Messung der Enzymaktivität für Isopullulanase

Creative Enzymes bietet eine zuverlässige Aktivitätsmessung für Isopullulanase. Die Qualität unserer Ergebnisse wird durch modernste Instrumentierung und führende Technologien sichergestellt. Wir übertreffen unsere Wettbewerber durch kurze Durchlaufzeiten bei Aktivitätsassays – sowohl für Standard-Aktivitätsbestimmungen als auch für kundenspezifische Aufgabenstellungen.

Isopullulanase (EC 3.2.1.57; Pullulan-4-Glucanohydrolase) ist ein Enzym, das ausschließlich die internen α-1,4-glycosidischen Bindungen von Pullulan auf der reduzierenden Seite in Bezug auf den α-1,6-Verzweigungspunkt spaltet und Isopanose freisetzt. Isopullulanase hydrolysiert zudem Substrate, die die Panose-Struktur (Glc-α-(1→6)-Glc-α-(1→4)-Glc) enthalten, und spaltet die α-1,4-glycosidische Bindung im Panose-Motiv. Da Isopullulanase die strukturellen Unterschiede zwischen α-1,4- und α-1,6-glycosidischen Bindungen präzise erkennen kann, wird sie in der Strukturanalyse von Oligo- und Polysacchariden eingesetzt. Auf Stärke zeigt Isopullulanase jedoch praktisch keine Wirkung.

Die Pullulan-hydrolysierenden Enzyme wurden hauptsächlich anhand der Substratspezifität und des Reaktionsprodukts in drei Typen klassifiziert: (i) Pullulanase (EC 3.2.1.41), die α-1,6-glycosidische Bindungen hydrolysiert und Maltotriose bildet; (ii) Alpha-Amylase (EC 3.2.1.1) aus Thermoactinomyces vulgaris R-47 sowie Neopullulanase (EC 3.2.1.135), die α-1,4-glycosidische Bindungen hydrolysieren und Panose erzeugen; (iii) Isopullulanase, die die anderen α-1,4-glycosidischen Bindungen hydrolysiert und Isopanose bildet. Unter diesen Enzymen ist Isopullulanase das einzige Enzym, das der GH49-Familie zugeordnet ist. Interessanterweise hydrolysiert Isopullulanase Dextran überhaupt nicht, während alle anderen Enzyme der GH49-Familie Dextran-hydrolysierende Enzyme sind. Zu beachten ist, dass sich die Primärstruktur der Isopullulanase vollständig von der der Isomaltodextranase oder anderer Pullulan-Hydrolasen unterscheidet, jedoch überraschenderweise eine hohe Ähnlichkeit mit mehreren Dextranase-Enzymen aufweist, die Pullulan nicht hydrolysieren.

Detaillierte Studien zu den Wirkmechanismen der Isopullulanase werden daher die molekulare Grundlage ihrer katalytischen Aktivität aufklären und weitere Impulse für das Engineering und die Modifikation des Enzyms liefern, um – entsprechend den Anforderungen der Lebensmittel- und Chemieindustrie – unterschiedliche Substratspezifitäten und eine höhere Effizienz zu erreichen. Vor diesem Hintergrund hat Creative Enzymes die zuverlässigste Enzymaktivitätsmessung für Isopullulanase entwickelt, um entsprechende Forschungsvorhaben zu unterstützen. Die Aktivität der Isopullulanase wird mittels spektrophotometrischem Assay bestimmt. Unsere Testergebnisse gelten als besonders verlässlich und präzise, was sich in regelmäßig wiederkehrenden Anfragen zahlreicher Kunden widerspiegelt. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihr vertrauenswürdiger Partner und unterstützt Ihre Forschung jederzeit in professioneller Weise.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Isopullulanase aus Aspergillus niger ATCC 9642.
PDB: 1WMR