Messung der Enzymaktivität der 17β-Estradiol-Dehydrogenase mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes bietet die präzise Bestimmung der Enzymaktivität mittels spektrophotometrischer Analyse an, insbesondere den Aktivitätsassay für Estradiol-17β-Dehydrogenase. Obwohl diese Prüfmethode den meisten Unternehmen nicht zur Verfügung steht, können wir als Experten der Enzymologie die Estradiol-17β-Dehydrogenase zuverlässig messen und charakterisieren.

Estradiol-17β-Dehydrogenase (EC 1.1.1.62) ist ein Enzym, das die Oxidation von 17β-Estradiol zu Estron katalysiert und dabei NAD⁺/NADP⁺ als Redox-Kofaktor verwendet. Das Enzym kommt beim Menschen und vielen weiteren Säugetieren vor, darunter Bos taurus, Gallus gallus, Mus musculus und Sus scrofa. Es gehört zur Familie der Oxidoreduktasen, die die CH-OH-Gruppe des Substrats umsetzen und NAD⁺ oder NADP⁺ als Kofaktor nutzen. Der systematische Name dieser Enzymklasse lautet Estradiol-17β:NAD(P)⁺-17-Oxidoreduktase. Weitere gebräuchliche Bezeichnungen sind:

• 20α-Hydroxysteroid-Dehydrogenase;
• 17β,20α-Hydroxysteroid-Dehydrogenase;
• 17β-Estradiol-Dehydrogenase;
• Estradiol-Dehydrogenase;
• Östrogen-17-Oxidoreduktase;
• 17β-HSD;
• HSD17B7

Estradiol-17β-Dehydrogenase ist am Stoffwechselweg der Estradiol-Biosynthese I (über Estron) beteiligt, der Teil des übergeordneten Stoffwechselwegs der Steroidhormon-Biosynthese ist. Östrogene sind Steroidhormone, die in Ovarien, Brustgewebe, Fettgewebe und weiteren Geweben synthetisiert werden. Sie sind essenziell für die sexuelle Entwicklung sowie für die Funktion der Geschlechtsorgane. Östrogene können zudem als Induktoren des Tumorwachstums in östrogenabhängigen malignen Geweben wirken und sind daher Zielstruktur zahlreicher antineoplastischer Therapien. 17β-Estradiol ist das wichtigste Östrogen beim Menschen und weist eine ausgeprägte östrogene Wirkung auf. Erhöhte Östrogenspiegel während der Schwangerschaft können mit einem erhöhten Brustkrebsrisiko assoziiert sein. Folglich sind Enzyme dieses Stoffwechselwegs, insbesondere die Estradiol-17β-Dehydrogenase, Ziel bestehender oder potenzieller Krebstherapien. Trotz der vielversprechenden Perspektiven der Estradiol-17β-Dehydrogenase in der biologischen und pharmazeutischen Industrie ist die Entwicklung von Aktivitätsassays für dieses Enzym aufgrund der eingeschränkten Verfügbarkeit von Substraten und unzureichender Kenntnisse über das Enzym bislang begrenzt. Creative Enzymes hat hingegen auf Basis eines fundierten Verständnisses von Struktur und Eigenschaften dieses Enzyms eigenständig robuste und zuverlässige Aktivitätsassays entwickelt. Die katalytische Aktivität der Estradiol-17β-Dehydrogenase kann mittels spektrophotometrischer Analyse bestimmt werden, indem entweder die Reduktion von NAD⁺ bei 260 nm oder die Oxidation von NADH bei 340 nm verfolgt wird. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihre beste Wahl für sämtliche Forschungs- und Entwicklungsaktivitäten rund um die Estradiol-17β-Dehydrogenase.

Abbildung: Kristallstruktur der Estradiol-17β-Dehydrogenase 1 mit A-diol. PDB: 3KLP