Messung der Enzymaktivität der 3α‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase (Si‑spezifisch) mittels spektrophotometrischer Assays

Creative Enzymes bietet eine effiziente, exakte und präzise Aktivitätsbestimmung der 3alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase. Durch kontinuierliches Engagement in der Enzymforschung und gleichbleibend hohe Servicequalität hat sich Creative Enzymes das Vertrauen und die Anerkennung unzähliger Kunden erworben. Wir setzen unsere Forschung und Entwicklung im Enzymbereich mit immer neuen Durchbrüchen fort, um den Anforderungen der Industrie gerecht zu werden.

Die 3Alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase (Si‑spezifisch) (EC 1.1.1.50; 3α‑HSDH) ist eine Enzymklasse, die die reversible Oxidoreduktionsreaktion zwischen 3alpha‑Hydroxysteroiden und 3‑Oxosteroiden katalysiert. Dabei wird gleichzeitig NAD(P)H gebildet, das als Wasserstoffdonor für zahlreiche biosynthetische Prozesse dient. Dieses Enzym kommt nicht nur in Bakterien wie Pseudomonas sp. und Eubacterium sp. vor, sondern auch in Eukaryoten wie Mensch, Maus und Rind. Die 3Alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase (Si‑spezifisch) gehört zur Familie der Oxidoreduktasen; insbesondere katalysiert sie die Umsetzung der CH‑OH‑Gruppe des Substrats und nutzt NAD⁺ oder NADP⁺ als Kofaktor. Genauer ist die 3alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase ein Mitglied der Hydroxysteroid‑Dehydrogenasen. Der systematische Name dieser Enzymklasse lautet 3alpha‑Hydroxysteroid:NAD(P)⁺‑Oxidoreduktase (B‑spezifisch), auch bekannt als:

• Hydroxyprostaglandin‑Dehydrogenase;
• 3alpha‑Hydroxysteroid‑Oxidoreduktase;
• Sterognost 3alpha;
• 3alpha‑Hydroxysteroid‑Dehydrogenase (B‑spezifisch);
• 3alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase (B‑spezifisch)

Als breit eingesetztes Enzym ist die 3alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase (Si‑spezifisch) an drei Stoffwechselwegen beteiligt: der primären Gallensäurebiosynthese, dem C21‑Steroidhormonstoffwechsel sowie dem Androgen‑ und Östrogenstoffwechsel. Die Umwandlung von Androstendion aus Testosteron sowie der Abbau von Androsteron sind entscheidende Schritte im Androgen‑ und Östrogenstoffwechsel. Sowohl Testosteron als auch Androsteron dienen bestimmten Mikroorganismen, wie Comamonas testosteroni, als alleinige Kohlenstoff‑ und Energiequelle. In Comamonas testosterone wird der Abbau von Testosteron durch Dehydrierung der 17β‑Hydroxylgruppe zu Androst‑4‑en‑3,17‑dion initiiert; der Abbau von Androsteron wird durch dieselbe Umwandlung eingeleitet, die durch 3α‑Hydroxysteroid‑Dehydrogenase oder andere Dehydrogenasen katalysiert werden muss. Eine Reihe von Substraten kann von der 3alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase (Si‑spezifisch) umgesetzt werden, darunter 1‑Acenaphthenol, 17beta‑Estradiol, 3‑Hydroxysteroid, 3‑Oxocholsäure, 5alpha‑Androstan‑3,17‑dion usw.

Aufgrund der Substratvielfalt ist die Aktivitätsprüfung der 3alpha‑Hydroxysteroid‑3‑Dehydrogenase (Si‑spezifisch) mittels Spektrophotometrie für industrielle Anwendungen gut etablierbar. Auf Basis jahrelanger, fundierter Untersuchungen verfügt Creative Enzymes über die erforderliche Expertise, um einen erstklassigen Service für die Messung der Enzymaktivität bereitzustellen. Creative Enzymes ist ein führendes Unternehmen in den enzymologischen Wissenschaften und Technologien und erfüllt Kundenanforderungen durch maßgeschneiderte Dienstleistungen.

Abbildung: Die dreidimensionale Struktur des 3alpha‑Hydroxysteroid‑Dehydrogenase‑Monomers aus Comamonas testosteroni mit gebundenem NAD⁺‑Cosubstrat.
Referenz: Clemens Grimm et al. J. Biol. Chem. 2000, 275:41333–41339