die Mitglieder jeder PDE-Familie eine erhebliche Divergenz der Aminosäuresequenzen aufweisen, sind sie funktional miteinander verbunden, basierend auf ihren Substrat- und Inhibitorspezifitäten sowie dem Mechanismus zur Regulierung der enzymatischen Aktivität. Die PDE5-, PDE6- und PDE9-Enzyme nutzen cGMP als Substrat, PDE4, PDE7 und PDE8 sind spezifisch für cAMP, und PDE1, PDE2, PDE3, PDE10 und PDE11 bauen beide Substrate ab. Die Aminosäuresequenzen aller bisher identifizierten Säugetier-PDEs umfassen eine hochkonservierte C-terminale Region von etwa 270 Aminosäureresten, die die aktive Stelle mit zwei gebundenen Metallionen umfasst. Mitglieder der PDE-Superfamilie unterscheiden sich auch erheblich in ihrer Gewebeverteilung und ihren Expressionsniveaus, was sie zu interessanten therapeutischen Zielen für eine Vielzahl von Krankheiten macht. Es ist von großem pharmazeutischen Interesse, die biologische Bedeutung dieser offensichtlichen Komplexität zu untersuchen, indem spezifische Inhibitoren verschiedener PDEs entwickelt werden, die verwendet werden können, um ihre physiologischen Funktionen in Tiermodellen zu bewerten. So kann man sehen, dass PDEs eine zentrale Rolle in der medizinischen und diagnostischen Forschung spielen.

Creative Enzymes ist stolz darauf, die präzisen Enzymaktivitätsassays für PDEs anzubieten, basierend auf jahrelanger Erfahrung in der Testung von Enzymen und der Optimierung von Methoden. Der chromatographische Assay hat sich als zuverlässige Methode zur Aktivitätsquantifizierung des Enzyms erwiesen. Die einzigartigen und hervorragenden Dienstleistungen unterscheiden Creative Enzymes von seinen Wettbewerbern und machen uns zu Ihrer besten Wahl bei der Entwicklung von Produkten, die PDEs enthalten.

Abbildung: Die Struktur der menschlichen PDE2A, dargestellt als Banddarstellung.
Referenz: Iffland A, Kohls D, Low S, et al. Biochemie, 2005, 44(23): 8312-8325.