Messung der Enzymaktivität der 6-Phospho-β-Glucosidase

Mit jahrzehntelanger Erfahrung und einzigartigen Technologien hebt sich Creative Enzymes durch das Engagement ab, Kunden aus Wissenschaft und Industrie Enzymaktivitätsassays in höchster Qualität bereitzustellen. Wir arbeiten mit einer Vielzahl unterschiedlicher Kunden zusammen, um deren Anforderungen in der explorativen Forschung und der Prozessoptimierung zu unterstützen. Der besondere Vorteil unserer spektrophotometrischen Analytik ermöglicht es uns, Wettbewerber zu übertreffen und die Zuverlässigkeit der Testergebnisse sicherzustellen. Creative Enzymes bietet Ihnen präzise Messungen der enzymatischen Aktivität für 6-Phospho-β-Glucosidase.

6-Phospho-β-Glucosidase (EC 3.2.1.86; 6-phospho-β-D-glucosyl-(1,4)-D-glucose glucohydrolase) gehört zur Glycosidhydrolase-Familie 1 (GH1) und katalysiert die Hydrolyse von β-1,4-verknüpfter Cellobiose-6-phosphat (Cellobiose-6’P) zu Glucose und Glucose-6-phosphat, einem wichtigen zellulären Vorläufermetaboliten. Die Produkte dieser Reaktion werden anschließend über den energiegewinnenden glykolytischen Stoffwechselweg weiter metabolisiert. 6-Phospho-β-Glucosidase ist ein Single-Domain-Protein, das eine (β/α)₈-Fassstruktur (TIM-Barrel) annimmt, eine typische Faltung von Mitgliedern der GH1-Familie. Laut CAZy-Datenbank weist die GH1-Familie eine große funktionelle Diversität auf und umfasst Hydrolasen mit 19 enzymatischen Aktivitäten. Die 6-Phospho-β-Glucosidase aus Thermotoga maritima besteht aus einem katalytischen Modul mit 415 Aminosäureresten und liegt in Lösung höchstwahrscheinlich in einem Dimer–Tetramer-Gleichgewicht vor. Für die Katalyse benötigt die 6-Phospho-β-Glucosidase aus T. maritima sowohl NAD⁺ als auch Mn²⁺.

Abbildung 1: Vorgeschlagener Mechanismus der 6-Phospho-β-Glucosidase aus T. maritima.
Referenz: Vivian L. Y. Yip, Annabelle Varrot, Gideon J. Davies, et al. Journal of the American Chemical Society, 2004, 126(27):8354.

Creative Enzymes bietet den präzisesten Enzymaktivitätsassay für 6-Phospho-β-Glucosidase. Im Detail wird die Enzymaktivität in einer gekoppelten Reaktion aus 6-Phospho-β-Glucosidase und Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) bestimmt, bei der die Oxidation von 6-P-β-Glucose mit der Reduktion von NADP⁺ gekoppelt ist und der Anstieg der Absorption bei 340 nm gemessen wird. Tatsächlich sind die Ergebnisse unserer Tests besonders belastbar und validiert; dies wird durch modernste spektrophotometrische Instrumentierung und unsere State-of-the-Art-Technologie gewährleistet. Darüber hinaus konzentrieren sich unsere Wissenschaftler kontinuierlich darauf, detaillierte Enzymeigenschaften zu charakterisieren und die Assay-Methoden zu optimieren. Insgesamt ist Creative Enzymes Ihr verlässlicher Partner und gewährleistet erstklassige Kundenzufriedenheit.

Abbildung 2: Die Kristallstruktur der 6-Phospho-β-Glucosidase aus T. maritima.
PDB: 1UP4