Enzymaktivitätsmessung für 12 Alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase

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12 Alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase (EC 1.1.1.176) gehört zur Familie der Oxidoreduktasen. Genauer gesagt, ist es ein Mitglied der Oxidoreduktasen, die auf die CH-OH-Gruppe des Elektronendonors mit NAD⁺ (Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid) oder NADP⁺ (Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid-Phosphat) als Elektronenakzeptor wirken. Im Stoffwechsel baut die 12 Alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase die 12 Alpha-Hydroxygruppe von Gallensäuren sowie Gallalkoholen zu Cholesterinen ab. In der Enzymologie katalysiert das Enzym die Oxidation von 3 Alpha,7 Alpha,12 Alpha-Trihydroxy-5 Beta-Cholanat und NADP⁺ zu 3 Alpha,7 Alpha-Dihydroxy-12-Oxo-5 Beta-Cholanat mit NADPH und H⁺. Der systematische Name dieser Enzymklasse ist 12 Alpha-Hydroxysteroid:NADP⁺ 12-Oxidoreduktase, und es wurde auch benannt als:

• 12alpha-Hydroxy-Steroid-Dehydrogenase;
• NAD+-abhängige 12alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase;
• NADP+-12alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase

12 Alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase ist NAD-abhängig und aktiv gegen konjugierte und nicht konjugierte Formen von Gallensalzen. Es ist am Stoffwechsel von Gallensalzen und Cholesterin beteiligt. Cholesterin ist der essentielle Bestandteil der Zellmembranstruktur, um deren Integrität und Fluidität aufrechtzuerhalten, und der Vorläufer für die Biosynthese von Steroidhormonen und Gallensäuren. Darüber hinaus könnte die 12alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase, die hitzelabil ist, zusammen mit 3alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenasen, die hitzestabil sind, in der spektrophotometrischen Quantifizierung von Gallensalzen angewendet werden.

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Abbildung: Moleküldiagramme der chemischen Reaktion, die von 12alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase katalysiert wird.