Messung der Enzymaktivität der Glycerolkinase

Creative Enzymes ist ein industrielles Biotechnologieunternehmen, das auf Enzymaktivitätsassays spezialisiert ist. Unsere Kompetenzen sind umfassend und decken Enzymassays in allen Phasen von Entdeckung, Entwicklung und Optimierung ab. Als zuverlässiger Anbieter liefert Creative Enzymes Dienstleistungen in hoher Qualität bei einem wettbewerbsfähigen Preis-Leistungs-Verhältnis. Im Folgenden stellen wir mit Stolz die präziseste Aktivitätsmessung für Glycerolkinase bereit.

Glycerolkinase (EC 2.7.1.30; ATP:Glycerol-3-Phosphotransferase, GK) ist ein wichtiges Stoffwechselenzym an der Schnittstelle des Kohlenhydrat- und Lipidstoffwechsels. GK katalysiert den geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Glycerolverwertung, die Mg-ATP-abhängige Phosphorylierung von Glycerol, wodurch Glycerol-3-phosphat (G3P) entsteht. Neben ihren biochemischen Funktionen ist GK zudem ein „Moonlighting“-Protein, das als ATP-stimulierter Translokationspromotor (ASTP) fungiert. Darüber hinaus besitzt GK weitere Funktionen, darunter die Bindung an Histone, die Interaktion mit Porin sowie eine zentrale Rolle in der Apoptose. Ferner haben einige Studien gezeigt, dass GK an der Insulinsensitivität beteiligt sein könnte, da es als Reaktion auf Thiazolidindione überexprimiert wird, gängige Arzneistoffe zur Behandlung des Diabetes mellitus Typ 2. Schließlich wird die katalytische Aktivität von GK auf Proteinebene durch Hemmung durch zwei allosterische Effektoren reguliert: das glukosespezifische Phosphocarrier-Protein des Phosphoenolpyruvat:Zucker-Phosphotransferase-Systems, III^Glc (auch als IIA^Glc bekannt), sowie das glykolytische Intermediat Fructose-1,6-bisphosphat (FBP).

GK ist in Archaeen, Bakterien und Eukaryoten ubiquitär. Bis heute wurden prokaryotische GKs am umfassendsten untersucht. Bei den Eukaryoten liegen strukturelle Informationen bislang nur für die GK aus Plasmodium falciparum vor. Entsprechend ist über Struktur und Mechanismus von GKs nur wenig bekannt. Einer der Gründe für die begrenzte mechanistische Datenlage ist das Fehlen eines praktikablen Aktivitätsassays. Creative Enzymes hat jedoch einen präzisen Aktivitätsassay für GK entwickelt und bietet diesen an. Die Enzymaktivität von GK kann mittels eines ADP-gekoppelten spektrophotometrischen Assays bestimmt werden. Beispielsweise wird die Umsatzrate durch Kopplung der Reaktion an die Bildung von Lactat aus Pyruvat in Gegenwart von NADH überwacht. Die Verbrauchsrate von NADH wird spektrophotometrisch bei 340 nm gemessen. Creative Enzymes verpflichtet sich, der zuverlässigste Anbieter für enzymatische Assays auf dem globalen Markt zu sein. Wir erbringen die Dienstleistungen innerhalb der kürzestmöglichen Zeitspanne ab Auftragserteilung. Der schnelle Service, die bestmögliche Kundenbetreuung und dedizierte Ressourcen haben Creative Enzymes zum bevorzugten Anbieter gemacht.

Abbildung: Die Kristallstruktur der Glycerolkinase aus Trypanosoma brucei gambiense.
PDB: 5AZI