Messung der Enzymaktivität für Beta-Agarase

Creative Enzymes bietet eine zuverlässige Aktivitätsbestimmung für β-Agarase. Auf Basis der in den vergangenen Jahren durchgeführten Aktivitätstests einer Vielzahl von Enzymen hat Creative Enzymes umfassende Forschungserfahrung aufgebaut. Wir implementieren kontinuierlich Verbesserungen und Optimierungen unserer internen Prüfmethoden, um Enzymaktivitätsergebnisse von höchster Qualität und Reproduzierbarkeit bereitzustellen.

Agar ist das wichtigste Polysaccharid in den Zellwandbestandteilen mariner Rotalgen. Agar enthält D‑Galactose und 3,6‑Anhydro‑L‑Galactose als monomere Bausteine, die über alternierende α‑1,3‑ bzw. β‑1,4‑glykosidische Bindungen verknüpft sind. Im agarolytischen System werden auf Agar wirkende Enzyme in zwei unterschiedliche Typen klassifiziert, α‑Agarase (EC 3.2.1.58) und β‑Agarase (EC 3.2.1.81; Agarose‑4‑Glycanohydrolase), abhängig davon, welche glykosidische Bindung diese Agarasen während der Depolymerisation spalten. α‑Agarasen spalten die α‑1,3‑Bindung von Agarose und erzeugen Agarooligosaccharide. β‑Agarasen hydrolysieren spezifisch β‑1,4‑glykosidische Bindungen und bilden Neoagarooligosaccharide mit unterschiedlichen Polymerisationsgraden (DP). Die Hauptprodukte der β‑Agarasen sind Neoagarohexaose (DP6) und Neoagarotetraose (DP4), die weiter zu α‑Neoagarobiose (DP2) gespalten werden. α‑Neoagarobiose wird anschließend durch α‑Neoagarobiose‑Hydrolase in monomere Zucker gespalten, die danach in der Zelle metabolisiert werden.

Abbildung 1: Schema der Agar‑Verdauung durch β‑Agarase.
Referenz: Temuujin U, Chi W J, Lee S Y, et al. Applied microbiology and biotechnology, 2011, 92(4): 749-759.

Agarase‑Aktivitäten wurden in vielen Bakterien nachgewiesen, darunter Microbulbifier, Pseudoalteromonas, Vibrio und Zobellia. Die Agarase‑Aktivitäten dieser Bakterientypen stehen überwiegend im Zusammenhang mit saprophytischer bzw. phytopathogener Aktivität. Da nachgewiesen wurde, dass die Hydrolyseprodukte von Agar vielfältige medizinische bzw. pharmazeutische Effekte besitzen – etwa präbiotische, antioxidative, antitumorale sowie hautbefeuchtende und aufhellende Wirkungen –, haben Agarasen in der Biotechnologiebranche erhebliche Aufmerksamkeit erlangt. In jüngerer Zeit wurde gezeigt, dass marine Algen eine potenziell erneuerbare Biomasse für die Bioenergieproduktion darstellen; entsprechend haben mikrobielle Agarase‑Aktivitäten neue Perspektiven für die enzymatische Verzuckerung von Agar‑Biomasse eröffnet.

Creative Enzymes bietet mit Stolz einen besonders zuverlässigen enzymatischen Aktivitätsassay für β‑Agarase an. Die Aktivität der β‑Agarase wird mittels der Dinitrosalicylsäure‑Methode (DNS) bestimmt, indem der Anstieg der Konzentration reduzierender Zucker gemessen wird. Die optische Dichte wird bei 520 nm gemessen. Die hohe Zuverlässigkeit der Assayergebnisse wird durch unsere modernste Technologie, ein exzellentes Expertenteam sowie hochentwickelte Instrumentierung sichergestellt. Unser Anspruch, erstklassige Services und maximale Kundenzufriedenheit zu liefern, hat uns zu einem der bevorzugten Anbieter auf dem globalen Markt gemacht.

Abbildung 2: Kristallstruktur der β‑Agarase aus Zobellia galactanivorans.
PDB: 1O4Y