Enzymaktivitätsmessung für 3Alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase (Si-spezifisch) unter Verwendung von spektrophotometrischen Assays

Creative Enzymes bietet die effiziente, genaue und präzise Aktivitätsmessung von 3alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase. Mit anhaltendem Einsatz in der Enzymforschung und konsistenter Servicequalität hat Creative Enzymes das beste Vertrauen und Lob von unzähligen Kunden gewonnen. Wir setzen unsere Enzymforschung und -entwicklung mit immer mehr Durchbrüchen fort, um die Anforderungen der Industrie zu erfüllen.

3Alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase (Si-spezifisch) (EC1.1.1.50; 3α-HSDH) ist eine Klasse von Enzymen, die die reversible Oxidoreduktionsreaktion zwischen 3alpha-Hydroxysteroid und 3-Oxosteroid katalysiert. Es erzeugt gleichzeitig NAD(P)H, das als Wasserstoffdonor für viele biosynthetische Prozesse wirkt. Dieses Enzym existiert nicht nur in Bakterien, wie Pseudomonas sp. und Eubacterium sp., sondern auch in Eukaryoten, wie Mensch, Maus und Rind. 3Alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase (Si-spezifisch) gehört zur Familie der Oxidoreduktasen. Insbesondere ist es die Oxidoreduktase, die die CH-OH-Gruppe des Substrats katalysiert und NAD⁺ oder NADP⁺ als Kofaktor verwendet. Genauer gesagt ist 3alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase ein Mitglied der Hydroxysteroid-Dehydrogenasen. Der systematische Name dieser Enzymklasse ist 3alpha-Hydroxysteroid: NAD(P)⁺ Oxidoreduktase (B-spezifisch), die auch bekannt ist als:

• Hydroxyprostaglandin-Dehydrogenase;
• 3alpha-Hydroxysteroid-Oxidoreduktase;
• Sterognost 3alpha;
• 3alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase (B-spezifisch);
• 3alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase (B-spezifisch)

Als ein breit verwendetes Enzym funktioniert 3alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase (Si-spezifisch) über drei Stoffwechselwege: Biosynthese von primären Gallensäuren, c21-Steroid-Hormonstoffwechsel und Androgen- und Östrogenstoffwechsel. Die Umwandlung von Androstendion aus der Abbau von Testosteron und Androsteron sind die kritischen Schritte im Androgen- und Östrogenstoffwechsel. Sowohl Testosteron als auch Androsteron sind die einzigen Kohlenstoff- und Energiequellen für bestimmte Mikroorganismen, wie Comamonas testosteroni. In Comamonas testosteroni wird der Abbau von Testosteron durch Dehydrierung der 17β-Hydroxylgruppe zu Androst-4-ene-3,17-dione eingeleitet, und der Abbau von Androsteron wird durch dieselbe Umwandlung eingeleitet, die von 3α-Hydroxysteroid-Dehydrogenase oder anderen Dehydrogenasen katalysiert werden muss. Eine Reihe von Substraten kann von 3alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase (Si-spezifisch) genutzt werden, einschließlich 1-Acenaphthenol, 17beta-Estradiol, 3-Hydroxysteroid, 3-Oxocholsäure, 5alpha-Androstan-3,17-dione usw.

Aufgrund der Vielfalt der Substrate war der Aktivitätsnachweis mittels Spektrophotometrie von 3alpha-Hydroxysteroid 3-Dehydrogenase (Si-spezifisch) in industriellen Anwendungen nicht schwer einzurichten. Nach Jahren intensiver Untersuchungen hat Creative Enzymes genug Vertrauen, um den erstklassigen Service in der Enzymaktivitätsmessung anzubieten. Creative Enzymes ist das führende Unternehmen in der enzymologischen Wissenschaft und Technologie und wird die Kunden mit maßgeschneiderten Dienstleistungen zufriedenstellen.

Abbildung: Die dreidimensionale Struktur des 3alpha-Hydroxysteroid-Dehydrogenase-Monomers von Comamonas testosteroni mit gebundenem NAD⁺ Co-Substrat.
Referenz: Clemens Grimm et al. J. Biol. Chem. 2000, 275:41333-41339