Messung der Enzymaktivität der Isocitrat-Dehydrogenase (NAD+) mittels spektrophotometrischer Assays

Die Expertise von Creative Enzymes liegt in der kundenspezifischen Entwicklung von Aktivitätsmessungen für Oxidoreduktasen. Auf Basis exzellenter Methoden und professionell etablierter Prozesse hat sich Creative Enzymes in der Branche der Enzymaktivitätsanalytik einen sehr guten Ruf erarbeitet. Wir bieten präzise und schnelle Prüfdienstleistungen für eine Vielzahl von Enzymen an, einschließlich Isocitrat-Dehydrogenase (NAD⁺).

Isocitrat-Dehydrogenase (ICDH) ist ein Enzym, das am Tricarbonsäurezyklus (TCA-Zyklus) beteiligt ist. Es katalysiert die Dehydrierung und anschließende Decarboxylierung von Isocitrat und bildet unter Verwendung von NAD oder NADP als Cofaktor α-Ketoglutarat und CO₂. Isocitrat-Dehydrogenase (NAD⁺) ist ein NAD⁺-gekoppeltes Enzym, das ausschließlich in Mitochondrien vorkommt und allosterische Eigenschaften aufweist. Das Enzym einiger Spezies kann auch NADP⁺ nutzen, jedoch ist die katalytische Effizienz deutlich geringer. Für seine Aktivität benötigt dieses Enzym Mn²⁺ oder Mg²⁺. Bemerkenswert ist, dass im Gegensatz zu EC 1.1.1.42 (Isocitrat-Dehydrogenase (NADP⁺)) Oxalosuccinat nicht als Substrat für Isocitrat-Dehydrogenase (NAD⁺) verwendet werden kann. Das Enzym ist weit verbreitet in Archaeen, Bakterien und Eukaryoten. Alternative Bezeichnungen für EC 1.1.1.41 sind:

• Isocitrat-Dehydrogenase;
• Beta-Ketoglutarat-Isocitrat-Carboxylase;
• Isocitrat-Säure-Dehydrogenase;
• NAD-abhängige Isocitrat-Dehydrogenase;
• NAD-Isocitrat-Dehydrogenase;
• NAD-gekoppelte Isocitrat-Dehydrogenase;
• NAD-spezifische Isocitrat-Dehydrogenase;
• NAD-Isocitrat-Dehydrogenase;
• Isocitrat-Dehydrogenase (NAD);
• IDH (mehrdeutig);
• Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid-Isocitrat-Dehydrogenase

Die oxidative Decarboxylierung von Isocitrat zu α-Ketoglutarat, katalysiert durch die mitochondriale Isocitrat-Dehydrogenase (NAD⁺), ist ein geschwindigkeitsbestimmender Schritt im Tricarbonsäurezyklus (TCA-Zyklus). Es wurden zahlreiche Entwicklungs- und Optimierungsarbeiten durchgeführt, um die Spezifität der Nutzung von NAD⁺ zu verändern oder die Aktivität dieses Enzyms zu steigern. So konnte beispielsweise durch multiple Mutationen an der Cofaktor-Bindungsstelle die Präferenzspezifität erfolgreich von NADP⁺ auf NAD⁺ umgestellt werden. Aufgrund seiner zentralen Rolle im TCA-Zyklus ist die Isocitrat-Dehydrogenase (NAD⁺) zu einem interessanten Ziel für viele Forschende geworden. Eine geeignete Aktivitätsassay-Methode kann Forschungsarbeiten schnell und präzise unterstützen. Creative Enzymes setzt moderne spektrophotometrische Systeme ein, um eine zuverlässige Analytik für Isocitrat-Dehydrogenase (NAD⁺) bereitzustellen.

Abbildung: Die Kristallstruktur der NAD-abhängigen Isocitrat-Dehydrogenase aus Acidithiobacillus thiooxidans.
Referenz: Imada K et al. Proteins. 2008 70(1):63-71.

Creative Enzymes ist Spezialist für die Messung von Enzymaktivitäten. Mit erfahrenen Fachspezialistinnen und -spezialisten sowie modernster Instrumentierung setzt Creative Enzymes neue Maßstäbe in der Enzymassay-Branche. Auch künftig werden wir Ihre Forschung mit hochwertigen Dienstleistungen kontinuierlich unterstützen.