Messung der Enzymaktivität von Pullulanase

Creative Enzymes hat sich zu einem weltweit führenden Anbieter in der Entwicklung und Optimierung enzymatischer Assays entwickelt. Durch erstklassige Qualität haben wir das Vertrauen zahlreicher Kunden gewonnen. Wir sind stolz darauf, hochzuverlässige Forschungsdienstleistungen für Hydrolasen anzubieten. Durch das kontinuierliche Bestreben, unseren Kunden die bestmöglichen Leistungen bereitzustellen, hat Creative Enzymes standardisierte Kontrollen sowie eine strenge Qualitätsüberwachung etabliert. Die Aktivitätsbestimmung von Pullulanase zählt zu unseren herausragenden Dienstleistungen.

Pullulanasen (Pullulan-6-Glucanohydrolase, EC 3.2.1.41) sind Debranching-Enzyme, die in der Lage sind, die α-1,6-glykosidische Bindung in Pullulan, Stärke, Amylopektin und verwandten Oligosacchariden zu hydrolysieren. Pullulanasen lassen sich hauptsächlich anhand ihrer Substratpräferenz in zwei Gruppen einteilen. Pullulanasen vom Typ I spalten spezifisch die α-1,6-glykosidischen Bindungen in Pullulan und verzweigten Oligosacchariden und erzeugen dabei Maltotriose bzw. lineare Oligosaccharide. Pullulanasen vom Typ II, auch als Amylopullulanasen bezeichnet, können sowohl α-1,6- als auch α-1,4-glykosidische Bindungen in verzweigten und linearen Oligosacchariden hydrolysieren. Alle Pullulanasen vom Typ I gehören zur Familie der Glycosidhydrolasen 13 (GH13), während Amylopullulanasen je nach Architektur der katalytischen Domäne und Anzahl konservierter Sequenzen den Familien GH13 bzw. GH57 zugeordnet werden.

Pullulanase kann in zahlreichen industriellen Prozessen eingesetzt werden. Eine schnell wachsende Anwendung ist beispielsweise die enzymatische Umwandlung von Stärke in Glukose, Maltose und Fruktose, die als Süßungsmittel in Lebensmitteln dienen. Die in der Industrie verwendeten Stärken bestehen überwiegend zu etwa 80 % aus Amylopektin, das 4–5 % α-1,6-glykosidische Bindungen enthält. Pullulanasen werden bei der Stärkesaccharifizierung eingesetzt, indem sie die α-1,6-Bindungen in Amylopektin hydrolysieren und so hochglukose- oder hochmaltosehaltige Sirupe erzeugen. Damit ist dieses Enzym ein unverzichtbarer Bestandteil der Lebensmittelverarbeitung. Es stehen zahlreiche Methoden zur Messung der Enzymaktivität zur Verfügung, die sämtlich auf dem Nachweis der freigesetzten reduzierenden Zucker beruhen. Creative Enzymes verwendet die zuverlässigste spektrophotometrische Methode, um schnelle und präzise Assays zu gewährleisten.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Pullulanase aus Anoxybacillus sp.
Referenz: Jianyong Xu et al. Proteins 2014 82:1685–1693.

Creative Enzymes verfügt über umfassende Expertise und langjährige Erfahrung. Mit dem übergeordneten Ziel, für jeden Kunden die optimalen Assay-Services bereitzustellen, wird Creative Enzymes die Ausstattung kontinuierlich modernisieren und die Assay-Kapazitäten weiter ausbauen. Unsere Zuverlässigkeit wurde von Tausenden Wissenschaftlern bestätigt. Auch künftig wird Creative Enzymes Ihr Unternehmen als verlässlicher Partner unterstützen.