Messung der Enzymaktivität für Xylan-1,4-β-Xylosidase

Creative Enzymes ist stolz darauf, eines der wenigen Unternehmen weltweit zu sein, das sich gezielt auf die Entwicklung und Bereitstellung von Enzymaktivitätsassays spezialisiert hat. Wir arbeiten während des gesamten Prozesses eng mit unseren Kunden zusammen – von der Lösung spezifischer Fragestellungen über die Optimierung von Protokollen bis hin zur Entwicklung neuer Assay-Methoden – und gewinnen dadurch ein tiefes Verständnis für die Anforderungen und regulatorisch relevanten Anliegen unserer Kunden. Viele Kunden sind uns seit Jahren treu. Creative Enzymes ist vollständig qualifiziert, präzise Enzymaktivitätsassays für Xylan-1,4-β-Xylosidase bereitzustellen.

Xylan-1,4-β-Xylosidase (EC 3.2.1.37; 4-β-D-Xylan-Xylohydrolase) ist ein Enzym, das Xylooligosaccharide wie Xylobiose und Xylotriose zu Xylose hydrolysiert, indem es den Xylosylrest am nichtreduzierenden Ende erkennt und die β-1,4-glykosidische Bindung spaltet. Es ist ein nützliches Enzym zur Herstellung von Xylose aus dem Xylan der Hemicellulose, einer der am häufigsten vorkommenden Biomasseressourcen. Xylan-1,4-β-Xylosidasen werden derzeit in fünf Familien der Glykosidhydrolasen (GH) klassifiziert: 3, 39, 43, 52 und 54. Der katalytische Wirkmechanismus der Xylan-1,4-β-Xylosidase wird allgemein als Doppelverdrängungsmechanismus unter Beteiligung eines Glykosyl-Enzym-Intermediats akzeptiert, ähnlich dem Mechanismus von Glykosidasen. Zwei essenzielle Aminosäuren spielen dabei eine Schlüsselrolle. Die erste fungiert als Nukleophil und greift das anomere Zentrum des Substrats an, wodurch das kovalente Glykosyl-Enzym-Intermediat gebildet wird. Die zweite wirkt als allgemeiner Säure-/Base-Katalysator, deprotoniert das Wassermolekül und ermöglicht den Angriff auf das anomere Zentrum, um die kovalente Bindung zu spalten und Xylose freizusetzen. Viele pilzliche Xylan-1,4-β-Xylosidasen weisen eine partielle Ähnlichkeit zu GH3 auf, wobei die dem aktiven Zentrum entsprechende Aminosäuresequenz hochkonserviert ist.

Xylan-1,4-β-Xylosidase gewinnt im biotechnologischen Kontext zunehmend an Bedeutung. Tatsächlich nimmt der Einsatz von Xylan-1,4-β-Xylosidase bei der Fermentation von Xylose bzw. xylosehaltigen Hydrolysaten zur Ethanolproduktion oder zur Biokonversion zu Xylitol kontinuierlich zu. Daher ist die Überwachung der Aktivität der Xylan-1,4-β-Xylosidase essenziell. Creative Enzymes bietet eine präzise Aktivitätsbestimmung für Xylan-1,4-β-Xylosidase an. Die Enzymaktivität wird unter Verwendung von 4-Nitrophenyl-β-D-xylopyranosid als Substrat bestimmt. Die Reaktionsgeschwindigkeit wird bei 405 nm überwacht und spiegelt die Menge des freigesetzten 4-Nitrophenols wider. Aufgrund jahrelanger Test- und Entwicklungsarbeit an verschiedenen Hydrolasen gelten unsere Ergebnisse als besonders präzise und zuverlässig. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihr vertrauenswürdiger Partner, der führenden technischen Support und einen personalisierten Kundenservice bietet, wie er in der Branche seinesgleichen sucht.

Abbildung: Kristallstruktur der Xylan-1,4-β-Xylosidase aus Thermoanaerobacterium saccharolyticum.
PDB: 3VSV