Messung der Enzymaktivität der Beta-N-Acetylhexosaminidase

Creative Enzymes ist stolz darauf, eine Vielzahl von Enzymaktivitätsassays für Kunden aus unterschiedlichen Branchen anzubieten. Wir verpflichten uns zu den zuverlässigsten enzymatischen Messungen auf dem globalen Markt. Unsere Qualität und Produktivität werden durch moderne analytische Instrumentierung und standardisierte Qualitätskontrollverfahren sichergestellt. Unter unseren präzisen Dienstleistungen zur Aktivitätsquantifizierung ist die Analyse der β‑N‑Acetylhexosaminidase besonders breit anerkannt.

β‑N‑Acetylhexosaminidase (EC 3.2.1.52; früher EC 3.2.1.29 und EC 3.2.1.30; β‑N‑Acetyl‑D‑hexosaminid‑N‑acetylhexosaminohydrolase) ist ein Exo‑Enzym, das N‑Acetylhexosaminide am nichtreduzierenden Ende hydrolysiert, wobei ein N‑Acetylhexosamin – in der Regel N‑Acetylglucosamin (GlcNAc) oder N‑Acetylgalactosamin (GalNAc) – freigesetzt wird. Das Enzym, das die Spaltung von β‑N‑Acetylglucosaminid katalysiert, wird auch als β‑N‑Acetylglucosaminidase bezeichnet, während ein spezifisch für β‑N‑Acetylgalactosaminid wirkendes Enzym bislang weder nachgewiesen noch identifiziert wurde. Im Allgemeinen hydrolysieren β‑N‑Acetylhexosaminidasen die β‑Glykoside von N‑Acetylglucosaminid und N‑Acetylgalactosaminid; sie sind nicht spezifisch für die Aglykon‑Gruppe, zeigen jedoch eine Präferenz für Aryl‑Substituenten. Diese Enzyme sind in der Natur weit verbreitet und wurden in tierischen Geweben, Mikroorganismen und Pflanzen nachgewiesen. Es wird angenommen, dass β‑N‑Acetylhexosaminidasen in Pflanzen während der Keimung an der Prozessierung und dem Turnover von Glykoproteinen beteiligt sind; zudem wird ihnen eine Funktion im Stoffwechsel von N‑Glykanen während der Reifung von Apfelfrüchten zugeschrieben. Andererseits bauen einige pflanzliche β‑N‑Acetylhexosaminidasen auch Chitin und Chitin‑Oligomere ab. Daher wurde eine Beteiligung am pflanzlichen Abwehrsystem gegen chitinhaltige Pathogene vorgeschlagen. Da jedoch das natürliche Substrat der β‑N‑Acetylhexosaminidase in Pflanzen bislang nicht identifiziert wurde und die Substratspezifität nur für eine begrenzte Anzahl von Verbindungen untersucht wurde, ist die physiologische Bedeutung dieses Enzyms noch nicht abschließend geklärt.

Beim Menschen existieren zwei wesentliche Isoformen der β‑N‑Acetylhexosaminidase: HexA besteht aus einem Heterodimer der α‑ und β‑Untereinheiten, und HexB besteht aus einem Homodimer aus zwei β‑Untereinheiten. Zu beachten ist, dass ein genetischer Mangel an β‑N‑Acetylhexosaminidase die Tay‑Sachs‑Krankheit oder die Sandhoff‑Krankheit verursachen kann. Daher ist es von klinischer Relevanz, die Funktionen und Wirkmechanismen der β‑N‑Acetylhexosaminidase weiter zu untersuchen, was eine präzise Überwachung der Enzymaktivität voraussetzt.

Creative Enzymes verfügt über umfassende Erfahrung in der Durchführung präziser enzymatischer Assays für β‑N‑Acetylhexosaminidasen, die mittels spektrophotometrischer Verfahren bestimmt werden. Die Enzymaktivität wird dabei durch Messung der Freisetzung von p-Nitrophenol aus pNP‑β‑GlcNAc erfasst. Die Menge des freigesetzten p-Nitrophenols wird durch Verfolgung der Absorption bei 405 nm bestimmt. Unsere Prüfergebnisse sind dank eines exzellenten Expertenteams besonders verlässlich und validiert. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihr bevorzugter Partner für nahezu alle Dienstleistungen im Bereich der Enzymanalytik.

Abbildung: Die Kristallstruktur der β‑N‑Acetylhexosaminidase aus Arthrobacter aurescens.
PDB: 3RCN